198931. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-[(piperidin-4-il)-metil]-1,2,3,4-tetrahidro-9H-pirido-[3,4-b]-indol származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198931 B 2 Táblázat (I) általános képlet Szám R Só vagy bázis Op. (-C) 1 H dihidroklorid 290 - 292 2 coc6H5 bázis 161,5-163,5 3 coch2c6h6 benzolszulfonát 197-199 4 cooc2h5 bázis 117,5-120 5 CONHnC3H7 bázis 207-209,5 6 CONHC6H5 bázis 207-209 7 so2c6h5 bázis 142-145 8 COC6H4-3-Cl bázis 199 - 201 9 COCóH4-3-CH3 bázis 206-208 10 COC6H4-3-OC2H5 bázis 206-208 11 COC6H4-3-F hidroklorid 228-230 12 COC6H4-2-CH3 hidroklorid 231-233 13 COC6H4-4-CH3 bázis 204-206 14 COC6H3-3,5-(CF3)2 hidroklorid 266-268 15 C0C6H3-3,5-(CH30)2 hidroklorid 165-170 16 CONHnC4H9 bázis 215-218 17 coch3 bázis 137-139 18 cooíc3h7 benzolszulfonát 215-217 19 COnC3H7 bázis 164-166 20 cooch3 benzolszulfonát 210-212 21 cooch2c6h5 benzolszulfonát 209-211 A kísérletekhez 160 — 200 g hím Sprague-Dawley patkányokat használtunk. Fejlevágás után kiemeljük az agyat és kivágjuk belőle a hippocampus!. A szövetet Ultra-Turrax Polytron készülékben 30 másodpercig, a maximális sebesség felével homogenizáljuk sósavoldattal 7,4 pH- ra beállított 10 térfogat 50 mM Trisz-pufferben (100 mg friss szövet per ml). A homogenizált szövetet 4 °C-on háromszor mossuk, közben minden alkalommal 48000 g-vel 10 percig centrifugálunk és az üledéket friss hideg pufferben szuszpendáljuk. Végül az utolsó üledékhez annyi puffert adunk, hogy 1 ml 50 mM puffer 100 mg kiindulási szövetet tartalmazzon. Ezután 37 °C- on 10 percig inkubáljuk a szuszpenziót. A [3H]-8-OH-DPAT-hoz való kötődés meghatározása céljából 10 /íM pargillint tartalmazó 1 ml végtérfogatú pufferben inkubálunk. Az tnkubálás után a membránokat Whatman GF/B szűrőkön gyűjtjük össze. A szűrőket 5 ml jéghideg pufferrel háromszor átmossuk. A szűrőket szcintillációs folyadékba helyezve radioaktivitásukat folyadékszcintillációs spektrométerben határozzuk meg. A (3H]-8-OH-DPAT specifikus kötődését a szűrőkön visszamaradt radioaktivitásként definiáljuk, amely gátolható 10 5-hidroxi-triptaminnal való együttes inkubálás útján. 1 nM [3Hj-8-OH-DPAT koncentrációnál a fajlagos kötődés a szűrőn kimutatott össz radioaktivitás 70 — 80%-át teszi ki. A vizsgált vcgyületek minden koncentrációjánál meghatározzuk a (3H]-8-OH-DPAT-hoz való kötődés gátlásának százalékát, majd a kötődést 50%-kal gátló kocentrációt, azaz az IC50 értéket. A találmány szerinti vegyületek IC50 értéke 30 0,001 és 0,2 (jM közé esik. A találmány szerinti vegyületek centrális hatását macskán, a reszerpinnel indukált "PGO-csúcsok"-ra (ponto-geniculo-okcipitális csúcsok) kifejtett hatás alapján (PGO-R teszt) értékeljük 35 Deporteere H. módszerével (Sleep 1976, 3 Europ. Congr. Sleep Res., Montpellier 1976, 358-361. oldal/Karger, Bázel 1977/). A vizsgálandó vegyületek kumulatív dózisait mesterségesen lélegeztetett kurarizált macskák- 40 nak (0,01 — 3 mg per kb, iv.) 30 perces időközökben adagoljuk be, 4 óra múlva 0,75 mg per kg részé rpin ip. injekciója után. Az elektroenkefalográfiás és fázisos aktivitásokat (PGO-R csúcsok) kérgi és mély elektródok segítségével (oldalsó 45 genículum) határozzuk meg. A vizsgált vegyület minden dózisára meghatározzuk a PGO-csúcsok számának százalékos csökkenését, majd az AD50 érteket, azaz a csúcsok számát 50%-kal csökkentő hatásos dózist. A találmány szerinti vegyüle- 50 tek ED50 értéke 0,01 és 1 mg per kg közé esik iv. adás esetén. A próba eredményei azt mutatják, hogy az (1) általános képletű vegyületek in vitro erős és sze- 55 lektív affinitást mutatnak az 5-HTlA típusú szerotoninerg receptorok iránt. In vivo agonista, részlegesen agonista vagy antagonista aktivitást mutatnak e receptorokkal szemben. így a találmány szerinti vegyületek az 5-HTA1 60 típusú szerotoninerg receptorokat közvetve vagy közvetlenül befolyásoló betegségek kezelésére, nevezetesen depressziós, szorongásos állapotok, alvászavarok kezelésére, táplálékfelvétel szabályozására, valamint ér- vagy szív-érrendszeri be- 65 tegségek, mint migrén és magas vérnyomás keze-5
