197758. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az L 17392 antibiotikum (deglukoteikoplanin) előállítására

197758

b) a tömegveszteségre és a szervetlen maradékokra tekintettel korrigálva

c) a minta 900°C-on oxigén atmoszférában való hevítése után meghatározva

d) termogravimetriás elemzéssel 140°C-on meghatározva

Az L 17046 antibiotikum fiziokémiai jellemzői

Az L 17046 antibiotikum a következő jellemzőkkel rendelkezik:

a) fajlagos forgatás, (alfa)J?°=—44° (c=l%, DMF)

b) korlátlanul oldható vízben pH 8 felett, dimetilformamidban, dimetilszulfoxidban, propilénglikolban és metilcelloszolvban; kevéssé oldható metanolban; csaknem oldhatatlan n-hexánban, etiléterben és acetonban

c) UV abszorpciós spektruma a következő abszorpciós maximumokat mutatja:

— 0,1N sósavban: „

lambdamax278 nm (E1,TM=67,1)

-0,1N nátriumhidroxidban: lambda,TM* 297 nm (E’^=124,1)

— pH 7,4 foszfát-pufferben:

!ambdama*277 nm (Ej7m=75,0)

d) IR abszorpciós spektruma nujolban a következő megfigyelhető abszorpciós maximumokat mutatja (cm-1):

3700—2000, 2970—2850 (nujol); 1655, 1610, 1595, 1515,, 1490, 1460 (nujol), 1375 (nujol), 1300, 1230, 1145, 1060, 1010, 890, 850, 820, 720 (nujol).

e) Elem-analízise, a minta előzetesen kb. 140°C-on közömbös atmoszférában való szárítása után (tömegveszteség 8,4%) a következő összetételt mutatja (közelítő átlagos százalékos összetétel):

szén 56,74 hidrogén 4,27 nitrogén 7,99 klór

5,11 hamu 0,6.

f) R) értékei a következő TLC rendszerekben az alábbiak:

Eluáló rendszer (térf./térf.) Ráérték

I) 75:25 acetonitril-víz 0,53 (szilikagél: Merck 60 F254)

II) 30:70 acetonitril:5%-os vizes

nátriumszulfát 0,54

(szilikagél: szilanizált

Merck 60 F254)

Kimutatás: UV fény 254 nm-en, 3%-os etanolos ninhidrin; 1%-os metanolos fluoreszkamin

g) Retenciós ideje (te) 10,8 perc fordított'fázisú HPLC-vel végzett elemzés során, 150X X4,0 mm-es Zorbax* ODS (5—6 pm) oszlop alkalmazásával (a Zorbax megjelölés a Dupont Co. oktadecil-szilán-szilikagél mátrixra vonatkozó védjegye). Az eluálást 40 perc alatt végezzük, lineáris grádiens alkalmazásával (0—50% B oldat az A oldatban);

A oldat: 9:1 25 mM NaH2P04:acetonitri! elegy, 0,1N NaOH-dal pH 6,0-ra pufferolva

B oldat: 3:7 25 mM NaH2P04:acetonitril elegy, 0,1N NaOH-dal pH 6,0-ra pufferolva;

11

áramlási sebesség 2 ml/perc (belső standard 3,5-dihidroxi-toluol, ír 5,60 perc).

h] Néhány ‘H NMR adatot — amelyet D20 kicserélési és szelektív szétkapcsolási kísérletek után kaptunk — a következőkben mutatunk be (az 'H NMR spektrumot 270 MHz-en vettük fel DMSO-dg-ban 60°C- on, 20 mg/ml minta-koncentrációval; belső standard TMS delta=0,00 ppm):

(delta ppm, multiplicitás): 1,86, s; 2,81, d; 3,5, dd; kb. 3—4; 4,12, d; 4,32, d; 4,37, d; 4,56, s; 4,95, ddd; 5,07, s; 5,31, d; 5,39, s; 5,51, s; 5,66, d; 6,12, d; 6,29, s; 6,32, s; 6,37, s; 6,42, s; 6,60, d; 6,62, s; 6,64, d; 6,92, d; 7,09, s; 7,12, d; 7,21, d; 7,25, d; 7,43, d; 7,64, d; 7,66, d; 7,70, d; 7,85, s; 8,12, d; 8,46, d; kb: 9,5, s.

i) Potenciometrikus titrálási görbéje három titrálási hajlásszöget mutat az egyenes szakaszokon, a titrálási 0,01N NaOH-dal végezve a vizsgálandó vegyület oldatában, 4:1 metilcelloszolv:víz eleggyel elkészített amely ugyanezzel az oldószereleggyel elkészített 0,01 N HC1 oldatot feleslegben tartalmaz; a pH,/2 értékek a következők: 5,0 (1 egyenérték), 7,0 (1 egyenérték) és 11 (5 egyenérték).

l) Sóképzésre alkalmas sav-funkció van jelen.

m) Sóképzésre alkalmas bázis-funkció van jelen.

n) A cukor-maradék N-acetil-béta-D-glukozamin.

Az L 17054 antibiotikum fiziokémiai jellemzői

Az E 17054 antibiotikum a következő jellemzőkkel rendelkezik:

a) Fajlagos forgatása, (alfa)n°—34°/c=l% DMF).

b) Korlátlanul oldható vízben pH 8,0 felett, dimetilíormamidban, dimetilszulfoxidban, propilénglikolban és metilcelloszolvban; kevéssé oldható metanolban; csaknem oldhatatlan etiléterben és acetonban.

c) UV abszorpciós maximuma a következő abszorpciós maximumokat mutatja:

— 0,1 N sósavban:

lambda,TM* 278 nm (E}/m=60,6)

— 0,1N nátriumhidroxidban: lambdaTM* 297 nm (E^=l 18,8)

— pH 7,4 foszfát-pufferben: lambda„,a* 277 nm (E{7m=70,3)

d) IR abszorpciós spektruma nujolban a következő abszorpciós maximumokat tartalmazza (cm-1): 3700—2000, 2970—2850 (nujol),1655,1610,1595,1515,1490, 1460 (nujol), 1375 (nujol), 1300, 1230, 1145, 1060, 1020, 970, 890, 850, 820, 720 (nujol).

e) Elem-analízise a minta előzetesen kb. 140°C-on közömbös atmoszférában való szárítása után (tömegveszteség 7,8%) a következő közelítő százalékos (átlagos) összetételt mutatja:

szén 55,46 hidrogén 4,50 nitrogén 7,20 klór

4,67 hamu 0,2.

12

7

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

05