197945. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új peptid antibiotikumok és ilyen hatóanyagot tartalmazó készítmények előállítására

197945

1

A találmány tárgya eljárás új peptid-típusú antibiotikumok és ezeket hatóanyagként tartalmazó, antimikrobiális és tumor-ellenes hatású gyógyszerkészítmények előállítására.

Különböző mikroorganizmusokat különítettünk el talajmintákból, ezeket szintetikus közegben tenyésztettük és azt találtuk, hogy e mikroorganizmusok antibiotikus aktivitást mutatnak. Így különösen egy Görögországból, az athéni Partenon környékéről származó talajmintából egy új, K481-B101 jelzésű baktériumfajtát sikerült elkülönítenünk, amely antibiotikus aktivitású peptidek elegyét termeli.

A találmány elsődleges célkitűzése olyan alkalmas módszer kidolgozása volt, amellyel az említett mikroorganizmus által termelt, gombaellenes és tumorellenes hatást mutató antibiotikumok előállíthatok és kinyerhetők. A találmány körébe tartozik továbbá az említett új peptid-típusú antibiotikumokat hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására is.

A találmány szerinti eljárással előállítható új peptid-típusú antibiotikum a csatolt rajz szerinti (A) általános képlettel jellemezhető; ebben a képletben R egy CH3-(CH2)6- CH3-(CH2)4-CH=CH-(CH2)2- vagy CH3- -(CH2)8-csoportot képvisel.

Az (A) általános képletnek megfelelő új antibiotikus hatású vegyületeket — ahol R a fenti jelentésű — a találmány értelmében oly módon állítjuk elő, hogy az általunk talált Polyangium brachysporum nova species mikroorganizmust asszimilálható szén- és nitrogénforrást tartalmazó tápközegben, aerob körülmények között tenyésztjük, majd a termelt micéliumot elkülönítjük a tápközegtől és a mikroorganizmus által termelt hatóanyagot kinyerjük a tápközegből.

A találmány szerinti új antibiotikus hatású vegyületek szintetikus úton történő előállításához kiindulási anyagként előnyösen alkalmazhatók a csatolt rajz szerinti (XI) és

(VIII) képletéi vegyületek.

Az új K481-BI01 jelű mikroorganizmus morfológiai, tenyésztési és fiziológiai jellemzőit a McCurdy Jr.: Studies on the Taxonomy of the Myxobacterales, II, Polyangium and the demies of the Sorangiaceae; Inti. J. Syst. Bacteriol. 20, 283—296 (1970); H. Reichenbach: Nannocystis exedens gen. nov., sp. nov., a new myxobacterium of the family Sorangiaceae. Arch. Mikrobiol. 70, 119—138 (1970);

P. Crhistensen és F. D. Cook: Lysobacter, a new Genus of nonfruiting, gliding bacteria with a high base ratio, Inti. J. Syst. Bacteriol. 28, 367—393 (1978); és P. Christensen: Synonymy of Flavobacterium pectinovorum Dorey with Cytophaga johnsonae Stanier, Inti. J. Syst. Bacteriol. 27, 122—132 (1977) közleményekben leírt módszerekkel állapítottuk meg. A mikroorganizmus fenntartása és tisztítása a J. E. Peterson: Isolation, cultivation 2

2

and maintenance of the myxobacteria. Methods in Microbiology 3B, 185—210 (1969), J. R. Norris & D. W. Ribbons, Academic Press (London and New York); és H. Reichenbach és M. Dworkin: The Order Mixobacteriales, The Prokaryotes, I. kötet, 328—355 (1981),

M. P. Starr etc. Springer-Verlag (Berlin, Heidelberg és New York) munkákban ismertetett módszerekkel történt. A mikroorganizmus taxonómiai helyzetét a Bergey’s Manual, 8 kia 1. 1974, és „The Prokaryotes" 1. kötet leírása szerint határoztuk meg.

Morfológiai adatok:

A morfológiai vizsgálatokhoz kaziton — Mgi_+ agar, kitin agar, élesztősejt agar és nyúltrágya agar tápközeget használtunk. A K481-B10! mikroorganizmus Gram-negatív, nem ostoros baktérium. Vegetatív sejtjei hengeresek, 0,6—0,8X2—10 (im méretűek, tompa lekerekített végekkel. A vegetatív sejtek hajlékony, lassan kúszó mozgást mutatnak az agrr-tápközeg nedves felületén vagy lágy agar közegben. A mixospórák világosan különbőznek a vegetatív sejtektől, oválisán vagy gönbalakúak, 0,6—0,8X0,6—1,5 pm méretűek, fénytörők vagy nem fénytörők és esetenként párosak. A K48.1-B101 mikroorganizmus a legtöbb agar-közegen nyeletlen sporangiumokat képez, amelyek beborítják a mixospórákat. A spórangiumok ovális, vagy gömb alakúak, vagy pedig párna alakot mutatnak, eléggé változatos méretűek 12X20—80X X120 pm nagyságúak, gyakran egy közös burkolat vagy ragacsos réteg köti össze őket, kettős körvonalúak és egyenként vagy csomókban (sori) fordulnak elő. A K481-B101 mikroorganizmus morfológiai adatait az I. táblázatban foglaltuk össze.

Tenyésztési jellemzők:

A K481-B101 mikroorganizmus a kaziton- Mg++ agáron (McCurdy, 1969) és élesztősejt-agaron (Christensen & Cook, 1978) mérsékelten fejlődik, a Bacto táp-agaron és Bacto szív infúziós agaron azonban csak csekély fej'ődést mutat. YP-lágy agaron (0,3% élesztőkivonat, 0,1% pepton, 0,01% nátrium-klorid, 0,3% agar, pH=6,6—6,8) gyökér- vagy tol szerű rajzok figyelhetők meg a kultúrán, ka::iton-Mg++ agaron azonban ilyenek nem láthatók. A telepek kaziton-Mg++ agaron koraié kúak, áttetszőek és halvány zöldes sárga színűek, gyengén bemaródnak vagy behatolnak a agarba. A tenyésztési jellemzőket a

2. táblázatban foglaltuk össze.

Fiziológiai jellemzők:

A K481-B101 mikroorganizmus a keménytőt, kitint, zselatint és kazeint hidrolizálja, a cellulózt és agart azonban nem. Az autoklávozott élesztősejteket megbontja, a Micrococcus luteus élő sejtjeit azonban nem. A K481-B101 mezofin jellegű és 2%-os nátrium-klorid-oldattal szemben érzékeny. A fiziológiai jellemzőket a 3. táblázat tartalmazza.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65