199300. lajstromszámú szabadalom • Eljárás orrnyálkahártyán át (nazálisan) adagolható gyógyászati készítmény előállítására
11 HU 199300 ß 12 vákuumban 15 °C-ra melegedni hagyjuk» majd polietilénzsákba csomagolva lezárjuk. Ezt a műveletet steril körülmények között végezzük. Az így kapott inszerlum kemény. Elektronmikroszkóppal megfigyelhető, hogy számos Hzuhúl.v luliut (Hírűid, (nrhdiuitz, ninetyek átmérője körülbelül 5 mikronló! körülbelül 100 mikronig terjed. 2. példa Nazális inszertum előállítása (hidroxi-propii)-metil-cellulózból 1,5 g 0,074 mm-nél kisebb szemcseméretű laktózt 30 g tiszta vízben oldunk, az oldatot 73 °C-ra melegítjük, és 1 g (hidroxi-propil)-metil-cellulózt adunk hozzá, majd az oldatot »zobahőmérsékletre hütjük. A pH értékét J,1 n sósav hozzáadásával 3,7-re állítjuk. 0.02346 g kalcitonint 15 g tiszta vízben oldunk, és az oldat pH-értékét 0,1 n sósavval 3,7-re állítjuk. Az oldatot összekeverjük, és az igy kapott oldat térfogatát vízzel 50 ml-re egészítjük ki. Az oldatot 0,2 mikronos pórusátmérőjü szűrön át szűrjük, majd 0,1 ml térfogatú részletekben egy alumíniumlemez 5 mm méretű bemélyedéseibe pipettázzuk. A lemezt -48 °C-ra hűtjük, és ugyanezen a hőmérsékleten 2 órán át liofilizáljuk. Ezután a liofilizálást 16 órán át folytatjuk, miközben a hőmérsékletet -48 °C-ról +23 °C-ra növeljük. Az igy kapott liofilizátum-tömböket gondosan eltávolítjuk a helyükről, és mindegyiket 1 ml térfogatú olyan fecskendőkbe helyezzük, amelyek dugattyúval vannak ellátva, és amelyeknek a tűs végét a végétől számítva körülbelül 3 mm-re levágtuk. Minden egyes tömb tömege 4,95 mg, és körülbelül 200 MRC, azaz 0,04698 mg kalcitonint, 3 mg laktózt és 2 mg (hidroxi-propil )-metil-cellulózt tartalmaz. Az igy kapott inszertum lágy, vízben könnyen oldható, egységes liofilizátum, amelynek átmérője körülbelül 5 mm, hosszúsága körülbelül 6-7 mm. Elektronmikroszkóppal megfigyelhető, hogy réteges lemezrendszerből áll, és párhuzamosan elhelyezkedő póruscsatornákat tartalmaz, amelyek átmérője körülbelül 5-10 mikron. A liofilizátum éle mintegy 50 mikron kiterjedésű, finom, habszerű, porózus szerkezetű réteg. 3. példa A biológiai hasznosíthatóság összehasonlítása; lazac-kalcitonin alkalmazása nazális inszertumban, illetve lazac-kalcitonin alkalmazása orrpermetben (nazális permetben) .A' vizsgálat: E vizsgálatot 6 darab, egyenként 7,5- -10 kg testsúlyú rhesus-majomból álló csoportokon végezzük. A vizsgálati állatoknak a következőket ml juk: 1) Két nazális inszertumot (orrüregenként egyet), amelyeket az 1. példa szerint állítottunk elő. Erre a célra az első változatú nedves szivacsot alkalmazzuk, amely 50 MRC (NE) lazac-kalcitonint hordoz, s igy a teljes adag 100 MRC (NE); vagy 2) az 1. példa szerint készült folyékony készítményt, azaz az első változatú nedves szivacsot, amely 500 MRC (NE) lazac-kalcitonint tartalmaz, s amelyet orrpermet alakjában olyan orrpermet-eszközböl adagolunk, amely lenyomáskor 100 ul pennetet bocsát ki, és minden állal esetében két lenyomást < végzünk (orrüregenként egyet), s igy a teljes ' ‘adag ugyancsak 100 MRC (NE); '• vagy ' - * *'■ 3) két placebo nazális inszertuinöd (orrüregenkénl egyet, ámelyet az 1. példa szerint, de lazac-kalcitonin nélkül állítunk elő. A kísérlet indulásakor (0 időpontban), majd a fenti műveletet követően 0,8, 0,16, 0,25, 1, 1,5, 2, 3,' -Y és "6 órával 2VlT ml térfogatú vérmintát veszünk litium-heperinátra, a plazmát megfagyasztjuk, és később h lazac-kalcitonint standard RIA (rádióimmun-meghatározó) inérőkészlet segítségével meghatározzuk. Ha a fenti 1) szerint, illetve 2) szerint kezelt állatokat a 3) szerint piacéból kapott állatokkal összehasonlítjuk, akkor a következőket állapíthatjuk meg:- Az AUC-érték la görbe alatti terület) és a viszonylagos biológiai hasznosíthatóság az 1) csoportban nagyobb, mint a 2) csoportban: AUC=0,533 mNE.ml-h.- A viszonylagos biológiai hasznosíthatóság az 1) csoportban [a 2) csoporttal szemben 1=276,30% (+176,30%).- Az 1) csoportban a lazac-kalcitonin plazmakoncentrációja nagyobb, mint a 2) csoportban: a Cp max=0.352 mNE a 0,055 mNE/ml értékkel szemben tMx=0,08 óra után. .B* vizsgálat: E vizsgálatot 6 darab, egyenként körülbelül 690 g testsúlyú új-zélandi nyúlból álló csoportokon végezzük. Kicsi, 5 mm x 5 mm x5 mm méretű Sporigostan-inszertumokat állítunk elő az 1. példához hasonló módon, az első változatú nedves szivacsot alkalmazzuk 9 inikroliler olyan oldattal, amely 550 NE lazac-kalcitonint tartalmaz. Az inszertumot egy 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 65 60 65 8
