197586. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bestatin előállítására
197586 rad. A reakcióelegyet ezután 1,5 órán át keverjük az ammónia visszafolyatása mellett, a száraz jégből és etanolból álló fürdőt etanolos fürdővel helyettesítve. Ezután a reakcióelegyet visszahíítjük —78°C-ra, majd kristályos ammónium-kloridot adunk hozzá a fölöslegben lévő fém-nátrium eltávolítása céljából. A reakcióelegyet ezután szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd az ammóniát eltávolítjuk és 100 ml vizet adunk hozzá. A kapott vizes elegyet 100—100 ml etil-acetáttal háromszor extraháljuk, majd az egyesített szerves fázisokat telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, először etil-acetát és hexán 2:1, majd 4:1 arányú elegyével eluálva. Az eluátumokat bepárlás után benzol és hexán elegyéből átkristályosítva 2,90 g (14,0 millimól) mennyiségben, 82%-os kitermeléssel a cím szerinti vegyületet kapjuk. Olvadáspont: 88,5—89,3°C. IR-spektrum: 3440, 3280, 1748, 1700, 1415 és 1250 cm-1. NMR-spektrum (kis mennyiségű D20-t tartalmazó CDCI3) : 2.8 (2H, m, PhCH2) 3.4 (1H, m, 5—H) 3.8 (2H, m, -CH2OH) 4,3 (1H, m, 4—H) 5.5 (1H, b, -NH) 7,2 (5H, m aromás) Tömegspektrum: 208 (M-j-l)+, 116 (M-PhCH2) + [a]p3=—89,8°C (c=0,83, CHC13) Rf (TLC szilikagélen) = 0,31 (etil-acetát és hexán 4 : 1 térfogatarányú elegye) Elemzési eredmények a CnH13N03 képlet alapján: számított: N%=6,76, C%=63,76, H%=6,32; talált: N%=6,55, C%=63,56, H%=7,18. 6 1 (6) (4R, 5S) -4-Benzil-5- (metoxi-karbonil)-2-oxazolidinon 15 ml, kálium-permanganátról desztillált acetonban feloldunk 224,7 mg (1,1 miilimól) (4R, 5S) -4-benzil-5- (hidroxi-metil) -2-oxazolidinont, majd az így kapott oldathoz 2 ml Jones-féle reagenst (megfelel 8 normál mennyiségű aktív oxigénnek) adunk, és ezután az így kapott elegyet egy éjszakán át intenzíven keverjük. A reagálatlan Jones-féle reagenst izopropanol adagolása útján bontjuk el. Miután az aceton térfogatának mintegy felét ledesztilláltuk, a maradékhoz vizet adunk és a 9 vizes elegyet 50—50 ml etil-acetáttal négyszer extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. A maradékhoz 2 ml metanolt adunk. Az így kapott elegyhez jeges fürdővel végzett hűtés és keverés közben diazo-metán dietil-éteres oldatát adjuk, majd a keverést a nitrogéngáz fejlődésének megszűntéig folytatjuk. Az oldószerek ledesztillálása után a maradékot diizopropil-éter és hexán elegyéből átkristályosítjuk, 138 mg (0,587 miilimól) menynyiségben, 54%-os kitermeléssel a cím szerinti vegyületet kapva. Olvadáspont: 91,0—91,6°C, IR-spektrum: 3400 és 1750 cm-1. NMR-spektrum: 2.9 (1H, dd, J 00 = 13,5, J04=7,9, H0) 3.0 (1H, dd, J0’0 = 13,5, J0’4=5,8, H0), 3,79 (3H, s, -COMe) 4.1 (1H, m, H4) amin-protonnal végzett besugárzás esetén: (1H, dd, J4p=7,9, Jw,=5,8, J45=4,6) 4,7 (1H, d, J54=4,6, HJ 5.9 (1H, b, -NH) 7.2 (5H. m, aromás) Tömegspektrum: 235 (M)+, 203 (M-MeOH) + és 144 (M-PhCH2)+. talp3—+66,3° (c=l,2, CHCI3) Rf (TLC szilikagélen) =0,43 (etil-acetát és hexán 2 : 1 térfogatarányú elegye) Elemzési eredmények a C12H13N04 képlet alapján: számított: N%=5,95, C%=61,27, H%=5,57; talált: H%=5,90, C%=61,49, H%=5,59. SZABADALMI IGÉNYPONT Eljárás az (I) képletű bestatin — a képletben Ph jelentése fenilcsoport, és Leu jelentése leucin maradéka — előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely (II) általános képletű (4R, 5S)-4-benzil-5- - (alkoxi-karbonil)-2-oxazolidinont — a képletben Ph jelentése az (I) képletnél megadott és R jelentése rövidszénláncú alkilcsoport — savval vagy lúggal hidrolizálunk, majd az így kapott (2S, 3R) -3-amino-2-hidroxi-4-fenil-vajsav aminocsoportját a peptidkémiában ismert módon védjük, a védett aminosavat vagy a peptidkémiában szokásos reakcióképes származékát karboxilcsoporton védett L-leucinnal vagy az utóbbi savaddícíós sójával kondenzáljuk és végül a kapott vegyületrői a védőcsoportot lehasítjuk. 10 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 1 lap rajz képletekkel
