199486. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vegyesen szubsztituált foszfatidil-kolinok és foszfatidil- -etanol-aminok előállítására
3 HU 199486 B 4 -trifenil-metil-csoportot. Az olyan (III) általános képletű glicero-foszfo-etanol-amin-származékoknál, amelyeknél az R], Rí és Rí szubsztituens egyike trifenil-metil-csoportot jelent, az N-trifenil-metil-csoport megtartása szükséges és az olyan (III) általános képletű glicero-foszfokolin-származékoknál, amelyekben Rí, Rí és RJ szubsztituens egyenként metilcsoportot jelent, előnyös, ha az 1- -O-trifenil-metil-csoport lehasítására Lewis-savat alkalmazunk. Az 1-O-trifenil-metil-csoportot azonban a glicero-foszfo-kolin-származékoknál szervetlen savval, például ásványi savval, így hidrogén-halogenidekkel, pl. hidrogén-bromiddal, perklórsavval és hasonlókkal, vagy szerves savval, így triklór-ecetsavval, trifluor-ecetsavval és hasonlókkal is lehasíthatjuk. Az acil-vándorlát megakadályozására előnyösen 20°C alatti hőmérsékletet tartunk be. Különösen hatásos detritilezőszerként a bór-trifluorid-metanol-komplexet alkalmazzuk, metilén-kloridban, 0°C-on. A (IV) általános képletű vegyületeket ennek során olyan tisztán kapjuk, hogy a további feldolgozás előtt nem szükséges további tisztítási műveletnek alávetni. Különösen előnyös a szintézisnek azon változata, amelynél az 1-O-trifenil-metil-csoport lehasítása után kapott (IV) általános képletű vegyületet közvetlenül tovább acilezzük, mivel azáltal a tisztítási műveleteknél adott esetben fellépő acilvándorlások a szintézis ezen stádiumában döntően csökkenthetők. A (IV) általános képletű vegyieteknek az (la) általános képletű 1,2-diacil-származékokká történő tovább acilezését ismét a fentiekben, a 2-helyzet acilezésénél említett RjCOOH általános képletű savak reaktív karbonsav-származékaival végezzük. Az acilcsoportnak a glicerin 1-helyzetébe való bevitelére különösen az említett savak anhidridjei váltak be. A reakciót az acilezésnél szokásos reakciókörülmények között hajtjuk végre, savmegkötőszer jelenlétében, előnyösen vízmentes, poláros aprotonos oldószerben vagy oldószerelegyben, ennek során a fentiekben, a 2-helyzet acilezésénél megadott savmegkötőszerek és oldószerek mellett halogénezett szénhidrogénekkel, így metilén-kloriddal, kloroformmal, szén-tetrakloriddal, klór-benzollal és hasonlókkal alkotott oldószerelegyek is számításba jönnek. Különösen beváltak a metilén-kloridból és 4-N,N-dimetil-amino-piridinbőí álló elegyek, amelyek egyidejűleg a savmegkötőszer funkcióját is betöltik. A reakció számára a szobahőmérséklettől az oldószer forráspontjáig vagy a legalacsonyabb forró oldószerkomponens forráspontjáig terjedő hőmérséklettartomány választható. A reakciót előnyösen szobahőmérsékleten vagy némileg magasabb, 20—40°C-on hajtjuk végre. A képződött (la) általános képletű diacil-származékokat a preparatív kémiában szokásos tisztítási módszerekkel tiszta alakban állíthatjuk elő. így például a nyersterméket vízzel nem elegyedő oldószerben oldhatjuk és híg vizes bázissan, például vizes ammónium-hidroxid-oldattal végzett extrakció útján eltávolíthatjuk az acilezőszer feleslegét, vagy a terméket átkristályosítással vagy átcsapással is tisztíthatjuk. Ezen túlmenően a szokásos kromatográfiás módszerek vagy a két fázis közötti többszörös megoszlatás is alkalmas az’ (la) általános képletű vegyületek tiszta alakban való előállítására. Azon (la) általános képletű vegyületekből, amelyekben az Rj, R2’ és Rí szubsztituens egyike trifenil-metil-csoportot jelent, azok az (I) általános képletű 1,2-diacil-sn-glicero-3-foszfo-etanol-aminok, amelyekben R|, Rj és Rí jelentése hidrogénatom, az N-trifenil-metil-csoport lehasításával állíthatók elő. A lehasításra szervetlen savak, például ásványi savak, így hidrogén-klorid vagy hid - rogén-bromid, vagy előnyösen szerves savak, például halogénezett karbonsavak, így triklór- vagy trifluor-ecetsav alkalmasak, emellett a glicerin 1- és 2-helyzetében való dezacilezés elkerülésére aprotonos oldószerben dolgozunk. Az N-trifenil-metil-csoportot előnyösen trifluor-ecetsavval, metilén-kloridban, 0°C hőmérsékleten távolítjuk el. Az ismertetett vegyületek jellemzését és tisztaságának ellenőrzését vékonyréteg-kromatográfiásan és spektroszkópiai módszerekkel, különösen ‘H-NMR-spektroszkópiai módszerrel végeztük. A meghatározott spektroszkópiai adatok összhangban vannak a vegyületek ismertetett vegyi szerkezetével. A találmány szerinti eljárással az (I) általános képletű l,2-diacil-sn-glicero-3-foszfokolinok és l,2-diacil-sn-glicero-3-foszfo-etanol-aminok enzimek felhasználása nélkül állíthatók elő. Mivel az (I) általános képletű közbenső termékek alkalmazása esetén enzimek alkalmazása — amelyeket eddig az ilyen vegyesen szubsztituált foszfatidil-kolinok és foszfatidil-etanol-aminok félig szintetikus előállításánál alkalmazni kellett — nem szükséges, az (I) általános képletű vegyületek üzemi méretekben is könnyen előállíthatok. A találmány további előnyei abban rejlenek, hogy az l-helyzetű, illetve 2- -helyzetű acilezéshez alkalmazott karbonsavszármazékok gyakorlatilag teljes mértékben értékesíthetők. Az eddig alkalmazott enzimatikus* eljárásnál az 1- és 2-helyzetet a glicero-foszfo-kolinban, illetve az N-védett glicero-foszfo-etanol-aminokban először két azonos acilcsoporttal szubsztituálták, majd a 2-helyzetű acilcsoportot foszfolipáz A2 segítségével lehasították és ebbe a közbenső termékbe vitték be egy további acilezési reakcióval a kívánt acilcsoportot. Ennek során a 2-helyzetben az első acilezésre alkalmazott karbonsav veszendőbe megy. Továbbá, az enzimatikus hidrolízis sebessége és hatékonysága függ a karbonsav jellegétől, míg a (IV) általános képletű vegyületek talál3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
