199484. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-(szubsztituált)-propenil-amino-tiazolil-cefem-karbonsav-észter-származékok előállítására
35 HU 199484 B 36 22. példa A 7-[(Z)-2-(2-amino-tiazol-4-il)-2-metoxi-imino-acetamido] -3- [(Z)-l-pentenil] -3-cefejp-4-karbonsav (la, R2=CH3, R3=CH2CH3, Z izomer) előállítása: 2.5 g (4,27 mmól) XIV vegyület (R2=CH3, R3=CH2CH3), 2,5 ml anizol és 7,5 ml trifluor-ecetsav keverékét szobahőmérsékleten kevertetjük 10 percen keresztül, majd 3 ml térfogatra pároljuk. A maradékot 100 ml izopropil-éterrel hígítjuk, a kívánt termék 2 g trifluor-acetálját nyerve (Z és E izomer aránya 5:1). A nyers terméket vizes metanolban oldjuk, és az oldatot 300 ml PrepPAK C18 töltetből (Waters) készített oszlopon kromatografáljuk a következő sorrendben használva az adott.eluenseket: víz, 10%-os metanol, 20%-os metanol, 30%-os metanol, és 40%-os metanol. Az eluátumot HPLC-vel vizsgáljuk. A Z izomert tartalmazó 40%-os metanolos frakciókat egyesítjük, szárazra pároljuk. A bepárlási maradékot metanolban oldjuk és szűrjük. A szűrlethez hozzáadunk 200 ml izopropil-étert és a keletkező szilárd anyagot szűréssel elválasztjuk, izopropil-éterrel mossuk, csökkentett nyomáson foszfor-pentaoxid felett szárítjuk, 695 mg kívánt termékhez jutva, mely HPLC szerint 90%-os tisztaságú. A kitermelés 39%-os. Op.: 150—155 (bomlik). IR, kmax (KBr): 1770, 1670, 1630, 1530, 1370, 1180, 1040 cm-'. UV, kmax (foszfátpuffer, pH=7): 229 (16000), 283 (15000) nm (e). NMR, delta (D20+Na2C03) : 1,01 (3H, t, J=7 Hz, CH2CH3), 1,3-1,7 (2H, m, CH2CH2CH3), 2,0—2,3 (2H, m, =CH2- -CH2), 3,46 (1H, d, J=18 Hz, 2-H), 3,76 (1H, d, J=18 Hz, 2-H), 4,15 (3H, s,OCH3), 5,38 (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H), 5,5—5,9 (1H, m, CH=C), 5,92 (1H, d, J=4,5 Hz, 7-H), 6,09 (1H, d, J= = 11 Hz, 3-CH=0), 7,16 (1H, s, tiazol-H), ppm. Elemanalízis a C18H26N405S2.l/2 H20 képlet alapján: számított: C: 46,94, H: 4,82, N: 15,21, S‘ 13 92%• mért: C: 46,93,° 47,04, H: 4,66, 4,71; N: 15,00, 15,00; S: 13,34, 13,36%. HPLC, retenciós idő: 9,9 perc (metanol/fosz-. fátpuffer, pH=7, 2:3; 1 ml/perc). 23. példa • A 7-[(Z)-2-(2-amino-tiazoI-4-il)-2-metoxi-imino-acetamido] -3- [(E)-l-pentenil] -3-cefem-4-karbonsav (la, R^CHj, R3=CH2CH3, E izomer) előállítása:, A 22. példa 40%-os metanolos eluátumának E izomert tartalmazó frakcióit egyesítjük és szárazra pároljuk. 455 mg cisz- és transz izomer keverékét kapjuk, melyben az izomerek aránya 1:1. A nyersterméket 300 ml PrepPAK C,8 (Waters) töltetből készített oszlopon újra kromatografáljuk, 35%-os metanollal eluálva. A frakciókat HPLC-vel vizsgáljuk. A transz izomert tartalmazó frakciókat egyesítjük, 10 ml térfogatra pároljuk és fagyasztva szárítjuk, 89 mg terméket nyerve, ami a HPLC szerint 75%-os tisztaságú. A kitermelés 5%-os. Op.: 180°C (fokozatosan bomlik). ÍR, Kax (KBr): 1770, 1660, 1630, 1530, 1380, 1040 cm“1). UV, kmax (foszfátpuffer, pH=7): 228 (17000), 292 (22000) nm (e). NMR, delta (D20+Na2C03) : 1,05 (3H, t, J=7 Hz, CHjCHa), 1,2—1,8 (2H, m, CH2CH2CH3), 2,1—2,5 (3H, m, =CH-CH2CH2), 3,81 (2H, s, 2-H), 4,16 (3H, s, OCH3), 5,37 (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H), 5,91 (1H, d, J=4,5 Hz, 7-H), 5,9—6,3 (1H, m, CH=C), 6,67 (1H, d, J=16Hz, 3-CH=C), 7,17 (1H, s, tiazol-H), ppm. HPLC, retenciós idő: 12,3 perc (metanol/ /foszfátpuffer, pH=7, 2:3; 1 ml/perc). 24. példa Az l-acetoxi-etil-7- [(Z)-2-(2-amino-tiazol-4-il )-2-metoxi-imino-acetamido] -3- [ ( Z ) -1 - -pentenilJ-3-cefem-4-karboxilát (lb, R =CH3, R3=CH2CH3, R4=-CH(CH3)OCOCH3, Z izomer) előállítása 225 mg (0,5 mmól) la (R2=CH3, R3= =CH2CH3, Z izomer) és 69 mg (0,5 mmól) kálium-karbonát 5 ml dimetil-formamidban készült kevertetett keverékéhez 0—5°C hőmérsékleten hozzáadjuk 84 mg (0,5 mmól) 1-acetoxi-etil-bromid 1 ml dimetil-formamidban készült oldatát, és a reakciókeveréket szobahőmérsékleten kevertetjük 30 percen át. A keverékhez újabb 84 mg (0,5 mmól) bromidot adunk 1 ml dimetil-formamidban oldva, és 5—10°C hőmérsékleten kevertetjük 30 percen át. A reakciókeveréket 100 ml etil - -acetáttal extraháljuk, az extraktumot nátrium-hidrogén-karbonát vizes oldatával, vízzel és nátrium-klorid telített oldatával mossuk és magnézium-szulfáttal szárítjuk. Bepárlás után az olajos maradékot 30 g szilikagélből (Kieselgel 60) készített oszlopon kromatografáljuk, kloroformmal, majd 1% metanolt tartalmazó kloroformmal eluálva. Az eluálást vékonyréteg-kromatográfiával és HPLC- vel követjük nyomon. Az 1% metanolt tartalmazó kloroformos eluátum megfelelő frakcióit egyesítjük és bepároljuk. A bepárlási maradékot éter/n-hexán elegyében eldörzsöijük, 91 mg kívánt terméket nyerve. A nyers mellékfrakciókat újra kromatografálva további 63 g kívánt termékhez jutunk. Az összes termék súlya 154 mg, ami 57%-os kitermelésnek felel meg. HPLC-vel megállapított tisztasága: 80%-os. Op.: 100—110°C (bomlik). IR, kmax (KBr): 1765, 1670, 1610, 1530, 1380, 1240, 1210,1180, 1100, 1070, 1040 cm*1. UV, kmax (metanol): 233 (17000), 290 (13000) nm (e) NMR, delta (CDC13): 0,90 (3H, t, J=7 Hz, CH2CH3), 1,2—1,8 (5H, m, CHCH3 és 19 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
