199461. lajstromszámú szabadalom • Eljárás oktahidro-indolizin és -pirido(1,2-a)pirimidin-propánsav-származékok előállítására
HU 199461 B 16 Tetrahidrodekarboxidezoxi-A-faktor (2c képiét) FD/MS: (M+H)+=212 'H NMR (270 MHz, D20): Ô (ppm) 1,20— 2,20 (10H, erős átfedés), 2,46 (3H, m), 3,45 (3H, m). 2. példa A58365 B faktor hidrogénezése 157 mg A58365 B-faktort (körülbelül 60% tisztaságú) 40 ml jégecetben oldunk és az oldathoz platina-oxid katalizátort adunk. A keveréket Parr-féle hidrogénező berendezésbe töltjük és az edényben a hidrogéngázt 4.137X XlO5 Pa-ra komprimáljuk. A hidrogénezést 60oC-on 17 órán át folytatjuk. A keveréket lehűtjük szobahőmérsékletre, a katalizátort szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet liofilizálva 189,5 mg szennyezett redukciós termékkeveréket kapunk. A keveréket tisztítjuk és a redukciós termékeket egymástól fordított fázisú CIg kromatográfiával választjuk el a következőképpen. 2,54 cm belső átmérőjű és 30,48 cm hoszszú Zorbax ODS oszlopot (részecskeméret 12 p) használunk. A mozgó fázisként használt oldószerelegy: A: 0,2% hangyasav/víz; B: 0,2% hangyasav/10% acetonitril/víz; C: 0,2% hangyasav/12,5% acetonitril/víz; D: 50% vizes acetonitril. Az átfolyási sebesség 10 ml/min és 20 mles frakciókat (140) gyűjtünk. Az 1—14. frakciót az A oldószerrel; a 15—44 frakciót a B oldószerrel; a 45—117. frakciót a C oldószerrel; és a többi frakciót 50% acetonitrillei gyűjtjük össze. A frakciókat analitikai HPLC-vel elemezzük, a detektálást 210 nm hullámhoszszon hajtjuk végre. Az azonos terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és a vizes maradékot liofilizáljuk. 15 Frakciók Termék Tömeg (mg) 25—27. Tetrahidro-B 23 62—72. Tetrahidrodezoxi-B (1 izomer) 33 78—83. Tetratíidrodezoxi-B (2 izomer) 4,6 97—107. Tetrahidrodezoxi-B (3 izomer) 7,5 Tetrahidro-B-faktor (le képlet) FD/MS: (M+H)+=286 'H NMR (270 MHz, D20): 6 (ppm) 1,58— 1,92 (7H, átlapolt), 2,08 (2H, m), 2,29 (1H, m), 2,49 (3H, t), 3,68 (1H, m), 4,07 (1H, dd), 4,19 (1H, m). . Tetrahidrodezoxi-B-faktor (Id képlet), 1 izomer FD/MS: (M+H)+=?270 'H NMR (270 MHz, D20): 6 (ppm) 1,48— 2,17 (12H, átlapolt), 2,48 (3H, m), 3,55 (1H, m), 4,15 (1H, t). Tetrahidrodezoxi-B-faktor, 2 izomer FD/MS: (M+H)+=270 'H NMR (270 MHz, D20): ő (ppm) 1,4 (2H, m), 1,5—2,1 (9H, átlapolt), 2,25 (1H, m), 2,44 (3H, m), 3,56 (1H, m), 5,10 (1H, s). Tetrahidrodezoxi-B-faktor, 3 izomer FD/MS: (M+H)+=270 ‘H NMR (270 MHz, D20): Ô (ppm) 1,33 (2H, m), 1,5—1,7 (5H, átfedés), 1,80 (2H, m), 1,92 (1H, m), 2,09 (2H, m),2,25 (1H, d),2,43 (2H, t), 3,54 (1H, m), 5,08 (1H, s). 3. példa Dezoxi-A-faktor- és terahidrodezoxi-A-fakter előállítása az A-faktor sósavban történő hidrogénezése útján' 5 mg A-faktort 5 ml In sósavoldatban oldunk és Pt katalizátor (10 mg előredukált Pt20) jelenlétében, 105 Pa hidrogénnyomás alatt hidrogénezzük. 1 mól H2/mól A-faktor abszorbeálodása után a hidrogénezést abbahagyjuk (körülbelül 2 óra). A reakciókeverékből a katalizátort szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet HPLC-vel elemezzük. A redukciós termékkeverék redukálatlan A-faktort, dezoxi-A-faktort és tetrahidrodezoxi-A-faktort tartalmaz. 4. példa 3- Karboxi-oktahidro-5-oxo-8-hidroxi-6- in - dolizinpropánsav-dimetil-észter 500 mg A58365 A-faktor-dimetil-észter 100 ml metanollal készült oldatához 0,5 g 5% Rh/Al203 katalizátort adunk, a szuszpenziót nagynyomású rozsdamentes acél Parr-autoklávba töltjük és 110°C-on 12 óráig 6.895X XlO5 Pa hidrogénnyomás alatt hidrogénezzük. A redukció teljes végbemenése után a katalizátort leszűrjük és a szűrletet bepároljuk. A koncentrátumot 2,54 cm belső átmérőjű és 30,48 cm hosszú fordított fázisú HPLC oszlopon (Zorbax ODS, E.I.Dupont) kromatografáljuk; a mozgó fázis 10% acetonitril/víz rendszer és az átfolyási sebesség 10 ml/min. A kromatográfia lefolyását 210 és 250 nm-nél UV-detektorral követjük. A frakciókat analitikai HPLC alapján egyesítjük (4,6 mm belső átmérőjű, 25 cm hosszú C|8 fordított fázisú oszlop, Zorbax ODS; 12% vizes acetonitrií eluens, átfolyási sebesség 2 ml/min; UV detektálás 210 nm-nél). Az egyesített frakciókat bepárolva 50 ml vizes koncentrátum marad vissza. A koncentrátumot kétszer 100ml butil-acetáttal és egyszer 50 ml butil-acetáttal extraháljuk. A kivonatokat egyesítve és szárazra párolva 102,8 mg 3-karboxi-oktahidro-5-oxo-8-hidroxi-6-indolizinpropánsavat kapunk. A terméket metilén-klorid/dietil-éter elegyből kristályosítjuk. FD/MS: (M+) 299 [“] 589 —18,0° (5 mg/ml, metanol) [«]365 —49,6° (5 mg/ml, metanol) ÍR (KBr): 3362—3365, 3000, 2943, 2925, 2881, 1751, 1733, 1692, 1629, 1594, 1462, 1449, 1441, 1429, 1383, 1357, 1342, 1306, 1286, 1256, 1226, 1202,1173, 1123, 1106, 1093, 1077, 1063, 1043, 1028, 1006, 994, 962, 938, 897, 867, 857, 796, 759, 712 és 673 cm.-'. 'H NMR (370 MHz, D20):ő (ppm) 1,74 (1H, m), 1,83 (1H, szextett), 2,05 (2H, m), 2,11 (1H, m), 2,16 (1H, m), 2,26 (1H, m), 2,40 (1H, m), 2,45 (1H, m), 2,54 (2H, t), 3,71 9 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
