197772. lajstromszámú szabadalom • Mikrobiológiai eljárás új, streptogramin-típusú antibiotikumok és ezeket tartalmazó takarmányadalékok előállítáásra
197772 A fenti összetételű közeg 280 l-jét 390 liter térfogatú fermentorba töltjük és 28 percen keresztül direkt és indirekt gőzzel 121°C- on sterilezzük. A fermentort hűtjük, majd az oltótenyészet második lépésének 7 tf%-nyi mennyiségével oltjuk. A fermentor tartalmát 27°C ± l°C-on 100—120 perc-1 fordulatszámú keverővei végzett keverés mellett 40— 44 órán keresztül fermentáljuk, a levegőzte-15 tés 170 liter/perc. 40—44 óra fermentálás után az antibiotikum-koncentráció 40—60 mg/ /l, és a tenyészlé pH-értéke 6,5—7,0. A tenyészetet centrifugáljuk, micélium 5 és szürlet külön kerül feldolgozásra a mellékelt I. szemléltető tábla szerint. A kinyert antibiotikumok hozzávetőleges összetétele (százalékban) az alábbi: 16 neoviridogrizen g r i v id omic in grizeoviridin I 0,02 II III IV I II III 2 0,01 95,6 0,07 0,1 0,2 2,0 * Az I-IV. neoviridogrizein fizikai állandóit a példare^sz végén közöljük. ** A grividomicin I, II, III fizikai állandói a leíró részben megadottak. Az I-, II- és III-grividomicin homogenitását Kieselgélen 7,5% metanolt tartalmazó kloroformmal készített vékonyréteg-kromatogramjuk alapján, valamint nagynyomású folyadékkromatgráfiás módszerrel (LiChrosorb(K) RP-18, acetonitril:25 mmólos ammónium-acetát:ecetsav = 150:100:3) vizsgáljuk. 3. példa Streptomyces sp. Y-8240155 fermentálása antibiotikum komplex előállítása céljából A 2. példa szerint járunk el azzal a különbséggel, hogy az alábbi tápközegeket alkalmazzuk. Az agar táptalaj összetétele oldható keményítő 10 0 g K2HP04 1,0 g MgS04.7H20 1,0 g NaCI 1,0 g (NH4)2S04 2,0 g CaC03 2,0 g FeS04.7H20 0,1 mg MnCl2.4H20 0,1 mg ZnS04.7H20 0,1 mg agar 15,0 g desztillált víz 1 liter pH 7,2 A termelő közeg összetétele glükóz 20,0 g szójaliszt 10,0 g CaC03 0,2 g C0C12.6H20 0,1 mg desztillált víz 1 liter PH 7,0 A tenyészetet 40—44 órán át fermentáljuk. A feldolgozást a 2. példa szerint végezzük. 4. példa A 2. példa szerint járunk el, az alábbi eltérésekkel. 25 30 35 40 45 Az oltóanyag tápközegének összetétele keményítő 20,0 g szójaliszt 25,0 g glükóz 5,0 g K2HP04 1,0 g MgS04.7H20 0,5 g pepton 1,0 g CaCl2 3,0 g NaCI 3,0 g desztillált víz 1 liter pH 7,0 A termelő közeg összetétele dextrin 20,0 g szójaliszt 10,0 g élesztőkivonat 1,0 g FeS04.7H20 0,1 g desztillált víz 1 liter pH 7,0 A fermentálás végén (44—48 óra) az antibiotikum-koncentráció 40—60 mg/1, a tenyészlé pH-ja 6,8 és a micélium mennyisége (nedvesen) 8 tf%. A micéliumot centrifugálással elválasztjuk. A feldolgozás a csatolt II. szemléltető tábla szerint történik. Az antibiotikum-komplex összetétele az alábbi: leoviridogrizeinek grividomicinek 11 IV I II III 0,1% 90,2% 0,3 3,3% 6,1% A komplexben sem grizeoviridin, sem I- és ,-g Ill-neoviridogrizein nem volt kimutatható. 5. példa 1V-NVG és I-, II- és III-grividomicin 95:5 arányú antibiotikum-keverékét etetési kísérlet keretében 180 db hímnemű naposcsibénél alkalmaztuk. A csibék egynaposak voltak, átlagos kezdeti tömegük 39,6 g volt. öt csoportot képeztünk, mindegyikben 36 csibével. Az etetési kísérletet 42 napon át folytattuk, az eredményeket az alábbi táblázatban ad- 65 juk meg. 9
