198735. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ellipticin-glikozidok előállítására

1

HU 198735 B

2

kristályokat háromszor mossuk etil-alkohollal, majd szárítjuk. 26,54 g kívánt vegyületet kapunk, 869? -os kitermeléssel. Az átkristályosításból visszamaradó anyalúg sűrítése és hűtése után további 1,23 g (4,’í ) kívánt vegyületet nyerhetünk ki.

A kapott vegyület optikai tisztaságát nagyteljesítményű folyadék-kromatográfiával határozzuk meg (LC) a következő körülmények közölt: Kolonna: Shim-pack CLC-DDS 15 cm x 6 mm átmérő,

Mozgó fázis: acetonitril (0,02 M NAH2PO4 x H3Pí)4 puffer = 1:5,

Áramlási sebesség: 1,0 ml/perc, vagy Mozgó fázis: acetonitril (0,02 M NaH2PÜ4 x H3PO4 puffer = 1:4,

Áramlási sebesség: 1,5 ml/perc A kapott vegyület fizikokémiai tulajdonságai a következők:

Olvadáspont: > 250 “C (bomlik),

(alfa)l8D °C: -230° (C = 0,20, H20),

IR spektrum (KBr, cm' *): 3250, 1640, 1600, 1400, 1420, 1220, 1200, 1150, 1090, 1060, 810,

UV spektrum (lambdaetanolmax, nm): 227 (É14000), 249 (.23000), 267 (.25000), 282 (.22000), 324 (. 52000),

Tömegspektrum (SIMS, m/z), 395

(C22H23N2C)5) + .

NMR spektrum (DMSO-d6, íppm)

2.85 (3H, s) 3.65 (1H, m) 3.90 (3H), m)

4.08 (1H d) 5.12 (1H, d) 5.24 (1H, d)

5.61 (lH,d) 5,74 (lH.d, J = 8.5 Hz,

1-H) 7.18 (1H. dd, J = 2.9 Hz) 7.55 (1H, d, J = 9 Hz) 7.86 (1H, d, J = 2 Hz) 8.51 (2H, ABq) 9.45 (1H, brs) 10.03 (1H, s)

12.08 (lHbrs)

'Belső standardként a CD2HSOCD3 proton kémiai eltolódását (.■> 2,50) használjuk.

Elemanalízis a U22H23N205Br x 2H20 összegképlet alapján:

számolt: C51,67%,H5,32%N5,48%, talált: C51,57". H5,31% N5,40%.

2. referencia példa

2,3,4-tri-O-Acetil-béta-L-arabino-piranozilbromid előállítása (/VI/ képlet)

50 g (0,33 mól) L-arabinózl 250 ml piridinben szuszpendálunk, 200 ml (217 g, 2,13 mól) ecetsav-anhidridel adunk hozzá, majd az elegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Á reakcióelegyhez 50 ml metil-alkoholt adunk jeges hűtés közben, és az oldószert vákuumban le- 5 desztilláljuk. Az oldószer és a reagensek feleslegét etil-alkohollal és vízzel végzett azeotróp desztillációval távolítjuk el. Az így kapott maradékot 100 ml ecetsavban oldjuk, majd jeges hűtés mellett 100 ml 30%-os ecetsavas hidrogén-bromid oldatot adunk hozzá, és 3 órán át kevertetjük. A kapott reakcióelegyet 800 ml metilén-kloriddal hígítjuk és vízzel mossuk. A vizes fázist 200 ml metilén-kloriddal újra extraháljuk. Az egyesített szerves fázist hűtött vízzel mossuk és magnézium-szulfáton szárítjuk. Besűrítés után a maradékot éterből kristályosítjuk, majd hűtött éterrel mossuk.

59,6 g kívánt vegyületet nyerünk, ami 53%-os kitermelésnek felel meg.

20

Hatásvizsgálat

Az ellipticin-származékok daganatellenes hatását vizsgáltuk egér kísérleti L-1210 tumor segítségével.

25 (1) Alkalmazott állatok:

BDF! 6 hetes, nőstény egerek, átlagos testtömegük 17— 18 g, csoportonként 6 egér.

(II) Alkalmazott tumor:

L1210 (egér limfoid leukémia sejtek) 1G5 30 sejt/egér, intraparetoneális injekció (ip).

(III) A minta adagolásának módja:

L 1210-t fecskendezünk intraperitoneálisan az egerekbe, majd a vizsgálandó mintát 5 napon keresztül naponta egyszer adagoljuk. Az első 35 jdagot 24 órával az L 1210 sejtek beadagolása uán adjuk.

(IV) A hatást az alábbi módon vizsgáljuk:

A minta hatásosságát úgy fejezzük ki, hogy a ezelt csoport átlagos túlélési napjait a kontroll- 40 >oporttal összehasonlítva megállapítjuk a megövekedett életszakaszt (ILS%).

kezelt csoport átlagos túlélési ideje napokban

ILS% = /---------------------------------1/ x 100

45 kontroll csoport átlagos túlélési ideje napokban

Az eredményeket az I. táblázat mutatja.

50

1. táblázat

A farmakológiai vizsgálat eredménye (L 1210)

Vegyület

Dózis

mg/kg

Toxicitás

ILS%

80 napos túlélés

2-alfa-L-arabino-pira-5

0/6

76.4

0/6

nozil-9-hidroxi-ellip-10

0/6

115,3

0/6

ticinium-bromid

30

0/6 v

>839,4

5/6

2-alfa-D-arabino-pira-2,5

0/6

77,3

0/6

nozil-9-hidroxi-ellip-5

0/6

93,2

0/6

ticinium-bromid

10

0/6

>381,8

2/6

20

0/6

>605,7

3/6

4