198903. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-amino-butil-N-fenil-arilamid származékok és az ezeket a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
17 HU 198903 R 18 A találmány szerinti vegyületekkel különböző farmakológiai vizsgálatokat végeztünk, amelyek szerint ezek a vegyületek értékes terápiás hatással rendelkeznek. A vegyület kalcium-antagonista hatását házinyúl izolált aortáján tanulmányoztuk. Godfraind és Kaba [Blockade or recersal of the contraction induced by calcium and adrenaline in depolarized arterial smooth muscle, Br. J. Pharmac., (1969) 36, 549-560] irodalmi helyen ismertetett módszerének egyik változatát alkalmaztuk a kísérleteink során. A kísérleteket házinyúl mellkasi aortájának egy szakaszával végeztük. Az állatokat (rőt burgundi, Fauves Bourgognes) amelyek átlagtömege 1,5 kg, a nyakszirt diszlokációjával és kivéreztetéssel pusztítottuk el. A mellkasi aortát hirtelen kiemeltük és nátrium-hidrogén-karbonátot és oxigént (95% 02 + 5% COz) tartalmazó Krebs-oldatba helyeztük. Az aortaszakaszt körülbelül 1 cm-es darabokra vágtuk és 20 ml-es edényekbe helyeztük, amelyben a nátrium-hidrogén-karbonátot és oxigént tartalmazó Krebs-oldat volt, amelynek pH értéke 7,4 és hőmérséklete 37 °C. Két U alakú fémkampót - amelynek hosszúsága az aortaszakasszal azonos - vezettünk be ezek nyílásaiba. Az egyik kampót az edény széléhez, a másik kampót pedig az előerősítőt lartalamzó (Grass 7P1), az izometriás kontrakció mérésére alkalmas mérőműszerhez (Grass FT03) rögzítettük, amelynek segítségével lehetővé vált az aortaszakaszok kontrakcióé válaszainak a regisztrálása oszcillográfon (Grass 79B). Ez a módszer - öszszehasonlitva a spirál- vagy a gyűrűs preparátumokkal - előnyösebb, mivel ennek segítségével ezek szerkezete sértetlen marad és a kontrakciós válaszoknak csak a radiális összetevőjét regisztrálja, amely funkcionális szempontból érdekes, (az artériás vérnyomás szabályozása). A kezdetben 4 g feszítőerő volt a preparátumokon. Fenoxibenzamint (1 /amól) propranololt (1 /úrnői) adtuk a különböző Krebs-oldatokhoz, azért, hogy a vaszkuláris c£- és 0-adrenerg receptorok aktiválásához kapcsolódó kontrakciós válaszokat elnyomja. Krebs-oldatban való egy órás stabilizálás után az aortákra gyakorolt feszítőerő 2 g-ra csökkent és 30 percnyi várakozás után a preparátumokat 10 percig kalcium nélküli nátrium-hidrogén-karbonátot tartalmazó Krebs-oldatban, EDTA (200 /umól) és propranolol (1 /úrnői) jelenlétében inkubáltuk. Ezt követően az oldatot kalcium nélküli, nololt (1 /uniói) tartalmazó, depolarizáló (káliumban gazdag) Krebs-oldattal helyettesítettük. 5 perc múlva 1 mmólos koncentrációjú kalcium-oldatot udtunk ehhez az oldathoz és 30 percig stabilizáltuk, amely idő alatt a preparátum elérte a stabil kontrakciókat. Ezt követően a vizsgálandó vegyület kumulativ dózisait adagoltuk 30 percenként, (amely időtartam általában szükséges a szint 11 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
