198128. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyszerkészítmények előlllításár, liposzómákat tartalmazó vizes diszperzió vagy száraz készítmény alakjában
i98 123 4 mint a Minikai eredmények nélkülözik a megkívánt reprodukálhatóságot, ami mindeddig akadályozta ennek a már régebben ismert és intenzíven vizsgált adagolási formának az ipari alkalmazását. Az 1 523 965 sz. brit szabadalmi leírásban olyan liposzóm a-diszperziókat mutatnak be, amelyek nem természetes, hanem szintetikus foszfoiipidekből állnak és ezek mindegyik lipid komponensben kizárólag telített, vagy csak telítetlen acil-csoportokat tartalmaznak, Ezek a liposzóma-diszperziók ugyan jobb stabilitási tulajdonságokat mutatnak, mint a természetes lipideket tartalmazó liposzóma-diszperziók, de toxikológiai szempontból kifogásolhatók. A találmány célkitűzése olyan gyógyszerkészítmények előállítása volt, amelyek vizes fázisban egyenletes' méreteloszlású és nagy stabilitású liposzómadiszperziókat képeznek és toxikológiai szempontból kifogástalanok. A találmány tárgya gyógyszerkészítmény előállítása liposzóma tartalmú vizes diszperzió vagy száraz készítmény alakjában, amelyek szintetikus, lényegében tiszta foszfolipideket tartalmaznak, azzal jellemezve, hogy a) egy szintetikus, alapvetően tiszta (1) általános képletű foszfolipidből — ahol RtésR2 jelentése azonos és 9-cisz-dodecenoil-, 9-cisz-tetradecenoil-, 9-cisz-hexadecenoil-, 9-cisz-oktadecenoil- vagy 9-ciszikozenoil-csoport, és Y* jelentése nátriumion, és egy szintetikus, alapvetően tiszta (II) általános képletű foszfolipidből — álról R4 jelentése n-dodekanoil-, n-tetradekanoil-, n hexadekanoil- vagy a n-oktadekanoil-csoport, R3 jelentése 9-cisz-dodecenoil-, 9-cisz-tetradecenoil-, 9-cisz-hexadecenoil-, 9-ciszoktadecenoil- vagy 9-cisz-ikozenoil-csoport, Ra, Rb és Rc jelentése metilcsoport, kb. 10:90 — kb. 50 :50 mól% arányban véve az (I) és a (II) általános képletű foszfolipideket, homogén keveréket készítünk egy, a gyulladáscsökkentő szerek, antibiotikumok, leish maniasis elleni szerek, gombaellenes, daganatgátló szerek, és az immunmodulátorok csoportjaiba tartozó lipofil gyógyszer-hatóanyaggal vagy -hatóanyag-keverékkel és a kapott homogén keveréket adott esetben vizes fázisban diszpergáljuk, vagy b) szintetikus, lényegében tiszta (I) és (II) általános képletű foszfoiipidekből — a megadott mólarányban — homogén keveréket állítunk elő, és a kapott homogén keveréket adott esetben vizes fázisban — amely egy vízoldható gyógyszer-hatóanyagot vagy hatóanyag-keveréket tartalmaz — diszpergáljuk, majd szükség esetén a kapott vizes diszperziót pH 7,0-7,8-ra állítjuk be pufferrel és kívánt esetben a kapott liposzómákat dúsítjuk ás/yagy elkülönítjük. A találmány szerint előállítható ' új liposzómadiszperzió egy szerin-komponenst — amely kizárólag telítetlen acil-maradékokból áll — és egy sajátos lecitin-komponenst — amely egy telített és egy telítetlen acil-maradékot is tartalmaz — foglal magában. A következő kísérleti jelentésben megfelelő toxikológiai adatok segítségével kimutatjuk,hogy egy, a találmány szerinti liposzóma-diszperzió — amely egy telítetlen acil-csoportokkal rendelkező szcrln komponenst és egy telített és egy telítetlen acil-csoportot hordozó lecitin komponenst tartalmaz — meglepő módon előnyösebb, mint egy, az 1 523 965 sz. brit szabadalmi leírás szerinti ismert liposzóma-diszperzió, amelynek szerin-komponense és lecitin-komponcnse kizárólag telített acil-maradékokat tartalmaz. Ezenkívül a találmány szerint előállítható liposzóma-diszperzió váratlan módon felülmúlja egy olyan ismert liposzómadiszperzió hatását, amelynek szerin-komponense csak telítetlen acil-csoportokat és lecitin komponense csak telített acil-csoportokat tartalmaz. Vizsgálati jelentés I. Vizsgált liposzóma-keverékek A vizsgált liposzóma-keverékek a következő lipidösszetevőkeí tartalmazzák: 1: l,2-di-n-hexadckanoil-3-sn-foszfatidil-S-szerin (Avanti Polar Lipids Inc., Birmingham, Ala.) és l,2-din-n-oktadekanoil-3-sn-foszfatidil-kolin (Avanti, tömegarány 3 :7). 2: 1,2-di-(-cisz-oktadecenoil)-3-sn-foszfatidil-S-szerin (Előállítás Browning J. and Seelig J., Chem. and Physics of Lipids 24 (1979), 103 szerint] és 1,2-din-oktadekanoil-3-sn-foszfatidil-kolin (Avanti, tömegarány 3 :7). 3: 1,2-di-(-cisz-oktadecenoil)-3-sn-foszfatidil-S-szerin (loc. cit.) és l-n-hexadekanoil-2-(9-cisz-oktadecenoil)-3-sn-foszfatidil-kolin [előállítás Eibl H., Chem. and Physics of Lipids 26 (1980), 239 és Eibl. II., Angewandte Chemie 96 (1984), 247 szerint, tömegarány 3 :7]. Mindegyik keveréket az I. példa szerintivel analóg módon állítjuk elő. Az 1. és 2. keverék az 1 523 965 sz. brit szabadalmi leírásból ismert. A 3. készítmény a találmány szerinti új termék. A liposzóma-keverékeket a következőképpen állítjuk elő: A lipidek 1 ml térfogatú kloroformos oldatát 15 ml-es fiolába mérjük be. Az oldószer eltávolítása után a lipidek vékony filmként lerakódnak a fiola falára. A maradék oldószer szobahőmérsékleten 15 óráig tartó elszívással távolítható el. A fiolát ezután nitrogén atmoszférában leforrasztjuk és —20 C hőmérsékleten tároljuk. A vizsgálandó liposzóma keverékeket ebből a filmrétegből állítjuk elő úgy, hogy a fiolát 50 °C hőmérsékletre melegítjük és 2,5 ml steril, kalcium-mentes, foszfát-pufferolt (pH 7,2— 7,4) sóoldatot fecskendezünk be steril fecskendővel, majd a filmet tíz percen át clőduzz.asztjuk úgy, hogy szobahőmérsékleten állni hagyjuk, 10 percen át pedig szabványds laboratóriumi rázókészülékben való rázatással (Vortex, hatos tárcsa beáliítás) diszpergáljuk. II. Akut toxieitás egerekben - Eljárás Akut intravénás toxieitási kísérleteket végzünk 17-24 g-os Tif:MACf (SPF) egereken. Valamennyi 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
