198569. lajstromszámú szabadalom • Új bioautográfiás eljárás antibiotikumok és bomlástermékeik aktivitásának meghatározására
3 HU 198569 B 4 agar réteggel felfelé átfordítjuk egy üres Petri-csészébe, annak fedelével lezárjuk és műanyag fóliába tesszük a bioautogrammot. A diffúziós idő leteltéig (kb. 30 perc) 4 °C-on tartjuk, ezt kővetően 18 órára 37 °C-os termosztátba helyezzük. A 2,3,5-trifenil-tetrazólium-klorid formazánná való redukciójának eredményeképpen az agar vörösbarna színű lesz, Így a kioltási zónák a színes háttér mellett igen jól értékelhetők. Találmányunk szerinti új módszer számos penicillin, cefalosporin és tetraciklin kimutatáséra alkalmas. Igen érzékeny (0,01-0,1 meg), technikailag könnyen kivitelezhető, jól reprodukálható, és az eddig ismert módszerekkel szemben igen kis mennyiségű (mintegy 15 ml térfogatú) fertőzött agar alkalmazását igényli. A párhuzamosan elkészített kromatogramokon pedig a szennyeződések, mint pl. a bomlástermékek ultraibolya fényben észlelhetők, Így a vizsgált anyagról komplett információt kaphatunk. SZABADALMI IGÉNYPONTOK Új bioautográfiás eljárás antibiotikumok és bomlástermékeik aktivitásának meghatározá- 5 sara, Azzal jellemezve, hogy Petri-csészében maximum 15 ml, baktérium szuszpenzióval inokulált és indikátort is tartalmazó agar lemezt készítünk, melyre buborékmentesen rásimitjuk a célszerűen 7,5 x 5,0 cm méretű, a 10 meghatározandó antibiotikumot tartalmazó kifejlesztett réteg kromatogramot, az agart a kromatográfiás lemez szélei mentén körbe vágjuk, majd agar réteggel felfelé átfordítjuk azt egy másik Petri-csészébe, melyet azt 15 kővetően annak fedelével lefedünk, először mintegy 30 percen át 4 cC-on, majd 18 órán ét, előnyösen 30-37 °C-on, inkubélást végzünk. 20 Kiadja az Országos Találmányi Hivatal, Budapest - A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető R-4861 - KJK 4 90.2229.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkó István vezérigazgató
