198077. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált amino-alkanoil-amino-alkil-foszfonátok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
13 198 077 14 í) l-[(S)-6-[[(Benzil-oxi}-karbonil\-amíno]-2-hídroxí- 1 oxo-hex il ]-L -proli n -benz il-ész tér 1,4 g (5,0 minői) (S)-6-[[(benzil-oxi)-karbonil]amino]-2-hidroxi-hexánsav, 1,33 g (5,5 minői) L-prolin-benzil-észter-monohidroklorid,0,76 ml (5,5 mmól) trietil-amin és 15 ml vízmentes tctrahidrofurdn elegy éhez 0 °C-on (jeges fürdő) 0,71 g (5,26 mmól) 1-hidroxi-benzo-triazol-hidrátot és 1,08 g (5,23 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk. Az elegyet ezután 3 órán át 0 °C-on, majd további 1 óra hosszat szobahőmérsékleten kevertetjük, és végül szűrjük. A szűrletct elil-acctáttal hígítjuk, majd egymás után mossuk 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és telített nátriumklorid-oldattal, majd nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradékot felvesszük szén-tetrakloridban és megszűrjük, hogy ezáltal a diciklohexil-karbamid utolsó nyomaitól is megszabadítsuk a terméket, majd végül bepároljuk az oldatot. A nyersterméket 35 g Whatman LPS-1 szilikagélen flash-kromatográfiával tisztítjuk, etil-acetát és hexán 2 :1 arányú elegyét alkalmazva eluensként A tiszta l-[(S)-6- [[(benzil-oxi)-karbonil]-amino]-2-hidroxi-l-oxo-hexil]L-prolin-benzil-észter színtelen, nagyon sűrű olaj, amelynek tömege 2,24 g. Szilikagél vékonyrétegen metanol-metilén-diklorid 5 :95 oldószereleggyel kromatolgrafálva az. anyag Rf értéke 0,36. j) l-[fSJ-6-[[(Benzil-oxi)-karbonií]-amino)-2-[{[l[[(S)-6-[[(benzil-oxij-karbonil]-amino]-2-{ciklobutánkarbonil-amino)-l-oxo-hexil]-amino]-2-feniletil]-hidroxi-foszfinil\-oxi]-I-oxc-hexil]-L-prolinbenzil-észter 500 mg (0,91 mmól) [l-[[N6-[(benzil-oxi)-karbonil]-N2-ciklobutánkarbonil-L-lizil]-amino]-2-fenil-etil]foszfonsavat és 426 g (0,91 mmól) 1— [(S)-6-[[(benziloxi)-karbonil]-amino]-2-hidroxi-l-oxo-hcxil]-L-prolinbenzil-észtert 10 ml piridinben oldunk, hozzáadunk 224 mg (1,09 mmól) diciklohexil-karbodiimidet, és az elegyet szobahőmérsékleten éjszakán át kevertetjük. Másnap vákuumban bepároljuk, majd a maradékot etil-acetát és 5%-os kálium-hidrogén-szulfátoldat keverékére öntjük, a diciklohexil-karbamidot kiszűrjük és az etil-acetátos fázist elválasztva, valamint ezt követően nátrium-klorid-oldattal mosva és nátrium-szulfáton szárítva bepároljuk. A kapott l-[(S)-6-[[(benzil-oxi)-karbonil]-amino]-2-[[[l-[[(S)-6- [[(benzil-oxi)-karbonil]-amino]-2-(ciklobutánkarbonilarnino)-!-oxo-hcxil]-amino]-2-fenil-etil]-hidroxi-foszfinilj-oxi] -l-oxo-hexil]-L-prolin-bcuzil-és/.ter nyers állapotban egy olaj, amelynek vékonyrétegen kromatografálva (szilikagél; metilén-dikloríd-metanol-ecetsav = 20 :1 :1) az Rf értéke 0,33. k) l-[(S)-6-Ammo-2-[[[l-[[(S)-6-amino-2-{ciklobiitánkarbonil-amino}-l-oxo-}iexil]-amino)-2-fenil-etií]hidroxi-foszfinil]-oxi]-l-oxo-licxil\-L-prolin A j) pont szerint előállított benzil-észtert 50 ml metanolban feloldjuk, és 120 mg 20%-os csontszenes palládium-hidroxid katalizátor jelenlétében, légköri nyomáson, hídrogéngáz atmoszférában éjszakán át kevertetjük. Az oldatot ezután celiten átszűrjük, bepároljuk, és a maradék olajat HP—20 adszorbensen kromatografáljuk, amelynek során acetonitril és víz 1 :1 arányú elegyével grádicnsclúciót alkalmazunk. Azokat a frakciókat, amelyek a terméket tartalmazzák egyesítjük és bcpároljuk, az üvegszerű maradékot vízben feloldjuk és Miüípor szűrőn átszűrjük, majd végül liofilizáljuk. Az így kapott 253 mg szilárd anyag 1- [(S)-6-amino-2-[[[l-[[(S)-6-amino-2-(ciklobutánkarbonil-amino)-l-oxo-hexil]-amino]-2-fenil-etil]-hidroxifoszfinil]-oxi]-l-oxo-hexil]-L-prolin, amely 200 °C hőmérsékleten üvegszerfi anyaggá alakul. lajD= —18,5° (c = 1,0; metanol). Vékonyrétegen kromatografálva (szilikagél; izopropanol-ammónium-hidroxi-víz = 7:2:1) Rf = 0,17 és 0,21. 3. példa l-[fS)-2-[[[l-[[(S)-6-Amino-2-(cik!obutánkarbonilamino)-l-oxo-hexil]-amino]-2-fenil-etil\-hidroxifoszfinií]-oxi]-l-oxo-propU)-L-prolin a) l-[(S)-2-[[[l-[[{Benzil-oxi)-karbonil]-amino]-2-feniletil]-hidroxi-foszfiitil]-oxi]-loxo-propil]-L-prolinbenzil-észter 3,19 g (10 mmól), a 2. példa a) pontjában leírtak szerint előállított [l-[[(benzil-oxi)-karbonil]-amino]-2- fenil-etilj-foszfmsav, 2,77 g (10 mmól) l-[(S)-2- hidroxi-l-oxo-propil]-L-prolin-benzil-észtcr és 30 ml metilén-diklorid elegyéhez argongáz atmoszférában 2,2 g (11 mmól) diciklohexil-karbodiimidet és 300mg (dimetil-amino)-piridint adunk. Az elegyet 4 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük, majd további 1,5 g diciklohexil-karbodiimidet és 100 mg (dimetil-amino)piridint adunk hozzá. Újabb 2 óra kevertetés után a keletkezett diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, a szűrlethez etil-acetátot adunk, és az oldatot mossuk 5 %-os kálium-lúdrogén-szulfát-oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, és végül nátrium-klorid-oldattal. Ezután ismét megszűrjük az oldatot, hogy eltávolítsuk a maradék diciklohexil-karbamidot, majd vákuumban bepároljuk, amikor is egy olajat kapunk. Az olajat 15 ml 1,4-dioxánban oldjuk és hozzáadjuk 2,34 g nátrium-metaperjodát 15 ml vízzel készített oldatát. Az elegyet 4 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük, majd etil-acetát és híg sav keverékére öntjük, elválasztjuk és az etil-acetátos oldatot híg nátrium-lridrogén-szulfU-oldattal összerázva elszíntelenítjük, nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátriumszulfáton szárítjuk, végül bepároljuk. A kapott olajat a lehető legkisebb mennyiségű etil-acetátban feloldjuk, hozzáadunk 1,8 g amino-adamantánt 50 ml dietü-éterben oldva, és a kivált csapadékot többször eldörzsöljük hexánnal. A csapadékot ezután etilacetát és 1 N sósav keverékével összerázzuk, az etilacetátos oldatot elválasztjuk és mossuk nátriumklorid-oldattal, majd nátrium-szulfáton szárítva és vákuumban bepárolva jutunk a kívánt termékhez. Az etil-acetát és dietil-éter keverékéből álló anyalúgből, valamint a hexános mosófolyadékból további 5 1C 15 20 25 30 36 49 45 50 55 C0 65 8
