197355. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szignálszekvencia előállítására proteinek transzportjára, expressziós rendszerekben
16 197355 17 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás szintetikus szignál-szekvencia előállítására proteinek transzportjára expressziós rendszerekben, amely szignál-szekvencia az E. coli lúgos foszfatáz enzimje természetes szignál-szekvenciájának aminosav-sorrendjét kódolja, azzal a kivétellel, hogy a DNS egy vagy több olyan, az endonukleázok számára hozzáférhető hasítási helyet tartalmaz, amely vagy amelyek a természetes DNS-ben nem találhatók meg, továbbá kodonokat tartalmaz a kifejezendő protein szerkezeti génjének aminosav-terminális kodonjaiból, azzal jellemezve, hogy a tárgyi kör szerinti szerkezetnek megfelelő dezoxiribonukleinsavakat kémiai úton összekapcsoljuk, vagy a szerkezet egy-egy részének megfelelő dezoxiribonukleinsavakat kémiai úton összekapcsoljuk, és az így kapott DNS-szekvencia részeket enzimatikus úton összekapcsoljuk. 2. Az l. igénypont szerinti eljárás olyan szignál-szekvencia előállítására, amely a belső hasítási helyeket a szignál-szekvencia hidrofób tartománya előtt és/vagy után tar-5 talmazza, azzal jellemezve, hogy a megfelelő dezoxiribonukleinsavakat összekapcsoljuk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás olyan szignál-szekvencia előállítására, amely a 3’-végen a szerkezeti gén amino-10 -terminális kodonjaiból legfeljebb 40-et tartalmaz, azzal jellemezve, hogy a megfelelő dezoxiribonukleinsavakat összekapcsoljuk. 4. Eljárás eukariotikus, prokariotikus vagy vitális proteinek kifejezésére, és a ki-15 fejezett termék citoplazmából való transzportjára prokariotikus és eukariotikus sejtekben, azzal jellemezve, hogy a transzportálandó protein génjét az 1-3. igénypontok szerinti eljárással előállított szintetikus DNS- 20 -szekvenciához csatoljuk, a kapott fúziós gént egy vektorba építjük be, a vektorral egy gazdasejtet transzformálunk, a transzformáit gazdasejtet, tenyésztjük, és ily módon az exprimait, proteint a citoplazmából transz- 25 portáljuk. 3 ábraoldal A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 10 90.2044.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkő István vezérigazgató
