197212. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírus- és daganatellenes hatású gyógyszerkészítmények előállítására
7 197212 8 lyen erős alkáli bázis jelenlétében állíthatók elő. Ilyen előállítási módszereket a 3 146 772 sz. német szövetségi köztársaságbeli közrebocsátási irat és a fentiekben idézett szabadalmi leírások ismertetnek. Ebben az értelemben hivatkozási alapként kifejezetten a publikált dokumentumokat tekintjük. A találmány szerinti készítmény másik összetevőjét, azaz a lipofil és hidrofil csoporttal egyaránt rendelkező ionos adjuváns vegyületet az alábbi vegyületekkel illusztráljuk: kereskedelemben hozzáférhető egyenes vagy elágazó, telített vagy telítetlen, például kb. 8 és 16 közötti szénatomszámú alifás csoportot tartalmazó mono-karbonsavak, -szulfátok, -szulfonátok, -foszfátok. Ezeket a vegyületeket előnyösen, önmagában ismert módon, a megfelelő sóvá alakíthatjuk, olyan bázist használva, amellyel gyógyászatilag elfogadható sót kapunk. A farmakológiai vizsgálatok néhány eredményét az alábbiakban ismertetjük. i. Sejttoxicitási vizsgálatok Vizsgáit vegyüietek: kólium-8(9)-triciklo[5.2.1.02-6]decil-xantát (D609), rövidítése: .DEXA", amelyet az 1. táblázatban bemutatott különböző lánchosszúságú karbonsavakkal kombináltunk. Alkalmazott sejttenyészetek: közönséges hörcsög embrió fibroblaszt (HEF); szarvasmarha papilloma vírussal transzformált hörcsög embrió fibroblaszt (HEF- BPV); Táptalaj: Eagle-féle alap-táptalaj, melyhez Earle-féle sókat (BME) adtunk és 10% főtális borjú szérummal (FBS), 1% penicillinnel + streptomycinnel egészítettünk ki; pli-ja 7,4. Módszer: A fenti sejtkultúrákat az adott táptalajon in vitro inkubáltuk. Valamennyi mintához 20 pl fenti DEXA hatóanyagot és fokozatosan növekvő mennyiségben az 1. táblázatban bemutatott zsírsavat tartalmazó keveréket adtunk. 3 nap múlva a kultúrákat mikroszkopikusan megvizsgáltuk és a minimális toxikus koncentrációt meghatároztuk. Az eredményeket az 1. táblázatban foglaltuk össze. 1. táblázat Vizsgált HEF-kultúra HEF-BPV-kultúra kombináció 20 pg/ml DEXA-t + adjuvánst tartalmazó keverék minimális DEXA + toxikus koncentrációja + adjuváns adjuváns adjuváns (pg/ml) (pg/ml) DEXA + + dekánsav 100 10 DEXA + I. táblázat Vizsgált HEF-kultúra HEF-BPV-kultúra kombináció 20 pg/ml DEXA-t + adjuvánst tartalmazó keverék minimális DEXA + toxikus koncentrációja + adjuváns adjuváns (pg/ml) adjuváns (ng/ml) + undekánsav 100 10 DEXA + + dodekánsav 40 10 DEXA + + mirisztinsav 30 10 Az 1. táblázatból kitűnik, hogy a hatóanyag DEXA és a bemutatott zsírsavak kombinációja lényegesen toxikusabb hatást fejt ki a transzformált, mint a nem-transzformélt sejttenyészetekre. Ez különösen a dekánsavval és az uridekánsavval képzett kombinációkra érvényes, amikoris a kombinációnak transzformált sejtkultúrákra kifejtett toxikus hatása tízszerese a közönséges sejtkultúrákra gyakorolt toxicitásának. Különböző találmány szerinti kombináció sejttoxicitását egy másik modellen, egér embrió fibroblaszt (EEF) és transzformált egér embrió fibroblaszt sejtkultúrákon (EEF-K1) is meghatároztuk. E sejtkultúrákat BME-t, 5% borjú plazmát, penicillint és streptomycint tartalmazó táptalajon - amelynek pH-ja 7,4 - inkubáltunk. A vizsgálatot a fentiekben ismertetett módon hajtottuk végre, de a mikroszkopikus kiértékelést 24 óra múlva végeztük. \ kapott eredményeket a 2. táblázatban foglaltuk össze. 2. táblázat Vizsgált EEF EEF-K1 kombináció 20 pg/ml DEXA-t + adjuvánst tartalmazó keverék minimális toxikus koncentrációja DEXA + + adjuváns adjuváns (pg/ml) adjuváns (pg/ml) DEXA + K-dekanoát 80 10 DEXA + dekánsav — 40 DEXA + + undekánsav 80 10 DEXA + + K-undekanoét 80 10 DEXA + + dodekánsav 60 20 DEXA + + tridekánsav 60 10 DEXA + + tetradekánsav 80 10-20 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
