197030. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új hexapeptidek és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
7 197 030 8 leslegét átrium-hidrogénszulfittal elbontottuk, a pH-t 7-re állítottuk és az oldatot fagyasztva szárítottuk. A kapott peptidet részlegesen tisztítjuk 1- BuOH/HOAc/Wa 4:1:5 arányú elegyével ellenáramban. A kapott termék 800 g-ját tovább tisztítjuk szilícium-dioxid oszlopon 1-BuOH/Py/IIOAc/Wa 8:3:1:4 eiegyét használva mozgó fázisként. A kapott termék R, értéke 0,33 volt (eluens: 1-BuOH/Py/HOAc/Wa elegye). Hozam: 66,7%. 6, példa H-Gly-Gly-Phe-Mct-D-Lys-Phe-OH szintézise „szilárd fázisú " technikával (1) A szilárd fázisként használatos gyanta előállítása Sztirol és 1 % divinil-benzol klórmetilezett kopolimeijéből kiindulva a megfelelő p - hidroxi - benzil - alkoholgyantát állítunk elő S. S. Wang [J, Amer. Chem. Soc. 95, 1328 (1973)] módszerét használva. (2) Fmoc-Phe-[szilárd hordozó] 10,9 millimól FMOc-Phe-OH-t 40 ml DMF-ben oldunk, 10 g (=7 millimól) 8(1) példa szerint előállított, 160 ml metilén-dikloridban oldott gyantához kapcsoljuk Meienhofer és társai módszere szerint [Int. J. Peptide Protein Rés. 13, 35—42 (1979)]. (3) Boc-Gly-Gly-Phe-Met-D-Lys/Bod-Phe[szilárd hordozó] Fmoc-Phe-[szilárd hordozó]-bői kiindulva az Fmoc - D - Lys/Boc/ - OH, Fmoc - Met - OH, Fmoc - Phe - OH, Fmoc - Gly - OH és Boc - Gly - OH védett aminosavakat egymás után összekapcsoljuk. A védőcsoportok eltávolítását és a kapcsolást úgy hajtjuk végre, mint azt a következőkben az utolsó lépés, a Boc-Gly-OH és a H - Gly - Phe - Met - D - Lys/BOc/ - Phe - [szilárd hordozó] kapcsolása során leírjuk. 10 g Fmoc - Gly - Phe - Met - D - Lys/Boc/ - Phe - [szilárd hordozó]-ról a Fmoc védőcsoportot eltávolítjuk háromszor 60 ml DMF-dal, kétszer 60 ml 50%-os DMF-ben oldott piperidinnel, kétszer 60 ml dioxán/víz 2:1 arányú elegyével és hatszor 60 ml DMF-dal való mosással. 6,6 millimól (3 mólekvivalens) Boc - Gly - OH és 3 mólekvivalens DDC-t és HOBt-t adtunk a felszabadított termékhez. A kapcsolási reakció lezajlása után a gyantához kapcsolt peptidet egymás után 60 ml ctanolia! és 60 ml DMF-dal mossuk. (4) A pepiid eltávolítása a szilárd hordozóról A fenti termék 11 g-ját 60 ml metilén-dikloriddal mostuk, majd 70 ml TFA/meíilén-diklorid 1:1 arányú eiegyét, melyhez 0,1 ml tioanízolt adunk, vezetünk bele. 2 óra elteltével a szilárd fázist leszűrjük és 10%oí I lOAc-va! mossuk. A sziirlctct vákuumban szárazra pároljuk, a maradékot 30 ml tBuOH/H20 elegyében oldjuk, majd acetát fázisban levő ioncserélő gyantával reagá Itatunk. Ezután a keveréket Jeszűtjük, a szűrietet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot szilfcium-dioxid oszlopon tisztítjuk mozgó fázisként 1-Bu/Py/HOAc/Wa 8:3:1:4 arányú eiegyét használva. A kitermelés 0,27 g. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az új (I) általános képletű hcxapcptidek H Gly-Gly-L-Phe-L-Metx-Q-Phe-OH (1) — a képletben Megjelentése metionil-, metionil-szulfoxid- vagy mctionil-szulfon-csoport, és Q jelentése lizil- vagy arginil-csoport, azzal a feltétellel, hogy a Q aminosav-gyök és a C-terminális feniialanil-csoport egyike D-konfigurációjú, míg a másik L-konfigurációjú —, valamint gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóik előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely Z - Gly - Gly - L - Phe - L - Met, - Q' - Phe - Y (II) általános képletű pepiidből — a képletben Metx jelentése az (I) általános képletnél megadott, Z jelentése hidrogénatom vagy N-védőcsoporttal védett amincesoport, Q1 jelentése azonos Q korábban megad ott jelentésével, de járulékosan az e-aminorészen védett lizil- vagy guanidii-részen védett arginil-csoportot is jelenthet, azzal a megkötéssel, hogy a Q1 an inosav-gyök és a C-terminális fenil-alanil-csoport egyike D-könfigurá'ciójú, míg a másik L-konfigjrációjű, és Y jelentése hidroxilcsoport, védett hidroxilcsoport vagy eltávolítása után hidroxilcsoportot eredményező gyanta, azzal a megkötéssel, hogy ha Y jelentése gyantától eltérő, akkor Z, Q1 és Y közül legalább az egyik védőcsoportot jelent vagy tartalmaz — a védőcso|X)rtot vagy -csoportokat és/vagy a gyantát eltávolítjuk, és kívánt esetben egy így kapott (I) általános képletű hexapeptide* egy megfelelő szulíoxiddá vagy szulfonná alakítunk oxidálószerrel és/vagy gyógyászatilag elfogadha ó savaddíciós sóvá alakítunk savval. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan új, (1) általános képletű hexapeptidek előállítására, melyek képletében Q jelentése D-lizil-csoport, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként Q1 helyén D- izil-csoportot tartalmazó (II) általános képletű vegyületet — a képletben a többi helyettesítő jelentése az 1. igénypontban megadott — használunk. .1. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan új, (1) általános képletű hexapeptidek előállítására, melyek képletében Metx jelentése metionil-szulfoxídvagy meticnil-szulfon-csoport, azzal jellemezve, hogy Met, helyén mctionil-csoportot hordozó (1) általános képletű hexapeptidel — a képletben a többi helyettesítő jelentése az 1. igénypontban megadott — egy vagy két mólekvivalens oxidálószerrel oxidálunk. 4. Eljárás gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, az 1. igénypont szerinti eljárással előállított (I) általános képletű peptidet — a képletben Met, és Q jelentése az 1. igény-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
