199303. lajstromszámú szabadalom • 99m-Tc-mal jelezhető in vivo diagnosztikus készlet az agy regionális vérátfolyásának mérésére és a vér alakos elemeinek jelzésére és eljárás d,l-4,8-diaza-3,6,6,9-tetrametil-undekán-2,10-dion-bisz-oxim és 99m-Tc-mal jelzett formájának előállítására

7

HU 199 303 A

8

2. táblázat

Inkubációs idő (perc)

Lipoidoldhaló 99m-Tc-d,l-HM-PAO komplex, %

A)

B)

C)

D)

1

91,62

93,91

83,23

33,47

5

94,05

91,77

91,53

53,37

15

94,77

85,19

89,78

74,12

30

94,47

85,30

89,46

91,50

60

93,19

81,22

89,36

90,26

120

92,99

78,79

80,73

88,57

percig 75% acetonitril-tartalmú eleggyel eluáltunk, majd 1,5 percen belül 100%-ra növeltük az acetonitriltartalmat. Ezt az értéket 9,5 percig tartottuk, ezután 1 perc alatt visszatértünk a NaH2P04 puffcrra.

Az eluens átfolyási sebessége 1 ml/perc volt,

A HPLC vizsgálatokat a diagnosztikus készlet 99m-Tc-mal történő jelzését követően 5,35,65,95,125,155 és 185 perccel és 24 órával végeztük el. A 99m-Tc04- retcnciós ideje 2,3 perc, a 99m-Tc-d,l-HM-PAO rctcnciós ideje, 8,4 perc volt.

A 3. táblázat a két csúcs százalékos eloszlásának időbeli változását mutatja be.

3. táblázat

A jelzést követő idő, perc

99m-Tc04-%

99m-Tc-d, 1- HM-PAO,

%

5

1

99

35

1

99

65

1

99

95

2

98

125

4

96

155

6

94

185

8

92

24 óra

54

46

B) Biológiai eloszlás vizsgálata:

A diagnosztikai reagens biológiai eloszlását 110— 120 g testtömegű, CFY/Wistar törzsbeli, vegyes nemű patkányokon vizsgáltuk.

A 24 órája éheztetett, normál hidráit állapotban lévő, nembutállal altatott patkányok vena femoralis-ába injektáltuk a 0,2 ml térfogatú radiofarmakont (14,8-44,4 MBq). Az állatokat 2, 30, illetve 60 perc elteltével dekapitáltuk. Az állatok szerveit kiemeltük, és 100 'C-os vízfürdőn 20 tömeg %-os vizes kálium-hidroxid oldatban hidrolizáltuk. A szcrvhidrolizátumok aliquotjainak aktivitását üreges mérőhelyen meghatároztuk, és a méréssel meghatározott szervaktivitásokat az injektált aktivitás százalékában fejeztük ki.

A mérési eredményeket a 4. táblázatban közöljük,

c) Leukociták jelzése:

30 ml nátrium-citrát oldat és dextrán keverékével antikoagulált vérből ülcpítéssel kapott lcukocita szuszpenziót 3,0 ml foszfátpuffert tartalmazó sóoldattal kétszer mostunk. Ezután 0,25 ml, a 2. példa A) pontjában ismertetett diagnosztikus készletből előállított 99m-Tc-d,l-HM-PAO reagensoldatot adtunk a leukocita-szuszpenzióhoz keverés közben, és vizsgáltuk a lcukocitákhoz kötött radioaktivitás mennyiségét az idő függvényében. A következő eredményeket kaptuk (szobahőmérsékleten végzett inkubálás esetén):

2 perc:

62%

5 perc:

81%

15 10 perc:

90%

4. táblázat

99m-Tc-d,l-HM-PAO megoszlásának vizsgálata az intravénás injektálást követően

Szerv

2 perc ±SD

30 perc ±SD

60 perc ±SD

Vér

9,69

9,11

8,55

(3,46)

(3,15)

(4,16)

Agy

2,18

1,79

■ 1,92

(0,23)

(0,51)

(0,36)

Izom

17,17

14,96

11,08

(3,62)

(4,81)

(1,28)

Szív

0,74

0,46

0,40

(0,15)

(0,08)

(0,12)

Tüdő

2,27

2,12

1,90

(0,06)

(0,25)

(0,63)

Máj

16,22

14,31

11,80

(4,81)

(2,33)

(1.41)

Vesék

2,66

3,13

3,60

(1,16)

(0,16)

(0.31)

Lép

0,49

0,45

0,39

(0,35)

(0,21)

(0,09)

Gyomor

1,23

1,87

1,49

(0,61)

(0,64)

(0,72)

Bél

5,07

1,48

2,90

(2,06)

(1.41)

(3,46)

SZABADALMI IGÉNYPONTOK 50

1.99m-Tc-mal jelezhető, d,l-4,8-diaza-3,6,6,9-tetrametil-undekán-2,10-dion-bisz-oximot és ón(II)-sót tartalmazó, in vivo diagnosztikus készlet az agy regionális vérátfolyásának mérésére és a vér alakos elemeinek 55 jelzésére, azzal jellemezve, hogy 1 tömegrész d,l-4,8- -diaza-2,6,6,9-tetrametil-undckán-2,10-dion-bisz-oximra vonatkoztatva 0,002-0,01 tömegrész ón(II)nek megfelelő mennyiségű őn(II)-sót, és 1 tömegrész d,l-4,8-diaza-3,6,6,9-tetrametil-undekán-2,102-dion- 60 -bisz-oximra vonatkoztatva 5-150 tömegrész alkálifém- vagy ammónium-pirofoszfátot tartalmaz.

2. Az 1. igénypont szerinti diagnosztikus készlet, azzal jellemezve, hogy alkálifém-pirofoszfátként nátrium-pirofoszfát-dekahidrátot tartalmaz.

65 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti diagnosztikus

5