197943. lajstromszámú szabadalom • Eljárás optikailag aktív alfa-aril-alkánsavak előállítására biotechnológiai úton
197943 juk, majd hozzáadunk 2,92 g (R,S)-2-(4-izobu til-fenil)-propion sav-etoxi-karbon il-met il-észtert. Az elegyet 30°C-on 48 órán át keverjük, miközben a pH-értéket 0,5 mól/1 koncentrációjú vizes kálium-hidroxid-oldattal állandó értéken tartjuk. A termék elválasztását és vizsgálatát az 1. példában ismertetett módon végezzük. Az S (+) -2- (4-izobutil-fenil) -propionsav (konverzió 38%) optikai forgatóképessége [a]£° — = +53,2° (c=l, etanol), olvadáspontja 48°C. 4. példa 2-(6-Metoxi-2-naftil)-propionsav előállítása 100 ml 0,3 mól/1 koncentrációjú nátrium- hid rögén-f ősz f át-kálium-di hidrogén-foszfát pufferoldathoz 3,2 g 2- (6-metoxi-2-naftiI) -propionsav-ciano-metil-észtert és 500 mg 1. példa szerinti Candida cylindracea lipáz enzimet adunk. Az elegyet 32°C-on 52 órán át inten-1. táblázat 5 ziven keverjük. Vizsgálataink szerint az (R,S) -racém észter megfelelő S(-|-)-savvá alakulása 40%. A termék elválasztását és vizsgálatát az 5 1. példában ismertetett módon végezzük. A terméket aceton és hexán elegyéből kristályosítjuk. Olvadáspontja 154°C, [a]p° = = +65,14° (c= 1, kloroform). 10 5—10. példa Az 1. példában leírtak szerint járunk el, nátrium-hidrogén-foszf át-kálium-dihidrogén-foszfát pufferoldatot (pH 6,5) használunk, a reakcióhőmérséklet 32°C. A reaktánsokat és 15 reakcióidőt az 1. táblázatban ismertetjük. Az S( + )-savakat az 1. táblázatban ismertetett konverziókkal kapjuk, a konverziókat mind a racém (R,S)-észterre, mind az S( + )-észterre számítottuk. A kapott termékek optikai 20 tisztasága minden esetben nagyobb, mint 90%. 6 Példa Ili általános képletíf Racém / R , 5 / Candida Puffer-Reakció-R ,S-észter S/ + /race ;m észter / R , S / észten cylindracea oldat idő konverzió-észter száma lipáz enzim konverzió Ar R 'ej ■ /f/ /ml/ /óra/ /•/./ /%/ 5. /a/-CH=CH2 2 0,3 50 b 5 b8 96 6. /b/-CO-CH-j 3 0,2 100 30 35 68 7. /c/-CN 3 0,4 70 b2 áO 76 8. /d/-cooch3 A 0,4 100 28 30 59 9. /e/-CN 2 0,2 50 2b bl 92 10. /f/-ch2oc2h5 3 0,5 70 32 32 60 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás lényegében S( + )-izomer formában lévő a-aril-alkánsavak előállítására biotechnológiai úton, azzal jellemezve, hogy egy (1) általános képletü racém (R,S)-a-aril-alkánsav-észtert — a képletben R jelentése etini 1-, etenil-, ciano-, acetil-, (1—4 szénatomos)alkoxi-karbonil- vagy (1 —4 szénatomos) a Ikoxi-metil-csoport, Ar jelentése (II) vagy (III) általános képletü csoport, az utóbbi képletekben R’ jelentése 1—6 szénatomos egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoport, 2—4 szénatomos alkenilcsoport, fenilcsoport, fenoxicsoport vagy ketocsoporttal helyettesített dihidro-izoindolil-csoport, és R"’ jelentése 1—4 szénatomos alkilcsoport — egy Candida-nemzetségbe tartozó mikroorganizmus által termelt észterázzal aszimmetrikusan hidrolizálunk, majd az S( + )-formában lévő szabad savat az R(—)-formában lévő reagálatlan észtertől elválasztjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal 45 jellemezve, hogy Candida-észterázként Candida-cylindracea által termelt lipázt használunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy észterázként a mikroorga-50 nizmus sejtekben, vagy a tápfolyadékban, vagy azok extraktumában vagy koncentrátumában lévő enzimet használunk. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal 55 jellemezve, hogy az aszimmetrikus hidrolízist pH 5 és 9 közötti értéken játszatjuk le. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakcióhőmérsékletet 20 és 40°C között tartjuk. 60 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az (I) általános képletü racém észtert a reakcióelegyben 1 és 20 tömeg% közötti koncentrációban használjuk. 3 lap rajz képletekkel 4
