198220. lajstromszámú szabadalom • Eljárás S-184 heteropoliszacharid előállítására
13 HU 198220 B Megjegyzés: NG: nincs növekedés NC: nincs változás NT: nem vizsgáltuk +: pozitív -: negatív Mivel a mikroorganizmus szigorúan aerob, Gram-negativ, vegyes ostoros formákat mutat, az Alcaligenes nemzetségbe tartozónak találtuk a Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology (1974) 8. kiadása alapján. Az Alcaligenes nemzetséget a legutóbbi Bergey-kézikönyv (Bergey’s Manual of Systematic Microbiology, 1. kötet, 1. kiadás, 1984) újra meghatározta, és kizárja az összes pigmenttartalú organizmust. Az izolált, S-184 heteropoliszacharidot termelő mikroorganizmus beleillik ebbe az újra meghatározott nemzetségbe, de nem tartozik a felsorolt két faj, az Alcaligenes faecalis, Alcaligenes denitrificans subsp. denitrificans és Alcaligenes denitrificans subsp. xylosoxidans egyikébe sem. Az S-184 heteropoliszacharid termelő mikroorganizmus tehát egy új Alcaligenes faj. A találmány szerinti eljárást a következő, nem korlátozó jellegű példákkal szemléltetjük. 1. példa YM lombik oltóanyagot egy rázógépen 30 °C-on 48 óra hosszat tenyésztett tápagaros tenyészetből nyertünk. Kb. 24 órával később ezzel az oltóanyaggal beoltottunk egy lombikot, amely El tápközeget tartalmazott 3% hidrolizált keményítővel mint szénforrással. A lombikot rázógépre helyeztük 30 °C-os hőmérsékleten. Kb. 72 óra múlva a lombik viszkózus, sörszerű anyagot tartalmazott, amelyhez 2-szeres térfogat 99%-os izopropilalkoholt adva szálas csapadék képződött. Az Ei tápközeg összetétele: 5 g dikálium-hidrogén-foszfát, 0,1 g magnézium-szulfát, 0,9 g ammónium-nitrát, 0,5 g Promosoy 100 (enzimesen emésztett szójaliszt, Central Soya Chemurgy Division gyártmánya), 30 g dextróz és 1 liter csapviz, pH 7,6-7,8. Egy másik YM oltóanyag lombikot készítettünk a fenti módon, és a 24 órás oltóanyaggal beoltottunk 4 lombikot, amelyek különböző tápkózeget tartalmaztak, 30 °C-on 72 óra hosszat rázógépen tenyésztettük, és ezután mértük a pH-t, viszkozitást, termelt polimert és a termék viszkozitását. Az eredményeket az V. táblázatban foglaltuk össze. 5 10 15 20 25 30 35 4i Jh 3 a u ■40 * *3 qj S3 ^ bo 4i •o A! 0. 3 40 45 50 55 60 14 ou ou ji « M O * .2 x 9*4 co a 3 £ e * | « P C to J o t í w 22 % Bä tt) w 4-> 2 o o o o Cl CM o t-Q x q a X X a 2 O Q X X O •*r co cm cd CO CD t- CM <d X ft o o o o o o o o co CM CD cc*c-CM 00 CD cn CO <o CD BŰ *CŰ u u o N w N ‘0-o •o *o X * a o a a to tű «0 tt X X X co co C3 P5 no 4) N •o Pi •03 W *o — a l O 4) o o £ X o + o H X H (L H WWW o o 0} K ja °Í 65 Megjegyzés: ND nem határoztuk meg HoLe-sók: a következő komponenseket adjuk 1 liter ionmentes vagy desztillált vízhez (1. a következő oldalon):