197929. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ciklikus dezprolin-vazopresszin vazopresszin-antagonista vegyületek és a fenti vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
L97929 ségen vannak — a fenti általános eljárással végezhetjük. Például feleslegben lévő alkálifém-[ferri-cianid]-ot- így kálium- vagy nátrium-[ferri-cianid]-ot — használhatunk, a (II) általános képletű köztiterméket megfelelő inert oldószerben — előnyösen vizes oldószerben — oldjuk, semleges pH-n, 7—7,5 körüli pH-értéken, és a hőmérsékletet szobahőmérsékleten, vagy még alacsonyabb értéken tartjuk, míg a reakció végbemegy. A reakcióelegyhez rövidszénláncú alkoholokat — például metanolt — is adhatunk. A lineáris peptid és az oxidálószer koncentrációja előnyösen alacsony, 0,01 mól/1 koncentrációjú oxidálószer néhány liter vizes oldatban elegendő 1—5 g (II) általános képletű dimerkaptovegyület (III) általános képletű ciklusos diszulfiddá alakítására, az 1, reakcióvázlatnak megfelelően. Egyéb enyhe oxidálószert is használhatunk amelynek oxidációs potenciálja közel azonos a ferri-cianidéval, hogy a fenti gyűrűzárást végrehajtsuk. Használhatunk például oxigént vagy jódot is. Szakember számára azonban nyilvánvaló, hogy bizonyos ciklizálási módszerek nem alkalmazhatók, ha a (II) általános képletű kiindulási anyagban a reakciót zavaró más reakcióképes csoportok is jelen vannak. A lineáris, merkaptocsoportot tartalmazó kiindulási anyag adott esetben szokásos védőcsoportokat is tartalmazhat a különböző aminosav-egységekben, vagy a merkaptocsoporton. Az előbbi esetben a védőcsoportokat a ciklizálási reakció befejeztével eltávolítjuk. ACM-SH védőcsoportok esetében a védőcsoportok eltávolítását és a ciklizálási is elvégezhetjük jóddal, vizes metanolban. Általában azonban szabad lineáris pepiidet ciklizálunk. Az (I) általános képletű ciklusos dezprolin-peptidet célszerűen úgy izoláljuk, hogy a vizes oxidációs reakcióelegyet megsavanyítjuk — például jégecettel —, majd a reakcióelegyet ioncserélő kromatográfiás oszlopon vezetjük át, például gyengén savas, akrilgyantás oszlopot használunk, savas elúcióval; vagy gélszűrést alkalmazunk, epiklórhidrinnel térhálósított dextránból előállított gyöngypolimer gélen. A találmány szerint úgy is eljárhatunk, hogy egy olyan (II) általános képletű vegyületet ciklizálunk, amelyben A és Z közül egy, vagy mindkét egység hiányzik. A kapott (III) általános képletű ciklusos pepiidet ezután egy vagy két reakciólépésben az A és Z jelentésére megadott védett aminosavakkal kondenzáljuk, külön-külön, vagy dipeptidként egy lépésben. A fenti molekulavég-kialakítási reakció körülményei megegyeznek a peptidkémiában szokásosan alkalmazott amid-előállítási reakciók körülményeivel, közelebbről, a karboxilcsopotján védett A és/vagy Z aminosavakat diciklo hexil-karbodiimid vagy 1-hidroxi-benzotriazol jelenlétében kapcsoljuk a 6-Cys-savval. A gyűrű aminosav-egységein vagy a végcsoport 3 aminosav-egységein adott esetben jelenlévő védőcsoporto(ka)t a szokásos módon eltávolítva (I) általános képletű terméket kapunk. A reakciókörülményeket úgy választjuk meg, hogy a Cys-egység racemizációját a lehető legkisebb mértékűre csökkentsük. A szabad vagy védett (II) általános képletű köztitermékeket célszerűen szilárd fázisú peptidszíntézissel állíthatjuk elő. Az amid-végtermékek — vagyis az olyan (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében A jelentése NH2 vagy GlyNH2 — előállítására a kereskedelmi forgalomban kapható benzhidril-amin hordozógyantát (BHR), a sav-végtermékek — vagyis az A helyén Gly vagy OH csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek — előállítására klór-metil hordozógyantát (CMR) használhatunk. A (II) általános képletű lineáris peptidek peptidláncát lépésenként építjük fel, a 7. vagy 8. egységből kiindulva, az 1. egység felé haladva. Minden egységet a peptidkémiában szokásos módon, az alábbiakban ismertetettek szerint védőcsoporttal védünk. A peptidlánc szintetizálását célszerűen Beckman 990 B típusú peptid-szintetizátorban végezhetjük, az egyes intermedier peptidek izolálása nélkül. Az eljárást részletesen a példákban ismertetjük. A hordozógyantán lévő lánchoz adott egyes aminosavakat a peptidkémiában szokásos módon védjük. Például az aminocsoportokat — különösen az a-helyzetben lévő aminocsoportokat — Boc védőcsoporttal; a Pap és Cys egységeken lévő merkaptocsoportokat benzil-tio-metil- etil-karbamoil-, adamantil-, terc-butil-, acetamido-metil-, tritil- vagy adott esetben helyettesített benzilcsoporttal; az Arg egységet nitro-, karbobenzoxi-, metilén-2-szulfonil- vagy toziicsoporttal; a Tyr és Lys egységet etil-oxi-karbonil- vagy adott esetben helyettesített karbobenzoxi-(Z) -csoporttal védjük. Védőcsoportként célszerűen könnyen eltávolítható csoportot használunk, azaz a terc-butoxi-karbonil-csoportot (Boc) savas kezeléssel, a benzil- vagy benziloxikarbonil-csoportot nátrium/cseppfolyós ammóniás vagy katalitikus hidrogénezéssel távolítjuk el. A védett lineáris peptid-köztiterméket a hordozógyantáról például vízzel elegyedő oldószerben végzett ammóniás kezeléssel lehasítjuk, majd a védőcsoportok eltávolítása céljából például nátrium/cseppfolyós ammóniás kezelésnek vetjük alá. A fenti eljárással állítjuk elő a lineáris oktapeptidek amidsZármazékait. A fenti két lépést még előnyösebben egyetlen lépésben hajtjuk végre úgy, hogy a gyantához kötött peptidet vízmentes hidrogén-fluoriddal kezeljük, megfelelő karbóniumion-megkötőszer — például anizol — jelenlétében. Az eljárás termékeként jó hozammal (II) általános képletű dezprolin-peptid köztiterméket kapunk. A találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletű vegyületek jelentős vazo-4 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
