198500. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cefem-karbonsav származéko, valamint ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198500 B 2 általános képlett! vegyületet - R3 és R4 jelentése a már megadott - egy (XV) általános képlett! vegyülettel reagáltatjuk, amely képletben R2 jelentése a már megadott. A találmány a továbbiakban hatásvizsgálati példákkal és előállítási példákkal ismertetjük részletesebben; a találmány nem korlátozódik ezen konkrét példákra. 1. hatásvizsgálati példa: a minimális inhibitáló koncentráció meghatározása. A |Xg/ml dimenzióban kifejezett minimális inhibitáló koncentrációt (M.I.C.) mindegyik vizsgált hatóanyagnál agarlemezes hígítási módszerrel mérjük, amely a Japán Kémiai Terápia Akadémia szabványos vizsgálati módszere, ehhez alkalmazva a Nissui K.K. által gyártott Muller-Hinton agar tenyészközeget. A hatóanyagok hatását a következő teszt baktériumokkal vizsgáltuk: Staphylococcus aureus FDA 209-P JC-1; Escherichia coli ML 4707; Klebsiella pneumoniae No. 42; Proteus vulgaris No. 33; Serratia marcescens No. 16-2; Enterobacter cloacae Nek 39; Acinetobacter calcoaceticus No. 4; Pseudomonas aeruginosa K-13; Pseudomonas aeruginosa Y-l; és Pseudomonas cepacia 23. Az eredményeket az 1. táblázat mutatja. 2. hatásvizsgálati példa: fertőzés-megelőző hatás. 4 hetes, 17-19 g testtömegií, JCL:JCR fajtájú hím egereket alkalmazunk 6-10 állatos csoportokban. A hatóanyagok hatását a következő teszt baktériumokkal vizsgáljuk: a) Staphylococcus aureus Smith, b) Escherichia coli ML 4707, c) Pseudomonas aeruginosa K-13 és d) Pseudomonas aeruginosa Y-l. A teszt baktériumokat 37 ’C hőmérsékleten tizenhat órán át tenyésztjük táptalajon. A tesztmintákat a baktérium típusától függően készítjük: a c) és d) teszt baktériumokkal 0,5-5 %-ban mucint tartalmazó oldatokat készítünk, az a) és b) teszt baktériumokkal mucint nem tartalmazó oldatokat készítünk. A baktérium-oldatokat intraperitoneálisan inokuláljuk az egerekbe 0,5-0,5 ml-nyi adagolással, majd egy óra eltelte után a hatóanyagmintákat tartalmazó oldatokat adjuk be esetenkénti eltérő adagolással bőr alá. Ezután hét napig figyeljük az egereket (halál, túlélés). A hét nap alatt kapott túlélési rátákból Probit módszerrel határozzuk meg az ED50 értékeket. Az eredményeket a 2. táblázat mutatja. A (II) általános képlett! köztitermék előállítását ismerteti az 1. példa, a többi példa az (I) általános képlett! cél termékek előállításának egy vagy több lépését ismerteti. 1 1. példa (Z)-2-(2-Tritil-amino-tiazol-4-il)-2-[ 1,5- -di(benzhidril-oxi)-4- piridon-2-il-metoxi-imino]-ecetsav előállítása. (1) képlet Ezt a vegyületet az A folyamatábrán mutatott lépésekben állítjuk elő. (A) 5-Benzhidril-oxi-2-hidroxi-metil-4-piron előállítása. A szintézist az 1-1 folyamatábra szemlélteti. 14,2 g (0,1 mól) kojisavat (2-hidroxi-metil-5-hidroxi-y-piron) adunk 400 ml etanolhoz, amelyben - 60 "C-ra hevítve - feloldjuk. Az oldatot szobahőmérsékletre hűtjük, majd hozzáadunk 29,1 g (0,15 mól) difenildiazo-metánt és az elegyét szobahőmérsékleten, keverés közben reagáltatjuk tizennyolc órán át. A reakcióoldatot szárazra pároljuk és hozzáadunk 300 ml benzolt, majd kiszűrjük a nem oldódó részeket. A szűrlethez 300 ml vizet adunk, a képződő csapadékot kiszűrjük és benzollal mossuk; így a cím szerinti pironszármazékból 17,5 g-ot (kitermelés: 56,8 %) kapunk. NMR-spektrum (CDCI3) 8 (ppm): 4,33, (2H, s); 6,29 (1H, s); 6,49 (1H, s); 7,36 (10H, s); 7,44 (1H, s). (B) 1 -Hidroxi-2-hidroxi-metil-5-benzhidril-oxi-4-piridon előállítása. A szintézist az 1-2 folyamatábra szemlélteti. Az (A) lépésben kapott termékből 17,5 g-t (0,0568 mól) hozzáadunk 60 ml etanol és 60 ml víz elegyéhez és abban feloldjuk, majd hozzáadunk 39,5 g (0,568 mól) hidroxil-amin-hidrogén-kloridot és 77,2 g (0,568 mól) nátrium-acetát-trihidrátot és az elegyet keverés közben, 60 "C hőmérsékleten reagáltatjuk tizennyolc órán át. A keletkezett csapadékot kiszűrjük és mossuk egymást követően előbb vízzel, azután etanollal, végül etiléterrel, majd szárítjuk; így kapunk a cím szerinti piridonszármazékból 8,1 g-t (kitermelés: 44,0 %). NMR-spektrum (DMSO-dó) 8 (ppm): 2,71 (2H, s); 6,65 (1H, s); 6,87 (1H, s); 7,26-7,63 (10H, m); 7,93 (1H, s). (C) 1,5-Di(benzhidril-oxi)-2-hidroxi-metil-4- -piridon előállítása. A szintézist az 1-3 folyamatábra szemlélteti. A (B) lépésben kapott termékből 8,1 g-t (0,0251 mól) hozzáadunk 125 ml DMSO-hoz és abban - 100 "C-ra hevítve - feloldjuk. Az oldatot szobahőmérsékletre hűtjük és hozzáadunk 5,2 g (0,0375 mól) káliumkarbonátot, 5,6 g (0,0375 mól) nátrium-jodidot és 6,7 ml (0,0375 mól) benzhidril-kloridot, majd az elegyet szobahőmérsékleten, keverés közben reagáltatjuk tizennyolc órán át. A reakcióoldathoz ezután fokozatosan hozzáadunk jeges vizet, a képződő csapadékot kiszűrjük és egymást követően mossuk előbb vízzel, majd etiléter és n-hexán 2:1 arányú elegyével, végül szárítjuk; így a cím szerinti termékből 12,3 g-t (kitermelés: 100 %) kapunk. NMR-spektrum (CDCI3) 8 (ppm): 4,35 (2H, s); 5,96 (1H, s); 6,06 (1H, s); 6,55 (1H, s); 6,75 (1H, s); 7,26 (20H, s). (D) 2-Ftálimido-oxi-metil-l ,5-di(benzhidril-oxi)-4- -piridon előállítása. A szintézist az 1- 4 folyamatábra szemlélteti. A (C) lépésben kapott termékből 12,3 g-1 (0,0251 mól) hozzáadunk 125 ml DMF-hez és abban feloldjuk, majd hozzáadunk 250 ml vízmentes THF-t, 4,1 g (0,0251 mól) N-hidroxi- ftálimidet és 9,9 g (0,0376 mól) trifenil-foszfint. Ezt követően jeges hűtés közben hozzácsepegtetünk 5,8 ml (0,0377 mól) dietil- diazo-dikarboxilátot. Az elegyet változatlan hőmérsékleten tíz percig keverjük, majd hozzáadunk 500 ml eril-acetátot és 1500 ml vizet). Az etil-acetátos fázist előbb vízzel, majd telített nátrium-kloridos oldattal mossuk és vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
