196841. lajstromszámú szabadalom • Eljárás xilóz-izomeráz előállítására, immobilizálására és glükóznak fruktózzá történő izomerizálására
1 2 196 841 Ezek szerint a találmány szerinti xilóz-izomerázt azzal jellemeztük, hogy áz azonos a Streptomyces murinus csoport törzseinek tenyésztésével előállí- 5 tott xilóz-izomerázzal. A találmány szerinti xilóz-izomeráz előállítás előnyös kivitelezési módja a Streptomyces murinus csoport tenyésztésével történik. Annak ellenére, hogy igen nagyszámú fajról isme- _ retes, hogy xilóz-izomerázt termel, nem volt ismert a Streptomyces murinus csoportból olyan törzs, and ilyen tulajdonságokkal rendelkezett volna. Meglepően úgy találtuk, hogy a Streptomyces murinus csoport bármelyik törzse nagyon jól megfelel a xilóz-izomeráz termelése szempontjából és rendelkezik -jg a fent felsorolt előnyökkel. A xilóz-izomeráz találmány szerinti előállítását a Streptomyces murinus csoportba tartozó törzs süllyesztett, aerob tenyésztésével végezzük megfelelő szén- és nitrogénforrást tartalmazó táptalajon, majd a keletkezett xilóz-izomerázt kinyerjük. 20 A találmány szerinti eljárás előnyös kivitelezésénél a Streptomyces murinus csoportba tartozó DSM 40091, DSM 40240, NRRL 8171, FERM P-3710 vagy DSM 3252 törzseket használjuk. A törzsek megjelölésében használt rövidítések a következők: DSM = Deutsche Sammlung von Microorga- 25 nismen, Göttingen, Német Szövetségi Köztársaság, NRRL = Northern Regional Research Laboratory, USA, FERM = Fermentation Research Institute, Japán. Amennyiben a táptalaj xilózt tartalmaz, a fermentációs hozadék tetemes és megfelelő immobilizált xilóZMzomeráz állítható elő. ^ A találmány szerinti eljárás előnyös kivitelezési módjánál a Streptomyces murinus csoportba tartozó törzs a xilóz-izomeráz termelése szempontjából konstitutív. Ez esetben nem szükséges, hogy a táptalaj drága xilóz alkotórészt tartalmazzon, hanem más olcsó szénforrás, például glükóz, is használható. Találtunk továbbá olyan, a Streptomyces murinus csoportba tartozó mutánst, mely valódi konstitutív és a glükóz represszióra nem érzékeny, így a S. murinus DSM 3253, ami a S. murinus DSM 3252 törzsnek konstitutív és glükózrepresszió rezisztens mutánsa, egyedülálló abból a szempontból, hogy több xilóz-izomerázt, termel glükóz, mint xilóz jelenlétében (lásd az 1. példát). A Streptomyces fajok eddigi, „konstitutívként” jellemzett xilóz-izomerázt termelő mutánsai (4.399,222 számú USA szabadalom, 3. példa, Re 29152 USA szabadalom, III. táblázat). mind több enzimet termeltek xilózt tartalmazó közegben, mint xilóz induktor nélkül. A 4. példában különböző táptalajokon összehasonlítjuk a találmány eljárása szerint alkalmazott S. murinus csoport egyik xilóz-izomerázt termelő konstitutív mutánsát az eddig „konstitutívként” emlegetett, xilóz-izomerázt termelő mikroorganizmusokkal. A találmány szerinti eljárás egyik előnyös kivitelezési módjában a Streptomyces, murinus csoport DSM 3253 törzsét alkalmazzuk. Úgy találtuk, hogy teljesen xilózmentes táptalajon, nagyon magas enzimtermelést kaphatunk ezzel a »törzzsel, amint azt az 1-3. példánkban szemléltetjük. A jobb áttekinthetőség kedvéért az I. táblázatban összefoglaljuk a találmány leírásában szereplő Streptomyces murinus törzsek kulcsfontosságú tulajdonságait. I. táblázat 'letéti szám specifikus tulajdonság' általunk letétbe helyezett indukálhatóság konstitutív jelleg DSM 40091 típus törzs + DSM 40240 előzőleg Streptomyces roseauluteus-ként leírt + DSM 3252 talajból izolált ♦ DMS3253 konstitutívitásra mutált ♦ + NRRL 8171 ♦ FERM P-3710 + A II. táblázatban megadjuk a Streptomyces murinus csoport négy törzsének néhány fontos rendszertani tulajdonságát. 55 3
