197768. lajstromszámú szabadalom • Eljárás TAN-749 antibiotikumok, és hatóanyagként ezen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 197768 2 A találmány tárgya eljárás az új, TAN-749 jelölésű antibiotikumok (a továbbiakban rövidítve TAN-749) és hatóanyagként a fenti vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. A TAN-749 baktériumellenes hatása következtében gyógyszerkészítmények hatóanyagaként baktériális fertőzések kezelésére használható. A TAN-749A és C és TAN-749B és D a C15H27N503, illetve C16H29N503 összegképlettel jellemezhető. Hasonló összegképletű antibiotikum a leucilnegamicin (C|5H31 N505), amelyet a Streptomyces nemzetségbe tartozó mikroorganizmus termel [The Journal of Antibiotics, 24, 732 (1971)1. Az antibiotikumokat alkalmazó terápia fejlődésének eredményeként a legtöbb bakteriális eredetű betegség gyógyítható, mégis vannak jelentős problémák a fertőző betegségek gyógyításának területén. így a hagyományos antibiotikumokkal végzett, túl hosszú időn át tartó, vagy túl nagy dózisokat alkalmazó gyógykezelés megváltoztatja a kórokozó baktérium-flórát (baktériumok kicserélődése), vagy gyógyszer-rezisztens baktériumok megjelenéséhez vezet (gyógyszer-rezisztencia megjelenése) aminek következtében a betegségek száma növekszik, és az autoimmunitással nem rendelkező betegek számára új terápeutikumok szükségesek. Az új szerkezettel és ezáltal új biológiai aktivitással rendelkező antibiotikumok, vagy az ezek előállításához felhasználható új köztitermékek kutatása szükséges e probléma megoldásához. Űj antibiotikumok feltalálására irányuló kutatásaink során a talajból számos baktériumtörzset izoláltunk, majd ezeket szétválasztottuk és antibiotikum-tertnelés szempontjából megvizsgáltuk. Azt tapasztaltuk, hogy néhány mikroorganizmus új antibiotikumot termel. Ezek a mikroorganizmusok a Pseudomonas nemzetségbe tartoznak, és képesek Gram-pozitív és Gram-negativ baktériumok — beleértve a gyógyszer-rezisztens törzseket is — elleni hatással rendelkező antibiotikumot termelni és azt a tenyésztés során a tenyészetben felhalmozni. A fenti antibiotikumot elválasztottuk és fizikai, kémiai és biológiai tulajdonságai alapján megállapítottuk, hogy az új antibiotikum; TAN-749-nek neveztük el. A TAN-749 négy komponensből áll, ezeket TAN749A, B, C, illetve D-nek nevezzük. A leírásban TAN-749 alatt a TAN-749A, B, C vagy D antibiotikumot, vagy ezek elegyeit értjük. A fenti eredmények alapján további vizsgálatokat végeztünk a találmány tökéletesítése céljából. A találmány tárgya tehát eljárás a TAN- 749A, B, C és D antibiotikumok, és ezek sayaddíciós sói előállítására, oly módon, hogy a Pseudomonsas nemzetségbe tartozó, TAN- 749 A, B, C vagy D antibiotikumok, vagy ezek elegyei termelésére képes mikroorganizmuso2 kát tápközegben tenyésztünk, majd a tápközegben felhalmozódott TAN-749A, B, C vagy D antibiotikumot, vagy ezek elegyét a tápközegből kinyerjük. A találmány tárgya továbbá eljárás bakteriális fertőzések kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállítására, oly módon, hogy a TAN-749A, B, C vagy D antibiotikum, vagy azok elegyeinek gyógyászatilag hatásos mennyiségét a gyógyszerkészítésben szokásosan használt hordozó- és/vagy egyéb segédanyagokkal összekeverjük és gyógyászati készítménnyé formáljuk. A találmány szerinti eljárásban TAN-749 antibiotikumot termelő mikroorganizmusként a Pseudomonas nemzetségbe tartozó, TAN- 749 termelésre képes mikroorganizmust használhatjuk, vagyis Pseudomonas fluorescenst, közelebbről, a Pseudomonas fluorescens YK- 437 törzset (melyet a továbbiakban YK-437- nek nevezünk röviden), amelyet a Shirouma hegységben (Nagano Prefecture, Japán) gyűjtött növényből izoláltunk. Az YK-437 törzs az alábbi bakteriológiai tulajdonságokkal rendelkezik. (a) Morfológia A morfológiai tulajdonságokat ferde tápaga ron, 24°C-on 5 napon át végzett inkubálás után vizsgáljuk. A sejt formája és mérete: pálcika, 0,5— 1,0 pmXl,5—4 (im Mozgékonyság: megfigyelhető (ostoros) Spóraképzés: nincs Gram-festés: negatív Savállóság: nem saválló (b) Szaporodás különféle tápközegekben A szaporodást különféle tápközegekben 24°C-on 1 —14 napon át figyeljük. 1) Tápagar lemez tenyészet: a telepek színtelenek, áttetszők és köralakúak; a telepek felülete fejszerű — domború gömb; a telep határa hullámos; nincs diffundálható pigment-képződés. 2) Tápagar ferde tenyészet: a telepek szövetszerűek, erősen fénylenek, nem átlátszóak és színtelenek. 3) Folyékony tápközeg: . zavaros szuszpenzióban szaporodik; vékony hártyát képez; nem észlelhető kicsapódás. 4) Tápzselatinos szúrt tenyészet: jó növekedés, főleg a felső részen; a táptalajt nagy aktivitással elfolyósítja. 5) Lakmusz-tej: nem észlelhető lakmusz-redukáló aktivitás; peptonizáló aktivitás megfigyelhető, de koaguláció nem. (c) Fiziológiai jellemzők 1) Nitrát-redukció: negatív 2) Denitrifikálás: negatív 3) Metil-vörös próba: negatív 4) Voges-Proskauer próba: negatív 5) Indol-képződés: negatív 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
