197353. lajstromszámú szabadalom • Eljárás heterológ gének kifejezésének megkönnyítésére E. coliban szintetikus regulációs terület segítségével

8

197353

9

vetkező radioimmunassay módszerrel (Celltech) határozzuk meg:

3. ábra szerinti plazmid: l,5xl05 egység/ml

4. ábra szerinti plazmid: lxlO5 egység/ml

Az ismert kitűnő tac-területekkel összehasonlítva a találmány szerinti kontrollterület 5 50%-kal magasabb ^-interferon-kitermelést mutat.

I. DNS-szekvencia (kódoló ág)

5’ GGATCCTAAATAAATTCTTGACATTT1TTAA2TAATTTGGTATAATGT3T

4GAATTG5GAGCG6T7ACAATT8C9C10G11G12T13TA14TT15 (ATG) 3’

1=T

vagy

G

7=G

vagy

c

11=AG vagy GA

2=A

vagy

C

8=T

vagy

közvetlen

kötés

12=A

vagy G

3=G

vagy

C

9=A

vagy

TAGA

13=C

vagy T

4=G

vagy

A

10=A,

TTTAAA,

AAGCTT vagy

AAGCTA

14=GAA vagy AGC

5=T

vagy

C

15=C

vagy közvetlen

kötés

6=C,

GA vagy

GAA

Ila-IIh DNS

szekvenciák

1

2

5

6

7

8

10

11

12

13

14

15

3=G

Ha

T

A

T

GGA

A

T

A

AG

A

C

GAA

C

4=G

b

T

A

T

GAA

A

T

TTTAAA

AG

A

C

GAA

C

9=A

c

G

C

T

GAA

A

T

TTTAAA

AG

A

C

GAA

C

d

G

C

T

GAA

AAAGCTT

AG

A

C

GAA

C

e

G

C

C

GAA

AAAGCTT

AG

A

C

GAA

C

f

G

c

T

C

CAAGCTT

AG

A

Ç

GAA

C

g

G

c

T

GA

CAAGCTT

AG

A

C

GAA

C

h

G

c

T

GA

CAAGCTA

GA

G

T

AGC-lia DNS-szekvencia

Bam Hl

<---------------------------------------------la ------------------------------------T <--------------------------------------1 10 20 5’ AGCGGATCCTAAAT AAA TTCTTGACAT 3’ TCGC C TAGGATTTATT T AAGAACTGTA------:---------------------------------------- Ib------------------------------------------------------------------------------------Aha III----------------------------------------------- ic ,------------------------------------------------------------------30 40

5. tttttaaataatttggtataatgt

3* AAAAATTTATTAAACCATATTACA ---------Ib —>■ •<---------------------------------------- Id ---------------------------------------------------50

<

5’ G T G

3’ C A C

G

C

A

T---------------------- le -----------60

ATTGTGAG

TAACACTC

C G G G C C

If

<- Ig------------------------------------70

AATAAC AATT TTATTC TTAA

T

A

Eco RI

80

5’ C A C A G A

5’ G T G T C T----------------- Ig -G G A T C C C T A G ----------------- Ih '

90

TACAATTC ACT ATCTT AAGTGA

6