198627. lajstromszámú szabadalom • Eljárás granulocita telepstimuláló faktort tartalmazó stabil gyógyászati készítmény előállítására
1 HU 198627 B 2 A jelen találmány granulocita telepstimuláló faktort tartalmazó gyógyászati készítményre vonatkozik. Pontosabban jelen találmány granulocita telepstimuláló faktort tartalmazó, stabilizált olyan gyógyászati készítmény előállítására vonatkozik, amelyben az aktiv komponenst (vagyis a granulocita telepstimuláló faktor) veszteség vagy inaktiválódás ellen megvédjük, amely veszteség a készítménynek a tárolóedény falához való adszorpciója következtében, vagy a szóban forgó komponens asszociációja, polimerizációja vagy oxidációja következtében alakul ki. Kemoterápiát alkalmaznak sokféle fertőző betegség kezelésére, de mostanában gyakran tapasztalják, hogy a kemoterápia súlyos klinikai problémákat okozhat, mint például gyógyszer-rezisztens organizmusok kialakulását, betegség-okozó organizmusok kicserélődését, és súlyos mellékhatásokat. A kemoterápiával együtt járó problémák, beleértve az olyan gyógyászati szerek, mint az antibiotikumok és baktericidek alkalmazásával együtt járó problémák kiküszöbölése érdekében olyan anyagok alkalmazásával kísérleteznek, amelyek aktiválják a gazdaszervezet megelőző képességeit valamely fertőzést okozó organizmus ellen, hogy ezáltal a kemoterápia fentebb említett problémáira minél tökéletesebb megoldást nyújtsanak. A gazdaszervezet különböző megelőző képességei közül a leukoeiták fagocitás baktericid tevékenységét tekintik annak, amely a legerősebb befolyást gyakorolja a bakteriális fertőzés kezdeti periódusára, és ezért nagyon fontosnak tartják a gazdaszervezet fertőzés ellen védő képességeinek növelését olyan módon, hogy elősegítik a neutrofilek növekedését és differenciálódásukat érett állapotra. A granulocita telepstimuláló faktor (G-CSF) egyike azoknak a nagyon hasznos anyagoknak, amelyek ilyen aktivitást mutatnak; a jelen találmány bejelentői korábban már nyújtottak be szabadalmi bejelentést G-CSF-et alkalmazó, fertőzés ellen védő szerrel kapcsolatban (23 777/1985 számú japán szabadalmi bejelentés). Amint fentebb említettük, a kemoterápia különböző elkerülhetetlen problémákat hordoz magában, és intenzív erőfeszítések folynak olyan gyógyászati anyagok alkalmazására, amelyek a gazdaszervezet vagy a fertőzött személy megelőző funkcióinak aktiválására képesek. Szükségtelen hangsúlyozni, hogy a G-CSF önmagában mutatja azt a képességet, hogy aktiválja a gazdaszervezet megelőző funkcióit, és arra is rájöttek, hogy a G-CSF nagyobb terápiás hatást mutat a klinikai alkalmazásban, ha további olyan anyaggal kombinálva alkalmazzák, amely aktiválja a gazdaszervezet megelőző képességeit. A G-CSF-et nagyon kis mennyiségben alkalmazzák, így általában 0,1-500 pg (előnyösen 5-50 pg) G-CSf-et adnak be hetenként 1-7-szer adott adagokban felnőtteknek. A G-CSF azonban hajlamos arra, hogy adszorbeálódjón tárolóedényének, pl. az injekciós ampullának vagy fecskendőnek a falán. Ezért ha a gyógyszert injekcióként ilyen formában vizes oldatként alkalmazzuk, ez tárolóedényének, pl. az ampullának vagy fecskendőnek a falán adszorbeálódik. Így a G-CSF elveszti azt a képességét, hogy gyógyászati szerként teljes aktivitását mutassa, vagy szükségessé teszi a kívántnál nagyobb mennyiségű G-CSF bevitelét, így egyenlítve ki az adszorpció következtében fellépő esetleges veszteséget. Ezen túl a G-CSF labilis és nagy mértékben érzékeny a környezeti tényezőkre, mint a hőmérséklet, nedvesség, oxigén és ultraibolya sugarak. Az ilyen tényezők hatására a G-CSF olyan fizikai és kémiai változásokon megy keresztül, mint asszociáció, polimerizáció és oxidáció, és így nagy aktivitásveszteséget szenved. Ezek a jelenségek nehézzé teszik a terápiás tevékenység teljes megvalósulását igen kis mennyiségű G-CSF beadásával nagyon szabatos módon. Ezért szükséges G-CSF stabil gyógyászati készítményéi kifejleszteni, amely teljes mértékben védve van a hatásos anyag aktivitásában végbemenő csökkenés ellen. Ez a jelen találmány elsődleges tárgya, amely találmány tehát G-CSF stabil gyógyászati készítményét nyújtja. A jelen találmány feltalálói intenzív tanulmányokat folytattak abból a célból, hogy növeljék a G-CSF-et tartalmazó gyógyászati készítmények stabilitását, és arra jöttek rá, hogy ez a feladat hatásosan megvalósítható gyógyászatilag elfogadható felületaktív anyagok, szacharinok, fehérjék és/vagy nagy molekulatömegű vegyületek alkalmazásával. Ennek megfelelően a jelen találmány szerinti, stabil G-CSF-et tartalmazó gyógyászati készítmény fizzál jellemezhető, hogy a G-CSF mellett legalább egy anyagot tartalmaz az alábbiak közül: gyógyászatilag elfogadható felületaktív anyagok, szacharidok, fehérjék, és nagy molekulatömegű vegyületek. A G-CSF-et, amelyet a jelen találmány szerinti gyógyászati készítmények tartalmaznak, bármilyen módszer szerint előállíthatjuk például a 153 273/1984, 269 455/1985, 269456/1985, 270 838/1985 és 270 839/1985 számú japán szabadalmi bejelentések leíró részében ismertetett módszerek szerint. így pl. a humán G-CSF-et el lehet készíteni vagy egy olyan sejtvonal (CNCM 1-315 vagy 1-483 letéti számon) tenyésztésével, amelyet szájüregrákban szenvedő betegek tumorjából izoláltak, vagy egy rekombináns DNS (amelyet humán G-CSF-et kódoló gén közreműködésével készítettek) kifejezésével megfelelő gazdasejtben (pl. E. coli, C 127 sejt, vagy kínai hörcsög petefészek-sejtjei). Bármilyen humán G-CSF, amelyet nagy mértékben tisztítottak, alkalmazható G-CSF-kérit a jelen találmány szerinti gyógyászati G 10 15 20 25 30 35 ■10 45 50 55 60 65 3
