198693. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új optikailag aktív imidazol származékok, valamint a D-enentiomert tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 A találmány tárgya eljárás új, optikailag aktív imidazol-származék előállítására. Az (I) képletű medetomidin ismert szelektív és Igen hatékony alfaj-receptor agonista. Leírták például a 72 615 sz. európai közrebocsátás! iratban mint magas vérnyomást csökkentő ágenst és a 187 471 sz. európai közrebocsátási iratban, mint az állatgyógyászatban felhasználható nyugtató-fájdalomcsillapító ágenst. A találmány tárgya a medetomidin új, optikailag aktív D- és Űenantiomerjeinek, valamint nem-toxikus, gyógyászatiig elfogadható savaddiciós sóinak az előállítására. Ezek a vegyületek a (II), illetve (III) képlettel jellemezhetők. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy racém medetomidint a (II) és (III) képletű enantiomerekre szeparálunk úgy, hogy a racemátot dlasztereoizomerek elegyévé alakítjuk át és az utóbbit frakcionált kristályosításnak vetjük alá. Minthogy a medetomidin szabad bázis, átalakítható diasztereoizomer só eleggyé úgy, hogy egy optikailag aktív savval, így például (*)-borkősawal reagáltatjuk. Más e célra használható optikailag aktív savakra példaképpen megemlíthetjük a (-)-almasavat, (-)-mandulasavat és a (+)-kámfor-l0- -szulfonsavat. A rezolváláshoz különösen jó eredményekkel használható a (+)-borkősav. A diszatereoizomerek szeparálását alkoholból, így például metanolból vagy etanolból vagy ezek elegyéből végzett ismételt kristályosítással Iiajtjük végre. Miután a diasztereoizomereket szeparáltuk, a savaddiciós sókat visszaalakíthatjuk a megfelelő szabad bázisokká úgy, hogy vizes oldataikat meglúgosítjuk nátrium-hidroxiddal és a felszabadult szabad bázist egy alkalmas szerves oldószerrel, így például metilén-kloriddal extraháljuk. A medetomidin D- és L-enantiomerjei szerves és szervetlen savakkal reagáltatva megfelelő savaddiciós sókat adnak, amelyeknek ugyanaz a terápiás hatása, mint a megfelelő szabad bázisoké. így tehát előállíthatok például a megfelelő kloridok, bromidok, szulfátok, nitrátok, foszfátok, szulfonátok, formiátok, tartarátok, maleátok, citrátok, benzoátok, szalicilotok és aszkorbátok. A medetomidin D- és L-enantiomeijei szelektív és hatékony alfa2-receptor agonisták. Az adrenerg receptorok olyan fiziológiailag fontos kötőhelyek, amelyek specifikusak a noradrenalinra és az adrenalinra, továbbá amelyek a sejtmembrán felületén helyezkednek el. A szimpatikus idegrendszer adrenoceptorjait két különböző altípusba, éspedig az alfa- és béta-receptorokra osztályozhatjuk, amely alcsoportok azután tovább osztályozhatók két-két alcsoportra, éspedig az alfaj és alfa2, illetbe bétaj és béta2-csoportokra, Ezek közül a receptor típusok közül a béta,-/béta*- és alfat-réceptorok például a slmaizomzat felületén főleg posztszinaptikusan helyezkednek el és így például a slmaizomzat összehúzását vagy elernyedését közvetítik, míg az alfa2-receptorok főleg preszinaptikusan a noradrenerg idegek végződésein helyezkednek el. Ha alfa2-receptorokat noradrenallnnal stimuláljuk fiziológiai körülmények között, akkor a noradrenalin kiválasztása gátlódlk, azaz egy negatív visszacsatolási jelenség észlelhető. Ezt a negatív visszacsatolási jelenséget ki lehet továbbá váltani bizonyos szintetikus alfa* -agonístákkal, így például a medetomidinnel és ennek néháy közeli származékával. ■ Állatkísérletekben azt találtuk, hogy a találmány szerinti eljárással előállítható D- és L-enantiomerek, különösen a D-enantiomer igen megnövelt alfa*-szelektivitást és hatékonyságot mutat a racém elegyhez, azaz a medetomidinhez képest. A D-enantiomer feltételezhetően elsősorban mint például nyugtató-fájdalomcsillapító, szorongásoldó vagy magas vérnyomást csökkentő ágensként kerülhet felhasználásra. Felhasználható továbbá mint farmakológia! eszköz az alfa2-adrenoreceptorok fiziológiájának és farmakológiájának vizsgálatában. A találmány szerinti eljárással előállítható vegyületek farmakológia! aktivitását a következő kísérletekben vizsgálhatjuk. 1. Alfa2 -agonlzmus in vitro vizsgálata Az alfa2 -agonizmust Marshall és munkatársai által a Br. J. Pharmac. 62. 147-151 (1978) szakirodalmi helyen ismertetett módszer értelmében Izolált, elektromosan ingerelt egér-ondóelvezetőcső készítményen vizsgáljuk. Ennél a modelnél egy alfa2-agonista képes blokkolni az elektromosan kiváltott izomösszehúzódásokat azáltal, hogy aktiválja a preszinaptikus alfa2- -adrenoreceptorokat, és így csökkenti a motoros transzmltterek kiválasztását. Referenciaanyagként olyan ismert alfa2-agonistákat használunk, mint a detomidin, medetomidin és klonidin. Az eredményeket az 1. táblázatban adjuk meg, mely táblázatban az alfa*-agonista hatást mint pD2-értékeket adjuk meg. A pD3 -érték alatt a kísérleti vegyület azon moláris koncentrációjának negatív logaritmusát értjük, amely a maximális gátlás 50%-át váltja ki. 1. táblázat Kísérleti vegyület alfa*-agonizmus in vitro (egér ondóelvezetőcső) pD* D-enantiomer 9,3 L-enantiomer 6,0 (részleges agonista) medetomidin 9,0 detomidin 8,5 klonidin 8,5 Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a predetomidin alfa-agonista aktivitása lényegében a D-enantiomerére korlátozódik. A D-enantiomer megnövelt alfa*-agonista aktivitású a többi vizsgált vegyülethez képest. 2. Alfa2Jalfai-szelektivitás ln vitro vizsgálva A D-enantiomer mint alfa2-agonista szelektivitását patkányagy-membránokon végzett receptor megkötési vizsgálatban tanulmányozhatjuk. A D-izomernek és a referendavegyületnek azt a képességét vizsgáljuk, hogy mennyire képes versenyezni 3 H-clonidine-val íalfa2-receptorok vonatkozásában) és 3 H-prazosinnal (alfaj-receptorok vonatkozásában). A kísérleti módszert Virtanen és Nyman az Eur. J. Pharmac., 108. 163-169 (l985)szaldrodalmi helyen ismertetett módszerével hajtjuk végre. A kísérlet eredményeit a 2. táblázatban adjuk meg, ahol a vizsgált vegyületeknek a 3 H-clonidine-val és~ H-prazosinnal összehasonlításban való kötési képességét ICj0-értékekben fejezzük Id. Az ICjo-érték a versenyző Bgandumnak az a moláris koncentrációja, amely képes a rádioaktív llgandum 50%-át kiszorítani. 198.693 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 00 2
