198722. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-(benzopiráno- és tiopiráno-pirazolil)-3-oxo-propionitrilek és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198722 B 2 (II) általános képletű vegyületet (X) általános képletű vagyülettcl - ahol R7 Ci-C4-alkilcsoportot jelent — rcagáliatva, a (II) és (III) általános képletű vegyületek reakciójára leírt kísérleti körülmények között. A (VIII) általános képletű vegyüieteket például úgy állítjuk elő, hogy a (XI) általános képletű vegyületet - ahol X, R2, R3 és R4 jelentése megadott — egy (XII) általános képletű vegyülettel reagáltatjuk, ahol Rg és Rg azonos vagy különböző és jelentésük Ci-C4-alkil-, előnyösen metil- vagy etilcsoport. A (XI) általános képletű vegyületet a (XII) általános képletű vegyülettel például erős bázis, mint nátrium-metoxid, nátrium-etoxid, nátriumhidrid, kálium-terc-butoxid. jelenlétében reagáltatjuk, szerves oldószerben, mint CrC4-alkanolban, benzolban, dioxánban, dimetil-formamidban, mintegy 0 °C és 100 °C közötti hőmérsékleten. A (XI) általános képletű vegyületek jól ismert szintézisek útján állíthatók elő, például a JAM.Chem.Soc. 76, 5065 (1954) és az "Advances in Heterocyclic Chemistry" 18, 59 (1975) közleményekben leírt eljárások segítségével. Az (V), (Va), (VII), (IX), (X) és (XII) általános képletű vegyületek ismert termékek és szokványos módszerekkel állíthatók elő, egyes esetekben pedig kereskedelmi forgalomban levő termékek. Ha a találmány szerinti vegyületekben és közbenső termékeikben olyan csoportok - például amino- vagy hidroxilcsoport - fordulnak elő, amelyeket a fenti reakciók végrehajtása előtt meg kell védeni, úgy e csoportokat megvédj ük, majd a reakciók elvégzése után a védőcsoportokat a szerves kémiában ismert eljárások segítségévéi eltávolítjuk. Az (I) általános képletű vegyületek immunmoduláló hatással rendelkeznek és emlősöknél magukban vagy antibiotikumokkal együtt különösen immunstimulátorokként használhatók, például heveny és idült baktériumos vagy vírus eredetű fertőzések esetében, valamint magukban vagy daganatgátló szerekkel együtt daganatos betegségek kezelésre alkalmazhatók. A találmány szerinti vegyületek immunmoduláló aktivitását például az a tény igazolja, hogy hatásosan potencírozzák a markofágok daganatsejtekkel szembeni citotoxikus hatását in vitro körülmények között. Ezt az aktivitást a következő kísérleti eljárással mutatjuk ki: 4 egérből álló csoportokat a vizsgálandó vegyületekkel ip. úton kezelünk, majd 7 nap múlva a hasűri sejteket összegyűjtjük és 2 órán át 37 °C-on szélesztjük. Ezután az edények falát lemossuk a le nem tapadt sejtek eltávolítása céljából, majd hozzáadjuk a tumoros célsejteket és az inkubáiást 48 óráig folytatjuk. Ezután kolorimetriás módszerrel 570 nm-nél meghatározzuk az életképes célsejtek mennyiségét. Immunmoduláló hatásuk alapján a találmány szerinti vegyületek egérfertőzési modellnél is aktívak. A találmány szerinti 2.ciano-3-(l,4-dihidro-l-fenil-[l)-benzotiopirano[4,3-c]pirazol-3-il)-3-oxo-N-fenil-propionamid (belső kód FCE 24578) vegyületet például Cleeland R. és Grunberg E. leírása szerint ("Antibiotics in Laboratory Medicine", Lorian V. szerk., Williams and Wilins) a következő fertőzési modelleken teszteltük: L.monocytogenes; D.pneumoniae, S.flexneri és P.aeruginosa; az utóbbi próbát ciklofoszfamiddal immunszuppresszált egereken hajtottuk végre Chry SJ., Fürer E., Germanier R. szerinti [Infect. Imm. 39,1067-1071 (1983)). A következő 1., 2. és 3. táblázatok összefoglalják a kapott eredményeket: 1. táblázat PCE 2478 hatása egér S.flexneri és D.pneumoniae fertőzésére ip. kezelésS.flexemi D.penumoniae mortalitás% MST (nap) FCE 2478 50 mg/kg 10 5,7* 10 mg/kg 40 4,0 Kontrollok — 100 3,1 A fertőző anyagot (3 x LD50) ip. úton adtuk be. Az FCE 24578 vegyülettel vagy a hordozóval való kezeléseket a fertőzés előtti 3., 2., 1. és 0. napon hajtottuk végre. MST = átlagos túlélési idő * = a kontrolitól való eltérés szignifikanciája p < 0,01. 2. táblázat FCE 24578 hatása egér L.monocytogenes fertőzésére kezelés morta!itási% 1X LD50 FCE 24578 50 mg/kg ip. 0,0 10 mg/kg 12,5 Kontrollok -75,0 FCE 24578 250 mg/kg p.o. 25,0 50 mg/kg p.o. 37,5 Kontrollok -75,0 Az FCE 24578 vegyülettel vagy a hordozóval való kezeléseket a fertőzés előtti 3., 2., 1. és 0. napon hajtottuk végre. A fertőző anyagot (1 x LDJ0) iv. úton adtuk be. 3. táblázat FCE 24578 hatása immunszuppresszált egér P.aeruginosa fertőzésére ip. kezelés mortalitás% 2 x LD50 1 x LD50 FCE 24578 50 mg/kg 0 0 10 mg/kg 0 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
