198441. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cikloalkil-csoporttal helyettesített 4-amionofenil-zármazékok és gyógyászatilag elfogadható sóik, valamint az ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 reaktív származékával reagáltutva. A reakciót végrehajthatjuk a szerves kémiában leírt, Grignard-reakriók végrehajtásánál általában szokásos körülmények kö-. zött. Az (V), (VI), (VH), (VIII) és (IX) általános képletű vegyületek ismertek vagy ismert vegyületekből ismert módon előállíthatok. A találmány szerinti vegyületeknek aromatáz-inhibitor hatásuk van. ln vitro aromatáz-inhibitor hatásuk összehasonlítása a jól ismert nem-sztereoid típusú aminoglutethimide [Sauten, J. R. és munkatársai: Cancer Research (Suppl.), 42, 3353s, (1982)] és 4-dklohexil-anilin [Kellis, J. T. és munkatársai: Endocrinology, 114, 2128, (1984)] aromatáz-inhibitorok in vitro hatásával azt mutatta, hogy a találmány szerinti vegyületek hatásosabb aromatáz-inhibitorok a referenciavegyületeknél. Így például a találmányunk szerinti vegyületek közé tartozó 2-(R)-2-(4'-amino-fenil)-propionsav-ciklohexilészter [belső kódszáma FCE 24328] és N-ciklohexií-2-(R)-2-(4'-amino-fenil)-propánamid [belső kódszáma FCE 24786] és a két fenti referenciavegyület in vitro hatásának összehasonlítása a következő táblázatban összefoglalt eredményeket mutatta. Táblázat Emberi placenta aromatdz in vitro inhibíciója Vegyidet Aromatáz inhibíció 1C50 OzM) relatív hatékonyság aminogl utethimide 2,12 1 (definídószerűen) 4-dklohexil-anilin 1,22 1,7 FCE 24328 0,10 21,2 FCE 24786 0.13 16,3 FCE 24328: olyan (la) általános képletű vegyidet, amelynek képletében R jelentése metdcsoport, A jelentbe karbonilcsoport, B jelentése oxigénatom, n jelentése 4, FCE 24786: olyan (la) általános képletű vegyidet, amelynek képletében R jelentése metdcsoport, A jelentése karbonilcsoport, B jelentése iminocsoport, n jelentése 4. Az aromatáz inhibíció in vitro vizsgálatát a következőképpen végeztük: emberi placentaszövet mikroszomális frakciójából ismert módon izoláltuk az enzimrendszert. Thompson és Siiteri mérési módszerét alkalmaztuk [Thompson, F. A., Siiteri, P. K.: J. Bioi, Chem., 249, 5364, (1974)], amely az aromatizálódás mértékét a 4-[l|3,2/3- H]androsztén-3,17- -dionból felszabaduló 3H20 mérése alapján határozza meg. Az inkubálást mindig rázatott vízfürdőben 37 °C levegőhőmérsékleten, 10 mM kálium-foszfát puffer (pH= 7,5) alkalmazásával végeztük, a puffer 100 mM kálium-kloridot, 1 mM EDTA-t és 1 mM ditio-treitolt is tartalmazott. A vizsgálatokat 1 ml térfogatú inkubált anyagon végeztük, amely 50 nM 4-p H]androsztén-diont, az inhibitorok különböző mennyiségét, 100 ßM NADPH-t és 0,05 mg mikroszomális fehérjét tartalmazta. 15 perc inkubüüás után a reakciót 5 ml kloroform hozzáadásával leállítottuk 5 perc 1500 g-n végzett centrifugálás után a vizes fázisból 0,5 ml-es aliquot részeket vettünk ki a képződött 3 H2 O meghatározására. Az egyes vegyületeknek azt a koncentrációját, amely az aromatáz hatásának 50%-kal való csökkentéséhez szükséges (IC5 0) úgy határozzuk meg, hogy megrajzoljuk a százalékos inhibíciót az inhibitorkoncentráció logaritmusának függvényében ábrázoló görbét Az egyes vegyületek viszonylagos hatékonyságát az aminoglutethimide-hez viszonyítva az alábbi öszszefüggés alapján számítjuk ki: aminoglutethimide JCS0 értéke Viszonylagos hatékonyság* a vizsgált vegyület IC50 értéké A fenti aromatáz inhibitáló hatás alapján a találmány szerinti vegyületek minden olyan esetben hasznosak lehetnek, amikor az ösztrogénszintézis mérséklése kívánatos, elsősorban az ösztrogén függő daganatos megbetegedések. így példáid a pre- és post-menopauzális emlőrák, a petefészekrák, a méhnyálkahártya daganatai, a hasnyálmirigy-daganatok és a prosztata hipertrófia vagy hiperplázia esetében. Ennek megfelelően a találmány oltalmi körébe tartozik az aromatáz enzim inhibíciójára szolgáló eljárás is, és ebből következően, az ösztrogén bioszintézis gátlása révén egy olyan eljárás is, amely az ösztrogénfüggő daganatok így például az emlődaganatok, a petefészekdaganatok, a mehdaganatok, a hasnyálmirigy-daganatok és a prosztata hipertrófia vagy hiperplázia - kezelésére szolgál oly módon, hogy a betegnek a találmány szerinti vegyület hatásos mennyiségét vagy az azt tartalmazó gyógyszerkészítményt adjuk be. A találmány szerinti vegyületeket számos adagolási formában alkalmazhatjuk. így orálisan, tabletták, kapszulák, cukorbevonatos vagy filmtabletták, folyékony oldatok vagy szuszpenziók formájában, rektálisan, szuppozitóriumok formájában, parenterálisan, például intramuszkulárisan vagy intravénás injekcióval vagy infúzióval. Az alkalmazott dózis függ a beteg korától, súlyától, állapotától és a beadás módjától, így például felnőtt ember orális adagja körülbelül 10-400 mg, és ezt a dózist napjában 1—5 alkalommal adhatjuk be. Amint azt már említettük, a találmány oltalmi körébe tartoznak az olyan gyógyászati készítmények előállítása is, amelyek a találmány szerinti hatóanyagot gyógyászatiig elfogadható segédanyaggal — amely lehet hordozó vagy hígító - összekeverve tartalmazzák. A találmány szerinti vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítményeket általában szokásos módszerekkel állítjuk elő és gyógyszerészetiig megfelelő formában adjuk be. Így például az orális beadásra szánt szilárd készítmények a hatóanyag mellett töltőanyagokat, például laktózt, dextrózt, szaccharózt, cellulózt, kukoricakeményítőt vagy burgonyakeményítőt, lubrikánsokat, például szilícium-oxidot, talkumot, sztearinsavat, magnézium- vagy kaldum-sztearátot és/vagy polietilénglikolokat, kötőanyagokat, például keményítőket, gumiarábikumot, zselatint, metil-cellulózt, karbcximetil-cellulózt vagy poliviníl-pirrolidont, dezintegrációt elősegítő anyagokat, például valamilyen keményítőt, alginsavat, alginátokat vagy nátrium-karboxinietil-keményítőt, habzást kiváltó keverékeket, színe198.441 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
