198215. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a TAN-749 antibiotikummal rokon szerkezetű vegyületek előállítására
17 HU 1982IF. B 18 ráljuk, és utána 70 ml aktivszénnel töltött oszlopon átfolyatjuk. Az eluálást egymás után 350 ml vízzel, 500 ml 8% izobutanolt tartalmazó vízzel végezzük, 70 ml-es frakciókat szedünk. Minden frakciót nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáltunk, mozgó fázisként 25X metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesítjük és koncentráljuk, majd a kapott koncentrátumot liofilizáljuk. 899 mg 9. vegyületet kapunk, di(hidrogén-klorid)-só formájában, fehér porként. Optikai forgatóképesség: [oC]z«d = +28,9 ° (c = 0,57, víz) Elemanalízis eredmények a C16H33N5O3 • • 2HC1 • 0,5H2O összegképlet alapján: számított: C = 45,18%, H = 8,53%; N = 16,46%, Cl = 16,67%; talált: C = 44,96%, H = 8,82%, N = 16,46%, Cl = 17,10%. 6. példa 19,3 g 80% tisztaságú, di(hidrogén-klorid)-só formájában lévő 8. vegyületet 400 ml 50% dioxánt tartalmazó vízben oldunk, és hozzáadunk 7,65 ml trietil-amint és 13,5 g BOC-ON-t. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 5 órán át keverjük, miközben trietil-amin hozzáadásával az elegy pH-ját közelítőleg 8,5 értéken tartjuk. A reakcióelegy pH-ját 2 n sósavoldattal közel 6,5-re állítjuk, majd a dioxánt eltávolitva koncentráljuk. A kapott koncentrátumot 900 ml vízzel hígítjuk és 800 ml 1:1 térfogatarányú etil-acetát-dietil-éter eleggyel mossuk. A szerves fázist elválasztjuk, és 500 ml vízzel tovább extraháljuk. A kapott extraktumot egyesítjük a vizes fázissal, és koncentráljuk, majd a kapott koncentrátum pH-ját 5,6-ra állítjuk, és 450 ml, 150-290 pia szemcseméretű Diaion Hp-20 töltetű oszlopon étfolyatjuk. Az oszlopot 1,35 1 vízzel, 1,35 1 50% metanolt tartalmazó vízzel, majd 1,8 1 50% metanolt tartalmazó 0,005 n sósavoldattal eluáljuk, 450 ml-es frakciókat szedünk. Minden kapott frakciót nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizálunk, mozgó fázisként 60% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesítjük és koncentráljuk, majd a koncentrátumot liofilizáljuk. 13,4 g 10. vegyületet kapunk, hidrogén-klorid-só formájában. Optikai forgatóképesség: [cC]^ = -13,3 0 (c = 0,67, viz) Elemanalizis eredmények a C20H39N5O5 • HC1 összegképlet alapján: számított: C = 51,55%, H = 8,65%, N = 15,03%, Cl = 7,61%; talált: C = 51,22%, H = 9,06%, N = 14,82%, Cl = 7,64%. 7. példa 700 mg di(hidrogén-klorid)-só formájában lévő 9. vegyületet 28 ml 50% dioxánt tartalmazó vízben oldunk, és az oldathoz 0,28 ml trietil-amint és 465 mg BOC-ON-t adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten 8 órán át keverjük, miközben az elegy pH-ját trietil-amin hozzáadásával közelítőleg 8,8 értéken tartjuk. A reakcióele gyei. koncentrálva eltávolítjuk a dioxánt. A kapott koncentrátumot 100 ml vizzel hígítjuk, majd kétszer 100 ml 5:1 térogatarányú éter-hexán eleggyel mossuk. A szerves fázist elválasztjuk és 150 ml vizzel extraháljuk. A kapott extraktumot a vizes fázissal egyesítjük, az elegy pH-ját 7-re állítjuk, majd koncentráljuk, és 30 ml 150-290 um szemcseméretű Diaion HP-20-on adszorbeáljuk. Az eluálást 120 ml vizzel, 120 ml 20% metanolt tartalmazó vizzel, 120 ml 50% metanolt tartalmazó vizzel, végül 120 ml 50% metanolt tartalmazó 0,005 n sósavoldattal végezzük, 20 ml-es frakciókat szedünk az eluótumból. Minden kapott frakciót nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizálunk, mozgó fázisként 60% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszfo-savoldatot (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesitjük és koncentráljuk. A koncentrátumokat liofilizáljuk. 487 mg 11. vegyületet kapunk, hidrogén-klorid-só formájában, fehér porként. Optikai forgatóképesség: [üCPD = +23,1 0 (c = 0,38, víz) Elemanalízis eredmények a CziHuNsOs ■ HC1 • ■ H2O összegképlet alapján: számított: C = 51,57%, H = 8,86%, N = 14,32%, Cl = 7,25%; talált: C = 51,40%, H = 9,05%, N = 14,21%, Cl = 7,21%. 8. példa 202 mg di(hidrogén-klorid)-só formájában lévő 8. vegyületet 100 ml 0,03 mól/1 koncentrációjú foszfót-pufferoldakban (pH 7,0) oldunk. Az oldathoz 10 g Pseudomonas acidovoranB IFO 13582 baktériumBejtet adunk, majd az oldatot 37 °C-on 15 órán ót rázzuk. A reakcióelegyet centrifugáljuk, a kapott felülúszó pH-ját 7,0-ra állítjuk, majd 40 ml 74- -150 pm szemcBeméretű Amberlite CG-50-nel (H*-típusú, Rohm és Haas, USA) töltött oszlopon folyatjuk keresztül. Az oszlopot 200 ml vízzel; majd 160 ml 0,01 n sósavoldattal mossuk, utána 0,02 n sósavoldattal frakcionálva eluáljuk. A kapott frakciókat, nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 30% acetonitrilt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú oktánszulfonát-0,02 mól/1 koncentrációjú foszforsav (pH 3) elegyet használunk. A fő komponensként kívánt 12. vegyületet tartalmazó frakciókat egyesítjük és koncentráljuk. A kapott koncentrátumot liofilizáljuk. 147 rag nyerB port kapunk, amelyet kevés vízben oldunk, és 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
