199168. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új makrolid-antibiotikum és az új antibiotikumot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
9 199168 10 Swalpamicin tehál Gram-pozitív baktériumok eritromicinnel szemben rezisztens törzsek és mikoplazmák ellen hatásos, ezért a fenti mikroorganizmusok által okozott megbetegedésekben gyógyszerként alkalmazható. A találmány tehát swalpamicint tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására is vonatkozik. Az (I) képletű új antibiotikumot egyéb hatóanyagokkal, például penicillinekkel, cefalosporinekkel vagy aminoglikozidekkel kombináltan is alkalmazhatjuk: Az (1) képletű vegyület és savaddíciós sói orálisan, intramuszkulárisan vagy intravénásán applikálhatok. A hatóanyagként swalpamicint tartalmazó gyógyszerkészítményeket úgy állítjuk elő, hogy a hatóanyagot egy vagy több fizióligiailag elviselhető hordozóanyaggal vagy hígítószerrel, így töltőanyagokkal, emulgeátorokkal, csúsztató anyagokkal, izes színezőanyagokkal vagy pufferrel összekeverjük és gyógyszerkészítménnyé, például tablettává, drazsévá, kapszulákká vagy parenterálisan alkalmazható szuszpenzióvá vagy oldattá alakítjuk. Hordozó- vagy hígító anyagként az alábbiakat soroljuk fel példaképpen-, tragant, tejcukor, talkum, agar, poliglikol, etanol vagy víz. Parenterális alkalmazás esetében az oldatokat vagy szuszpenziókat előnyösen vízzel készítjük. A hatóanyagot töltőanyag nélkül is, például kapszulába töltve lehet adagolni. A szokásos dózis 0,4—20 g/nap, előnyösen 0,5—4 g/nap, mintegy 60 kg testtömegű felnőttet véve alapul. Egyszeri vagy általában többszöri dózisokkal adagolhatjuk a hatóanyagot, az egyszeri dózis mintegy 50—1000 mg, előnyösen 100—500 mg menynyiségben tartalmazza. A találmányt az alábbi példákkal közelebbről ismertetjük. 1 1. példa Streptomyces sp. Y-84,30967 izolálása a talajból a) Az izoláláshoz használt táptalajok előállítása 1. közeg: glükóz 1.0 g glicerin 1,0 g L-arginin 0,3 g k2hpo4 0,3 g MgS04.7H20 0,2 g NaCI 0,3 g élesztőkivonat 2,0 g Fe(S04)3 10 mg CuS04.5H20 1 mg ZnS04.7H20 1 mg MnS04.7H20 1 mg agar 15,0 g desztillált víz 1 liter PH 6,5 2. közeg: glükóz 2,0 g L-aszparagin 1,0 g k2hpo4 0,5 g 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 MgS04.7H20 0,5 g talajkivonat 200 ml agar 15,0 g desztillált víz 800 ml pH 8,0 (A talajkivonat kertiföld vizes extrahálásával, majd szűréssel előállított mikroelemoldat.) 3. közeg: keményítő kazein kno3 NaCI k2hpo4 MgS04.7H20 CaC03 FeS04 agar desztillált víz PH A közegeket 121°C-on zük. 10.0 g 0,3 g 2.0 g 2.0 g 0,05 g 0,02 g 0,01 g 0,01 g 15.0 g l liter 7,1—7,5 30 percen át sterilezb) A talajszuszpenzió előállítása 1 g talajt erős rázás közben desztillált vízben szuszpendálunk. A szuszpenziót hagyjuk leülepedni, és a felülúszó részt a fenti összetételű táptalajok oltására használjuk. c) Az izoláláshoz használt táptalaj beoltása A Petri-csészékben lévő 50—50 ml tápközeget a talajszuszpenzió 1 — 1 ml-jével oltjuk. d) Streptomyces sp. Y-84,30967 izolálása A Petri-csészéket 30°C-on két héten át inkubáljuk, és a növekvő mikroorganizmusok közül a Streptomyces sp. Y-84,30967 törzset izoláljuk. 2. példa Streptomyces sp. Y-84,30967 tenyésztése swalpamicin fermentációs előállítása céljából. A törzset az alábbi összetételű élesztő-maláta-agaron tartjuk: malátakivonat 10,0 g élesztőkivonat 4,0 g glükóz 4,0 g agar 15,0 g desztillált víz 1 liter pH 7,0 A közegeket kémcsövekbe töltjük és 121 °C- on 30 percen át sterilezzük. A kémcsöveket ferde helyzetben hagyjuk kihűlni, hogy íerdeagar képződjön. A beoltott kémcsöveket 28°C-on 10—15 napon keresztül inkubáljuk. Az idő elteltével dús növekedés és spóraképződés figyelhető meg. Egy-egy ferdeaga rról lemosott spóraszuszpenziót 5 db 500 ml térfogatú, 100 ml oltótenyészet-közeget tartalmazó Erlenmeyer lombik, vagy 1 db 5 liter közeget tartalmazó palack beoltására használunk fel. Az oltótenyészet-közeg összetétele glükóz 15,0 g szójaliszt 15,0 g
