198953. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enkefalináz gátló hatású glikopeptidek, aminosav származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198953 B 2 A találmány új, (1) általános képletfl, enkefalinázgátló hatású glikopeptidek előállítására vonatkozik. A találmány tárgyához továbbá az ezeket a glikopeptideket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására is tartozik. A vegyületeket az alábbiakban enkasztinoknak is nevezzük. Az enkasztinok olyan vegyületek, amelyekben egy monoszacharid egy amin-nitrogén atomon keresztül egy aminosawal vagy egy dipeptiddel kapcsolódik. Hasonló, L-aminosavakat tartalmazó vegyületeket ír le K. Heyns és H. Paulsen (Liebigs Ann. Chem. 622 (1959) 160—174) és H. Röper, S. Röper és K. Heyns (Carbohydrate Research 116 (1983) 183— 195). B. N. Stepanenko és N.N. Borodina, Prikl. Biokhim. Mikrobio. 12 (1) (1976) 5-13 /C.A. 85: 143*25 h/ irodalmi helyről ismertek a következő vegyületek: N-(l-dezoxi-j0-D-fruktopiranóz-l-il)-Gly-Gly-OH és N-(l-dezoxi-/?-D-fruktopiranóz-l-il)-Gly-Ser-OH. Analget ikusan hatásos enkefalináz inhibitorokként már különböző vegyületosztályokat megneveztek. Ezekre jellemző, hogy egy lipofil aminosawal szomszédos helyzetben funkcionális csoportjuk van, amely ennek a metallo enzimnek a katalízisben résztvevő Zn2+ ionjával koordinációs vegyületté alakulhat. Ilyen funkciós csoportok például: -SH, HO-NH-CO-, -P( = 0)0H-R és -COOH (R.E. Chipkin, Drugs of the Future 11 (7) (1986), 593-606). Ismert továbbá, hogy ezek a vegyületek nemcsak az enkefalinázt gátolják, hanem a baktériumokból izolálható termolizin enzimet is (M. Pozsgay, C. Michaud, M. Liebmann és M. Orlowski, Biochemistry 25 (1986) 1292-1299). A találmány feladata olyan vegyületeknek az előállítása, amelyek specifikusan enkefalináz gátló hatásúak. Ezt a feladatot úgy oldottuk meg, hogy előállítottuk az (I) általános képletű vegyületeket — a képletben Sacch jelentése N-(l-dezoxifruktopiranóz-l-il)-, N-(l-dezoxitagatopiranóz-l-il)-, N-(l,6- -didezoxifruktofuranóz- 1-il)-, N-(hidroxi-aceton-3-il)- vagy N-(l-dezoxixilulóz-l-il)-csoport, A jelentése L- vágy D-formájú Alá, Val, Ile, Phe, Leu vagy hexahidrofenilglicinil (Hhp), azzal a megszorítással, hogy amennyiben B jelentése kémiai kötés, ezek az aminosav-maradékok mindig D-formában vannak jelen, B jelentése kémiai kötés vagy L- vagy D-formájú Asn, Asp, Asp-mono-(C1-Có)-alkilészter, Glu, Ser vagy Trp és R jelentése hidroxilcsoport. A találmány leírásában az aminosavakra az L. Styrer, "Biochemistry" (W. H. Freeman & Company, San Francisco, 1972 14. oldal) irodalmi helyen megnevezett szimbólumokat alkalmazzuk. Ezen szimbólumok elé a D jelzést teszizük, ha egy D-aminosav maradékról van szó. A konfiguráció-szimbólum nélküli csoportok L- konfígurációt jelentenek. A fenti vegyületek közül különösen kiemeljük a következő glikopeptideket: Enkastin ID, Enkastln (D)ID (1) képletű vegyület N-(ldezoxi-fruktopiranóz-l-il)-Ile-Asp-OH N-(l-dezoxi-fruktopiranóz-l-il)-D-Ile-Asp-OH Enkastin.VD, Enkastin (D)VD (2) képletű vegyület N-(l-dezoxi-fruktopiranóz-l-il)-Val-Asp-OH N-(l-dezoxi-fruktopiranóz-l-il)-D-Val-Asp-OH Enkastin AD (3) képletű vegyület N-(l-Dezoxi-fruktopiranóz-l-il)-Ala-Asp-OH Enkastin IE (4) képletű vegyület N-(l-Dezoxi-fruktopiranóz-l-il)-Ile-Glu-OH Enkastln VE (5) képletű vegyület N-(l-Dezoxi-fruktopiranóz-l-il)-Val-Glu-OH Enkastin AE (6) képletű vegyület N-(l-Dezoxi-Fruktopiranóz-l-il)-Ala-Glu-OH Enkastin (D)V (7) képletű vegyület N-(l-Dezoxi-fruktopiranóz-l-il)-D-Val-OH A vegyületeket a találmány szerint úgy állítjuk elő, hogy a) azon (I) általános képletű vegyületek előállítására, amelyekben Sacch jelentése N-(l-dezoxifruktopiranóz-l-il)-csoport, A jelentése Alá, Val, Ile, B jelentése Asp vagy Glu és R jelentése hidroxilcsoport, a Streptomyces albus ATCC 21838. deponálási számú mikroorganizmust vagy ennek variánsát vagy mutánsát tápközegben tenyésztjük, majd a kapott vegyületeket elkülönítjük és kívánt esetben tisztítjuk, vagy b) egy N-terminálisan szabad aminosavat tartalmazó A-R jelentésű aminosavat vagy A-B-R jelentésű dipeptidet az anomer centrumban szabad hidroxilcsoportot tartalmazó Sacch jelentésű monoszacharidnak megfelelő aldózzal kondenzálunk, és az így kapott N-glikozidot Amadori-átrendezésnek alávetve N-szubsztituált izocukoraminná alakítjuk. A Streptomyces albus ATCC 31838. ismert mikroorganizmus, amelyet főleg a salinomicin antibiotikum termelésére alkalmaznak. A Streptomices albus tulajdonságai Berge/s Manual of Determinative Bacteriology (Williams and Wilkins, Baltimore) c. könyv 754. oldalán találhatók, eddig nem volt ismert, hogy ugyanez a törzs kisebb koncentrációban enkasztinokat is termel. Szénforrást, nitrogénforrást, valamint a szokásos szervetlen sókat tartalmazó tápoldatban a Streptomyces albus (ATCC 21838) többek között az Enkasatin ID-t, Enkasztin VD-t, Enkasztin AD-t, Enkasztin IE-t, Enkasztin VE-t valamint Enkasztin AE-t termeli. Az ATCC 21838. törzs helyett természetesen ezek mutánsait és variánsait is alkalmazhatjuk, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 63 2
