197595. lajstromszámú szabadalom • Eljárás expressziós vektorok előállítására
197595 20 19 plazmid törzs jele pBB9 PBR322 p408-5 P827-10 E.coli HB101 pERVI/23 [-Nsi] pERVI/23pLH4 pERVl/23pLH5 deponálási szám MG 00300 MG 00298 MNG 00301 MG 00307 MG 00290 NCAIM B/P 001016 NCAIM B/P 001014 NCAIM B/P 001015 deponálás dátuma 1984.X.31. 1984.IX.12. 1984.X.31. 1984.X.31. 1984.VII.25. 1987.VI.18. 1987.VI.18. 1987.VI.18. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az Escherichia coli riboszomális RNS operon (rrn operon) P2 promoteréből és az Escherichia coli lac operon szabályozó szekvenciáiból kialakított rekombináns promoted; tartalmazó expressziós vektorok előállítására, azzal jellemezve, hogy egy alkalmas hordozó vektorba épített E.coli riboszomális RNS operonjából (rrn operon) a struktúrgénék jelentős részét eltávolítjuk, és a P2 promoted tartalmazó rrn operon részletet a —35 és —10 régiókon kívül, downstream irányban lac operon elejével kapcsoljuk össze oly módon, hogy az rrn és lac eredetű szekvenciák kapcsolódási helyén Nsil hasítóhely jöjjön létre, majd kívánt esetben a létrehozott Nsil hasítóhelyből eltávolítjuk a TGCA szakaszt, majd kívánt esetben a kialakított szabályozó részek közé beépítjük a kifejezni kívánt struktúrgént. 7 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az érett rRNS-eknek meg-2Q felelő szekvenciákon belül végződő deléciót tartalmazó rrn operont használunk az expressziós vektor kialakításához. 3. Az 1. vagy 2. igénypontok szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy hordozó vektor-25 ként pBR322 plazmidot használunk. 4. Eljárás transzformált E.coli sejtek előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti expressziós vektort önmagában ismert módon E.coli sejt-30 be transzformáljuk. 5. Eljárás fehérje (túl)termeltetésére E.coli gazdatörzzsel, azzal jellemezve, hogy a 1—3. igénypontok bármelyike szerinti expressziós 35 vektorral transzformált törzseket tenyésztünk, majd a fermentléből a keletkezett fehérjét kinyerjük. 7 lap rajz, 10 ábra 11
