198010. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírusellenes hatású piridazinaminok, és hatóanyagként a fenti vegyületeket tart gyógyászati készítmények előállítására
1 2 Az (I) általános képletű vegyületek antivirális hatást mutatnak, amely különösen előnyös terápiás indexszel párosul, azaz a vegyületek sejt-toxicitása elfogadhatóan alacsony, ugyanakkor a kívánt antivirális hatás alacsony dózisokkal elérhető. Az (I) általános képletű vegyületek antivirális hatásának vizsgálatát az alább ismertetett eljárás szerint végezzük. Rhinovirus cítopatikus hatásának gátlása Rhinovírus-szenzitív Hela-sejteket 5% inaktivált magzati boíjúszérummal és nem-esszenciális aminosavakkal kiegészített minimál-táptalajra (MÉM) oltunk. A sejteket egy éjszakán át 37°C-on 5% szén-dioxidot tartalmazó légtérben inkubáljuk. 24 óra elteltével, a sejteket a vizsgálandó vegyületek oldatával kezeljük, a vegyületeket 1 térfogatrész dimetil-szulfoxidot és 7 térfogatrész 10% inaktivált magzati boíjúszérummal kiegészített MEM-táptalajt tartalmazó elegyben oldjuk. Kontrollként a sejteket a fenti oldószerrel kezeljük. Mind az oldószerrel, mind a vizsgálandó vegyülettel kezelt sejteket 3 órán át 37°C-on inkubáljuk, majd humán rhinovírust tartalmazó standard inokulumot adunk hozzá. Ezt követően a sejteket 33öC-on inkubáljuk, miközben a rhínovírus a Hela sejtekben szaporodik. Az eredményt akkor olvassuk le, mikor a kontroliban (oldószerrel és vírussal kezelt sejtek) 100%-os teljes citopatikus hatást észlelünk. Az antivirális hatás mértékeként azt a legalacsonyabb koncentrációt adjuk meg (jig/ml-ben kifejezve), amely a kontroliban mutatkozó citopatikus hatást legalább 75%-ban gátolja. Az (I) általános képletű vegyületek egy része az antivirális hatáson kívül analgetikus és köhögéscsillapító hatással is rendelkezik, a fenti hatásokat például az (Arzneim. Forsch. 25, 1505—1509 /1975/) és az (Arzneim. Forsch. 15, 107-117/1965/) Irodalmi helyeken ismertetett „Tail Withdrawal Reflex” és „Writhing Test’’ vizsgálatokkal mutathatjuk ki. Farmakológiaí tulajdpnságaik következtében az (I) általános képletű vegyületeket és savaddlciós sóikat vírusos megbetegedések kezelésére használhatjuk. Az (I) általános Jcépletű vegyületeket célszerűen gyógyszerkészítmények formájában adjuk a kezelendő alanynak. A találmány szerinti eljárás értelmében a gyógyászati készítményeket úgy állítjuk elő, hogy a hatóanyag hatásos mennyiségét - szabad bázis vagy savaddíciós só Formájában — a gyógyszerkészítésben szokásosan használt hordozó- és/vagy segédanyagokkal összekeverjük, és gyógyszerkészítménnyé formáljuk. Az alkalmazott hordozóanyag a készítmény formájától függően változhat. A gyógyszerkészítményeket előnyösen orális, rek: -tálfs, perkután vagy parenterális alkalmazásra alkalmas egységdózis formában állítjuk elő. Az orális alkalmazásra szánt dózisformák előállítására például bármely szokásosan használt hordozóanyag alkalmas, így víz, glikolok, olajok, alkoholok és hasonló anyagok a cseppfolyós orális készítmények - például szuszpenziók, szirupok, elixírek, és oldatok míg szilárd hordozóanyagokat, így keményítők, cukrok, kaolin, sikosítószerek, kötőanyagok, szétesést elősegítő szerek és hasonló anyagok a porok, pirulák, kapszulák és tabletták előállítására. Egyszerű alkalmazása miatt legelőnyösebb orális dózisegység forma a kapszula és a tabletta, ezek előállítására természetesen szilárd hordozóanyagokat használunk. Parenterális alkalmazásra szánt készítmény esetén a hordozóanyag rendszerint steril víz, legalábbis fő tömegében, de természetesen a készítmény egyéb komponenseket, például oldódást elősegítő anyagot is tartalmazhat. Az injekciós oldatokban a hordozóanyag például sóoldat, glükózoldat, vagy a két oldat elegye lehet. Injekciós szuszpenziókat is készíthetünk, ezesetben megfelelő cseppfolyós hordozóanyagot, szuszpendáfőszert és egyéb hasonló anyagokat használunk. A perkután alkalmazásra szánt készítményekben a hordozóanyag rendszerint egy penetrációt elősegítő szert és/vagy megfelelő nedvesítőszert is tartalmaz, adott esetben kis mennyiségű, bőrre nem ártalmas egyéb adalékanyaggal kombinálva. A fenti adalékanyagok a bőrön áti alkalmazást segíthetik elő, és/vagy a kívánt készítmény előállítását könnyítik meg. A fenti készítményeket különféle módokon alkalmazhatjuk, például bőrre tapasztott lemezke, csepp vagy kenőcs formájában. A vizes készítmények előállítására a szabad bázis formánál előnyösebbek a (I) általános képletű vegyületek savaddíciós sói, nagyobb vízoídékonyságuk miatt. Az alkalmazás megkönnyítése és az egységes dozirozás biztosítására a gyógyszerkészítményeket előnyösen dózisegység formában állítjuk elő. Dózisegység alatt olyan fizikailag elkülönülő egységeket értünk, amelyek az egységes dozirozásra alkalmasak, minden egyes egység a kívánt terápiás hatás elérésére elegendő mennyiségű hatóanyagot tartalmaz, i megfelelő hordozó- és/vagy segédanyagok mellett. Dózisegység lehet például a tabletta (durva felületű, vagy bevonatos), kapszula, pirula, porcsomag, ostya, injekciós oldat vagy szuszpenzió, teáskanál, evőkanál vagy egyéb adagolási forma, és ezeknek többszöröse. Az (I) általános képletű vegyületek melegvérű idlatok vírusfertőzésének kezelésére alkalmazhatók, oly módon, hogy a kezelendő alanynak szisztémásán hatásos mennyiségű (1) általános képletű vegyületet, 'agy annak gyógyászatiig elfogadható savaddíciós sóját, sztereokémiái izomeijét vagy tautomeijét idagoljuk. A napi dózis 0,01 mg és 1 g között változhat, előnyösen 1 -500 mg lehet. Az antivirális hatású gyógyszerkészítmények az (I) általános képletű vegyületet, vagy annak savaddiciós sóját, sztereokémiái izomeijét vagy tautomer formáját tartalmazzák hatóanyagként, előnyösen oly módon, hogy a fenti vegyületeket antivirálísan hatásos mennyiségben szisztémásán adjuk a kezelendő alanynak. A találmány szerinti eljárással ennek megfelelően olyan gyógyszerkészítmények állíthatók elő, amelyek hatóanyagként egy (I) általános képletű vegyületet, vagy annak valamely gyógyászatiig elfogadható sóját, sztereokémiái izomeijét vagy tautomer formáját tartalmazzák. A fenti új vegyületek közül előnyösek azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében A jelentése (b-1) áhalános képletű csoport, és az utóbbi képletben R^"c jelentése adott esetben 14 szénatomos alkilcsoporttal, halogénatommal, 14 szénatomos alkoxicsoporttal, trifluor-metil-csoporttal vagy hidroxilcsoporttal mono-, di- vagy tri-198 010 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
