197846. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírusfertőzések kezelésére alkalmas terápiás készítmény előállítására
197846 6 os pufferolt formalin-oldatban tároltuk. A kísérlet értékelését az SGPT enzim-aktivitás emelkedéséből és a hepatitis szövettani jelenlétéből értékeltük. Az 1. csoport állatainak transzamináz-aktivitása normál szinten maradt, és nem találtunk hepatitisre utaló szövettani elváltozást. A 2. csoportban az SGPT aktivitás 5 héten át a normális szinten maradt. Az 5. héten az átlagos SGPT aktivitás a normál érték 6-szorosára emelkedett, és szövettanilag kimutatható volt a hepatitis. A 6. héten az SGPT aktivitás a normál érték kétszerese volt, és mikroszkóppal még kimutatható volt a hepatitis, bár a gyulladás nem volt olyan súlyos, mint az 5. héten. A 7. héten az SGPT aktivitás és máj-biopszia ismét normális volt, és a vizsgálat során (10. hétig) normális is maradt. A 3. csoportban a hepatitis nem volt megfigyelhető, az SGPT aktivitás normális maradt, és szövettani elváltozást nem tapasztaltunk 10 héten át. A 4. csoport a 3. csoporttal azonos eredményeket mutatott. Az 5. csoport SGPT aktivitása az 5. hétig normális volt, ekkor azonban 5-szörös növekedés jelentkezett. A hepatitis jelenlétét szövettanilag is meg lehetett állapítani. A 6. héten az SGPT aktivitás a normális szint kétszeresére esett vissza, míg mikroszkópiásan a 2. csoporthoz hasonló hepatitis jelenléte volt megfigyelhető. A 7. héten az SGPT aktivitás a normális szintre csökkent, és sem ez, sem pedig a máj-biopszia morfológiája nem tért el a normálistól a 10. hét végéig. A kísérlet után az állatokat felboncoltuk, és egyetlen állatnál sem volt megfigyelhető patológiás elváltozás. Ennek során a máj, tüdő, vese, lép és agy szöveteit vizsgáltuk mikroszkóp alatt. Megjegyzendő, hogy az SGOT enzim-aktivitás a kísérlet során egy esetben sem mutatott lényeges változást. Ugyanakkor, a hepatitis szempontjából az SGPT enzim tekinthető a legérzékenyebb megfigyelési módszernek. 2. példa A találmány szerinti készítmény hatását vizsgáltuk a veszettség vírusa ellen egereken. Az állatokat két csoportba osztottuk, és az egyik csoportot Gumboro vakcina 0,5 ml-ével kezeltük intraperitoneálisan; három nap elteltével 20 állatot és a kezeletlen csoportból ugyancsak 20 állatot patogénként veszettség vakcinával (RV) inokuláltunk intracerebrálisan, 0,03 ml egyszeri dózissal. Az inokulálást a vírus 5 különböző hígításával (10-1 —10~5) végeztük, mindegyik hígítást 4—4 állatnak adva. A kezelt csoportok 5—5 állata vakcinakontrollként, a kezeletlen csoport 5 állata pedig abszoldt kontrollként szolgált. Az ál5 latokat 25 napon át figyeltük meg, és megállapítottuk az elhullás értékét. A kísérlet során az RV a kontroll állatok 50%-át pusztította el. Ezt az értéket vettük 5 a viszonylagos elhulási gyakoriság (RDF) egységének (1,0). A kísérlet során az ABuV vakcina az RDF-értékeket 0,5-re csökkentette, ugyanakkor a fertőzés lefolyását nem befolyásolta a nem-védett állatokon. 10 3. példa 4 napos, speciálisan patogén-mentes csirkéket inokuláltunk patogén szerként virulens Rous szarkóma vírust (RSV) alkalmazva 15 0,3 ml egyszeri dózissal, a vírus I0~3’7 hígításával, a jobb szárny humororadiális tájékába adagolva. A vakcinákat egyszeri dózisban adagoltuk, 7 nappal az RSV fertőzés előtt. Az 1. csoport 15 nem-fertőzött állatból állt 20 (abszolút kontroll), a 2. csoport 15 állatát RSV-vel inokuláltuk (virulens vírus kontroll). A 3. csoport 24 állatát intramuszkulárísan ABuV vakcinával oltottuk be, majd 12 állatot vakcina-kontrollként tartottunk, és 12-nek 25 7 nap elteltével RSV dózist adtunk. Az állatokat 5 héten át megfigyelés alatt tartottuk. A kísérlet során úgy találtuk, hogy az ABuV vakcina jelentős védőhatást mutatott Rous szarkóma vírus ellen. Az RSV fertőzés RDF 30 értékét 1-nek véve, az ABuV esetén 0,25 volt. A fenti kísérletekből megállapíthatjuk, hogy a találmány szerint előállított készítmények védő-, illetve terápiás hatást mutatnak a legkülönbözőbb vírusok által okozott 35 fertőzések ellen. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás terápiás készítmény előállításá- 40 ra, azzal jellemezve, hogy ismert módon előállított, előnyösen csirkeembrióból készített — fibroblaszt szövettenyészetben elszaporított, illetve előkeltetett tojásokban elszaporitott, majd az embriók feldolgozásával nyert, le-45 gyengített Gumboro vírust legalább egy gyógyászatiig elfogadható hordozóanyaggal összekeverjük, és vírusfertőzések — mégpedig hepatitis, vírusos eredetű daganatos megbetegedések, illetve veszettség — elleni készít- 50 ménnyé alakítjuk. (Elsőbbsége: 1984.07.02.) 2. Eljárás terápiás készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy ismert módon előállított, előnyösen primer vagy szekun-55 der — csirkeembrióbóí készített — fibroblaszt szövettenyészetben elszaporított, majd az embriók feldolgozásával nyert, legyengített Gumboro vírust legalább egy gyógyászatilag elfogadható hordozóanyaggal összekever- QQ jük, és hepatitis elleni készítménnyé alakítjuk. (Elsőbbsége: 1983.10.19.) Rajz nélkül 4
