197767. lajstromszámú szabadalom • Eljárás humán relaxint kódoló gén-szekvencia molekuláris klónozása és jellemzésese, valamint humán H2 relaxin előállítására
197767 húzódását, mégpedig dózisfüggő módon. Egy 100 pd-es alikvot, amely teljesen meggátolja a méh-összehúzódást, ekvivalens egy 3,0% lánckombinációs kitermeléssel, amint ezt a természetes sertés relaxin standarddal (A 22—B 31) összehasonlítható. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás humán H2 preprorelaxint kódoló DNS vagy még relaxin-hatású fehérjét kódoló alegysége előállítására, azzal jellemezve, hogy humán petefészek szövetből vagy humán sárgatestből származó genom klón készletet vagy humán genom klón készletet, vizsgáló mintaként alkalmazott humán relaxin gén valamely alegységével végzett hibridizációval átvizsgálunk, és a hibridizáló, humán H2 preprorelaxin kifejezésére képes DNS szekvenciákat kiválasztjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vizsgáló mintaként Hl relaxin gén valamely szegmensét alkalmazzuk. 23 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vizsgáló mintaként a Hl relaxin gén olyan szegmensét alkalmazzuk, amely a C-peptid/A-peptid területet tar-5 talmazza. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vizsgáló mintaként a Hl relaxin gén olyan szegmensét alkalmazzuk, amely 400 nukleotidot tartal-10 máz, éspedig a Hl relaxin gén C peptidet kódoló szakaszát a 64. nukleotidtól, az A láncot kódoló szakaszt és a 3’-nem-transzlatált terület 80 bázisát. 5. Az 1, vagy 2. igénypont szerinti eljárás, 15 azzal jellemezve, hogy vizsgáló mintaként a Hl relaxin genom klón exonl-ének és exonll-jének megfelelő DNS-t használunk. 6. Az 1—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás az alábbi mRNS szekvenciának 20 megfelelő kettősszálú DNS vagy ennek a DNS szekvenciának a természetes triplett-degenerációjából eredő variánsai vagy mindezek még relaxin-hatású fehérjéket kódoló alegységei előállítására: 24 AUG CCU CGC CUG UUU UUU UUC CAC CUG CUA GGA GUC UGU UUA CUA CUG AAC CAA UUU UCC AGA GCA GUC GCG GAC UCA UGG AUG GAG GAA GUU AUU AAA UUA UGC GGC CGC GAA UUA GUU CGC GCG CAG AUU GCC AUU UGC GGC AUG AGC ACC UGG AGC AAA AGG UCU CUG AGC CAG GAA GAU GCU CCU CAG ACA CCU AGA CCA GUG GCA GAA AUU GUG CCA UCC UUC AUC AAC AAA ,GAU ACA GAA ACC AUA AAU AUG AUG UCA GAA UUU GUU GCU AAU UUG CCA CAG GAG CUG AAG UUA ACC CUG UCU GAG AUG CAG CCA GCA UUA CCA CAG CUA CAA CAA CAU GUA CCU GUA UUA AAA GAU UCC AGU CUU CUC UUU GAA GAA UUU AAG AAA CUU AUU CGC AAU AGA CAA AGU GAA GCC GCA GAC AGC AGU CCU UCA GAA UUA AAA UAC UUA GGC UUG GAU ACU CAU UCU CGA AAA AAG AGA CAA CUC UAC AGU GCA UUG GCU AAU AAA. UGU UGC CAU GUU GGU UGU ACC AAA AGA UCU CUU GCU AGA UUU UGC UGA azzal jellemezve, hogy a tárgyi kör szerinti DNS szekvenciákat választjuk ki. 7. A 6. igénypont szerinti eljárás az alábbi mRNS szekvenciának megfelelő kettősszálú DNS vagy ennek a DNS szekvenciának a természetes triplett-degenerációjából eredő variánsai vagy mindezek még relaxin-hatású fehérjéket kódoló elegységei előállítására: GAC UCA UGG AUG GAG GAA GUU AUU AAA UUA UGC GGC CGC GAA UUA GUU CGC GCG CAG AUU GCC AUU UGC GGC AUG AGC ACC UGG AGC AAA AGG UCU CUG AGC CAG GAA GAU GCU CCU CAG ACA CCU AGA CCA GUG GCA GAA AUU GUG CCA UCC UUC AUC AAC AAA GAU ACA GAA ACC AUA AAU AUG AUG UCA GAA UUC GUU GCU AAU UUG CCA CAG GAG CUG AAG UUA ACC CUG UCU GAG AUG CAG CCA GCA UUA CCA CAG CUA CAA CAA CAU GUA CCU GUA UUA AAA GAU UCC AGU CUU CUC UUU GAA GAA