198471. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kinolinkarbonsav származékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198471 B 2 3. kísérlet In vitro antibakteriális hatás Mycoplasma ellen A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek hatását in vitro M. pneumonias Mac. ellen Nakamura és munkatársai [Antimicrob. Agents Chemother 23, 5 641-648 (1978)] módszere szerint vizsgáljuk. A minimális gátlási koncentráció-értékeket a 4. táblázatban ismertetjük. Az eredmények alapján megállapíthatjuük, hogy a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek általában hatásosabbak, mint az összehasonlításra használt ismert vegyületek. 4. táblázat: In vitro antibakteriális aktivitás Mycoplasma ellen (M. pneumoniae Mac.) Vegyület MIC*(p/ml) 1. példa 0,05 2. példa 0,05 A 0,39 B 0,05 CFLX 0,78 NFLX 3,13 TC* 0,78 * MIC alatt azt a hatóanyag-koncentrációt értjük, amelynek jelenlétében 5 napos inkubálás után sem észlelhető baktériumszaporodás a táptalajban ** TC jelentése tetraciklin 4. kísérlet Felszívódás, megoszlás és kiürülés vizsgálata Éheztetett patkányoknak 10 mg/kg dózisban adjuk 25 a vizsgálandó vegyületet orálisan, és meghatározott időközökben megvizsgáljuk a vérben, szervekben, epében és vizeletben a hatóanyag mennyiségét, a meghatározót bakteriológiai módszerrel (cup-módszer) végezzük Y. Oomori és munkatársai [Chemotherapy 30 (Tokyo) 29 (Suppl. 4), 91-97 (1981)] módszere szerint, E. coli NIHJ JC-2 mikroorganizmus segítségével. Az eredményeket az 5. és 6. táblázatban ismertetjük. Az eredmények alapján megállapíthatjuk, hogy a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek terápiás 35 hatása várhatóan nagyobb, mint az ismert vegyületeké, mivel a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek koncentrációja az összehasonlító vegyietekéhez képest magasabb. 40 5. kísérlet 2. példa szerint előállított vegyiilet szérumszintjének összehasonlítása a B vegyületével, kutyán Három kutyának orálisan adagoljuk 2 mg/kg dózisban a vizsgálandó vegyületet. Az állatokból meg- 45 határozott időközökben vérmintát veszünk, és a hatóanyag mennyiségét nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással meghatározzuk. Az 1. ábrán ábrázoljuk a három állatban meghatározott átlagos koncentráció-értékeket az idő függvényében, a találmány szerinti eljárással előállított 2. példa szerinti vegyület (8-klór-származék), illetve a 196986 számú magyar szabadalmi leírás szerinti B vegyület(8- fluor-származék) orális adagolása esetén. A vizsgálati eredményeket táblázatosán a 7. táblázatban foglaljuk össze. Az 1. ábrából látható, hogy a találmány szerinti eljárással előállított 2. példa szerinti vegyület vérszintje lényegesen magasabb, mint az ismert B vegyületé, és felezési ideje is nagyobb. Mivel a nagyobb állatok metabolikus funkciója és állapota jobban emlékeztet az emberi testben lejátszódó folyamatokra, mint a kisebb állatoké (lásd 4. kísérlet), az 5. kísérlet eredményei azt bizonyítják, hogy a 8-klór-számrazék embergyőgyászatban alkalmazva várhatóan hatásosabb, mint a 8- fluor-származék. 5. táblázat: Vegyületek koncentrációja az egyes szervekben (pg/ml vagy g) (átlagérték ± S.D., n=5) Szerv Vegyület Mintavétel ideje kezelés után (óra) 0,5 1 2 4 6 8 Szérum B vegyület 1,47±0,19 1,30+0,20 0,9Q±0,19 0,4210,15 0,26±0,09 0,1210,04 2. példa 1,72±0,37 1,12±0,30 0,57±0,08 0,2310,04 0,10+0,01 0,14+0,08 CFLX 0,47±0,28 0,38±0,11 0,2510,05 0,09±0,03 0,0510,0 1 0,0310,01 tüdő B vegyület 3,84±0,42 2,94±0,22 1,9210,33 1,12+0,31 0,78+0,19 0,3810,08 2. példa 3,17±0,71 2,66±0,42 1,5410,21 0,70±0,08 0,42±0,05 0,4510,15 CFLX 0,86±0,58 0,60±0,19 0,2910,02 0,14±0,02 0,0710,03 0,0610,01 máj B vegyület 9,4810,44 6,2410,53 4,3210,43 2,36±0,48 1,6210,29 0,8210,19 2. példa 7,78±0,91 5,71±0,63 3,14±0,36 1,3410,12 0,8610,15 1,1310,52 CFLX 5,17±2,53 3,28±0,98 1,49±0,37 0,39±0,05 0,21+0,11 0,1510,05 13
