198021. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antiallergiás és antitrombotikus hatású heterociklusos vegyületek előállítására
1 2 198.021 Az eredmények azt mutatják, hogy a találmány szerint előállított vegyületek jelentős in vivő hatást fejtenek ki LTD4 -gyei kiváltott hörgőösszehúzódással 5 szemben. 6. példa A példában a találmány szerint előállított vegyületek in vivo hatásának vizsgálatát mutatjuk be endogén mediátorok által kiváltott hörgőgörcs gátlá- 1U sára tengeri malacokon. A vizsgálatot a következő módon végezzük: 250 350 g testtömegű Hartley törzsbe tartozó hím tengerimalacokat 10 mg i.p. beadott csirke ovalbuminnal (DA) érzékenyítünk a kísérlet 1. és 3. nap- -jg ján, és a vizságlatot a 26. napon kezdjük meg^ Az állatokat 50 mg/kg i.p. pentobarbital-nátriummjal anesztctizáljuk, kétoldali vagotómiát végzünk, a nyald vénába a gyógyszer-injekció beadására, a nyakj artériába a vérnyomás nyomon követésére kanüjt helyezünk. A légcsőbe is kanült helyezünk a mesterséges 20 lélegeztetés' biztosítására, amit kis méretű ’ Starling szivattyúval végzünk, valamint a légzéstérfogat-változás indirekt mérésére, amint azt a leírás más helyén ismertettünk. A spontán légzés felfüggesztésére az állatoknak 2 mg/kg szukcinil-kloínt adunk be intravénásán. A 9. percben 10 mg/kg, triszpufferben lévő 25 indometacint adunk be intravénásán - az irjdometacin cikloogineázgátló hatású -, hogy az arachidonsav metabolizmust a üpogenáz útra tereljük. Egy perc múlva 1,0 mg/kg, sóoldatban lévő klór-feniramint adunk be intravénásán, ezzel az anafilaxiás hörgőöszszehúzódás hisztainin-komponensét legyengítjük. A vizsgálandó anyagot propilén-glikolban, poUetilénglikolban vagy sóoldatban oldott állapotban intraduodenálisan, gyomorba vagy aeroszolként adjuk be az antigén provokáció előtt 2 vagy 10 perccel. Anafilaxiás hörgőösszehúzódást váltunk ki aeroszol for-' májában lévő 1%-os DA belélegeztetésével vagy sóoldatban oldott DA 0,1— 0,3 mgfkg dózsiban intravénásán való beadásával. A kontroll állatokban a vizsgálati anyag helyett l.d. 2 ml/kg oldószert adunk, vagy a megfelelő aeroszolt adjuk. A légzéstérfogat változását kalibrált dugattyúval határozzuk meg, a dugattyú elmozdulását lineáris transzduktor útján Beckman Dynograph regisztrálókészülékre visszük és azon regisztráljuk. A legnagyobb hörgőösszehúzódási térfogatot a kísérlet végén a légcső rögzítésének feoldásával határozzuk meg. Az 1., 3. és 5. perces átfolyási térfogatokat a regisztrátum görbéből olvassuk el. A térfogat átfolyás görbe alatti területet (AUC) az 1, 3 és 5 perces átfolyási értékek alkalmazásával becsüljük meg, és a maximális átfolyás AUC %-ában kifejezve adjuk meg (/1 / egyenlet).. % max AUC = 3(1 perc)* 4(3 perc)* 2(5 perc) 10(max) x 100 1/ A szerek hatását a megfelelő kontroll állatokon kapott % max AUC érték %-os gátlásával jellemezzük C/2/ egyenlet). % max AUC kontroll - % max AUC kezelt % gátlás = ------------------------------------------------------x 100 2/ % max AUC kontroll A statisztikus szigniflkancia megállapítására párosításán adatok Student-t-próbáját használjuk. Felvesszük a dózis-hatás görbét és a regressziós egyenesből interpoláljuk az EDJ0 értéket. A találmány szerint előállított vegyületekkel. a fenti vizsgálatban kapott eredményeket — a hörgőgörcs kiváltására LTF4-t használva — a IV. táblázatban ismertetjük. IV. Táblázat A vegyületeket a provokáló ovalbumin intravénás beadása előtt 10 perccel adjuk be. Az előállítás Dózis (mg/kg) % Gátlás ICS0 példa száma (gyomorba adva) mg/kg) 2 25 97 0,6 Az eredmények azt mutatják, hogy a találmány szerint előállított vegyületek igen jelentős in vivo aktivitással bírnak az ovalbuminnal kiváltott, az arachidonsav lipoxigenáz oxidációs termékei által közvetített hörgőgörcs gátlásában. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) általános képletíí vegyületek előállítására a képletben- X jelentése nitrogénatom vagy metíncsoport — W jelentése kénatom, ha n=0 és metincsoport, ha n~I, 50 v- n értéke 0 vagy 1, R3 jelentése 16 szénatomos alkilcsoport, vagy 1-4 szénatomos perfluor-alkil -csoport azzal a megkötéssel, hogy ha n=0, R3 jelentése 1)6 szénatomos alkilcsoporttól eltérő, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános 55 képletű anilinszármazékot - a képletben X és W jelentése és n értéke az tárgyi körben megadott - egy R3S020H általános képletű szulfonsav reakdóképesszármazékával R3 jelentése a tárgyi körben megadott — reagáltatunk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal j e 1 -60 1 e m e z v e , hogy egv (II) általános képletű anilin-7
