196847. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás 1,2-dihidro-szteroidok előállítására
1 2 hoz szükséges oldószer fele és a legrosszabbul oldódó kiindulási vagy végtermék szteroid feloldásához szükséges oldószer négyszerese között változhat. A fenti példában a toluolt olyan mennyiségben alkalmaztuk, hogy éppen elegendő volt a reakció befejezésekor a szteroid feloldásához. Az aromás szénhidrogént előnyösen a szteroiddal együtt adjuk a reakcióeiegyhez. Azonban az aromás szénhidrogént későbbi vagy korábbi időpontban is hozzáadhatjuk az elégyhez. (2) lépés Az elegyet annyira kell keverni, amennyire ez lehetséges. A reakciósebesség a keverési erőtől erősen függ. (3) lépés A reakció oxigénigényes. Azonban az aromás szénhidrogén jelenléte következtében a reaktor gázterében robbanásveszélyes gázelegy keletkezik. Ennek a veszélynek a leküzdése érdekében a gáztérben lévő oxigén mennyiségét a gyulladáshoz szükséges mennyiség alatt kell tartani. Benzol esetén a gyulladáshoz szükséges minimális oxigén 11,2%. Xilol esetén is lehetséges a reakciót a lobbanáspont alatt tartani. M-xilol, o-xilol és p-xilol esetén a gyulladási hőmérséklet 29, 32, illetve 39 °C. (4) lépés A reakcióhőmérséklet 0—45 °C között változhat. (5) lépés A reakció általában 2 nap alatt zajlik le, de a reakcióidő néhány óra és néhány hét között változhat. 3. példa A toluolos és vizes eljárások összehasonlítása A (eljárás) •0,4 g A. simplex sejtet és 50 ml 50 mmól-os kálium-foszfát puffert (pH = 7,5) összekevertünk. 2 órán keresztül mozgattuk, amíg egységes fermentlevet nem kaptunk. 2-25 ml-es frakciókat vettünk ki belőlük, és 125 ml-es lombikba tettük. Mindegyik lombikba 0,25 ml 3A-alkoholban oldott 5 mmól menadiont és 0,2 g androszta-4,9(l l)-dién-3,17-diont adtunk. Az egyik lombikba 2 ml toluolt öntöttünk. 4 napon keresztül rázógépen mozgattuk. 4 nap elteltével 25 ml toluollal extraháltuk. Az extraktumokat analizáltuk. Szubsztrát: androszta-4,9(l l)-dién-3,17-dion 17,7% 0,00% Termék: androszta-1,4,9(1 l)-trién-3,17-dién 82,3% 100,00% 4 4. példa A 2. példának megfelelő módon eljárásva a következő szteroidokat alakítottuk át 1,2-dehidro-származékaikká A. simplex szárított sejtek segítségével: 1. androszta-4-én-3,17-dion 2. 6-alfa-fluor-androszta-4,9(l I >dién-3,l 7-dion 3. 6-alfa-metil-androszta-4,9(l l)-dién-3,17-dion 4. 16-béta-metil-androszta-4,9(1 l)-dién-3,17-dion 5. l7-alfa-hidroxi-pregn-4-én-20-in-3-on 6.17- alfa-hidroxi-pregn-4,9(l l)-dién-20-in-3-on 7.17- alfa-hidroxi-16-béta-metil-pregn-4,9(l l)-dlén- 20-on-3-on 8. 21-acetoxi-11-béta-hidroxi -pregn-4,17(20)-dién-20- -in-3-on 9. 20-klór-pregn-4,9(l 1 ),17(20)-trién-21 -al-3-on 10 21 -acetoxi-17-hidroxi-pregn-4,9( 11 )-dién-3,20-•dion 11. 21-acetoxi-17-hidroxi-16-alfa-metil-pregn-4,9(l 1)-dién-3,20-dion 12.21 -benzoil-oxi-17 -hidroxi-16-alfa-metil-pregn-4,9(1 l)-dién-3,20-dion 13. 21-acetoxi-17-hidroxi-16-béta-metil-pregn-4,9(1 l>dién-3,20-dion 14. 21-acetoxi-pregn-4,9(l l),16-trién-3,20-dion 15.21-acetoxi-6-alfa-fluor-pregn-4,9(l 1 ),16(17)-trién-3,20-dion. A konverzióval a következő termékekhez jutotttunk: la. androszta-1,4-dién-3,l 7-dion 2a. 6-alfa-fluor-androszta-l,4,9(1 l)-trién-3,l7-dion 3a. 6-alfa-metil-androszta-l,4,9(1 l)-trén-3,l 7-dion 4a. 16-béta-metil-androszta-l ,4,9(1 l)-trién-3,17- -dion 5a. 17-alfa-hidroxi-pregn-l ,4-dién-20-in-3-on 6a. 17-alfa-hidroxi-pregn-l ,4,9(11 )-trién-20-in-3-on 7a. 18-alfa-hidroxi-16-béta-metil-pregn-l ,4,9(11)-trién-20-in-3-on 8a. 21-acetoxi-l 1-béta-hidroxi-pregn-l ,4,17(20)-trién-3-on és 1 l-béta,21-dihidroxi-pregn-l ,4,17- -(20)-trién-3-on 9a. 20-klór-pregn-l,4,9(l l),17(20)-trién-21-al-3-on 10a. 21-acetoxi-17-hidroxi-pregn-l ,4,9(1 l)-trién-3,20- -dion és 17,21-dihidroxi-pregn-l,4,9(1 l)-trién-3,20-dion 1 la. 21-acetoxi-17-hidroxi-16-alfa-metil-pregn-l,4,9- -(11 )-trién-3,20-dion és 17,21 -dihidroxi-16-alfa-metil-pregn-1,4,9(11 )-trién-3,20-dion 12a. 21 -benzol-oxi-17-hidroxi-l 6-béta-metil-pregn-1,4,9(1 l>trién-3,20-dion 13a. 21 -acetoxi-17-hidroxi-l 6-béta-metil-pregn-l ,4,9- -(1 l)-trién-3,20-dion és 17,21-dihidroxi-16-béta-metil-pregn-1,4,9(11 )-trién-3,20-dion 14a. 21 -acetoxi-pregn-1,4,9( 11 ),16-tetraén-3,20-dion és 21-hidroxi-pregn-l ,4,9(11 ),16-tetraén-3,20-dion 15a. 21-acetoxi-6-alfa-fluor-pregn-l ,4,9(1 l),16-tetraén-3,20-dion és 6-alfa-fluor-21-hidroxi-pregn-l ,4- 9(1 l),16-tetraén-3,20-dion. Az 1,2-dehidro-szteroidok felhasználása jól ismert. Például a 3 284 447 számú USA-beli szabadalmi leírás szerint az A1,4,9'1 '-pregnén-triének a 16. szénatomszámon helyettesített diuretikus kortikoszteroidok szintéziséhez használhatók fel. A 4 041 055. számú A1,4-androsztén-dion származékokból, ezáltal bizonyítva azt, hogy az 1,2-dehidro-androsztének fontos intermedierek gyógyászatiig hasznos előállításában. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás 1,2-telített szteroidok 1,2-dehidro-szteroidokká való átalakítására, Arthrobacter simplex vagy Bacterium cyclooxydans mikroorganizmussal, azzal jellemezve, hogy egy exogén elektron 196.847 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
