196831. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új (16,17-acetál-htt.) pregnán-21-karbonsav származékok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 Az aldehidet az 1. példában leírt körülmények között reagáltatjuk metanol helyett izopropanolt alkalmazva. A nyersterméket Sephadex LH-20 oszlopon (71,5 x 6,3 cm) tisztítjuk mozgó fázisként kloroformot alkalmazva. Az 1845-2800 ml közötti fázist összegyűjtjük, és bepároljuk, így 0,42 g szilárd anyagot kapunk, amelyet metilén-kloridból petroléterrel kicsapunk. 0,41 g /22R/-16a , 17a-(butilidén-dioxi)- 6a, 9 a-difluor-11 ö-hidroxi-3,20-dioxo-pregna-1,4-dién-21-sav-izopropifésztert kapunk, amelynek HPLC-vel meghatározott tisztasága 96,5%, olvadáspontja: 198-210°C'laß5 = *6 2,0° (0,292 diklór-mctánban). A molakuletömag 522. 6. példa 55 mg réz(II-acetát 25 ml metanollal készített oldatát hozzáadjuk 200 mg /22R/-16a , 17a(butilidén-dioxi)-6a 9 a -difluor-11 ß, 21-dihitlroxi-pregna-l,4- -dién-3,20-dion 25 ml metanollal készített oldatához és a reakciót és a termék elkülönítését az 1. példában leírt módon végezzük. 250 mg /22R/-16a, 17a-(butilidén-dioxi)-6 a ,9a -difluor-11 ß -hidroxi-3,20-dioxo-pregna-l ,4-dién-21-aldehid-metil-hcmiacetált kapunk. Az aldehidet az 1. példában leírt körülmények között reagáltatjuk metanol helyett butanolt alkalmazva. A nyersterméket Scphadex LH-20 oszlopon (875 x 2,5 cm) tisztítjuk mozgó fázisként heptán : kloroform : etanol = 20 : 20 : 1 arányé elegyét alkalmazva. A 610-674 ml közötti frakciót összegyűjtjük, bepároljuk és metilén-kloridból petroléterrel kicsapjuk, így 76 mg /22R/-16 a , 17a -(butilidén-dioxi)-6a , 9 a -difluor-11 ß -hidroxi-3,20-dioxo-pregna-1,4-dién-21-sav-butilésztert kapunk, amelynek HPLC-vel meghatározott tisztasága 97,0%, olvadáspontja: 185-188°C. [a]?,5 = + 63,3° (c = 0,300, diklór-metánban). A molekulatömeg 536 7. példa 185 mg/22R/-160,17 a(butilidén-dioxi)-6 a, 9a-difluor-11 ß -hidroxi-3,20-dioxo-pregna-l,4-dién-21- -aldehid-metil-hemiacetál 10 ml dimetil-formamiddal készített oldatához 40 ml kálium-cianidot és 2,0 ml jégecetet adunk. 15 perc keverés után a reakcióelegyhez 0,5 g mangán(IV)-oxidot adunk, szobahőmérsékleten keverjük még 2 órát, a mangán(IV)-oxidot kiszűrjük, a maradékot 50 ml vízbe öntjük és etil-acetáttal alaposan extraháljuk. A vizes oldatot sósavval megsavanyítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot szárítjuk és bcpároljuk. A maradékot kromatográfiásan tisztítjuk Sephadex LH-20 oszlopon (88 x 2,5 cm) kloroform : etanol : jégecet = 95 : 5 : 0,25 arányú elegyét használva mozgó fázisként. A 985—1125 ml közötti frakciót összegyűltük és bepároljuk, így 60 mg /22R/-16 a, 17 a-(butilidén-dioxi)-6a , 9 a-difluor-11 /3-hidroxi-3,20-dioxo-pregna-l ,4-dién-21-savat kapunk, amelynek HPLC-vel meghatározott tisztasága 99,0%. Tömegspektrum (kémiai ionizálás). 481 /MlT/ HF/, 409 /MH+-/CO/20/. 8. példa 680 mg ezüst-nitrát 1,2 ml vízzel készített oldatához keverés közben 4 ml 2 M nátrium-hidroxid-oldatot adunk. A felülúszót 15 perc múlva centrifugáljuk és az oldószert dekán táljuk. A képződött ezüst(I)-6-oxidot szuszpendáljuk 3 ml 0,01 M nátrium-hidroxid-oldatban és hozzáadunk 185 mg/22R/-16a, 17a-(butilidén-dioxi)-6 a , 9 a -difluor-11 ß -hidroxi-3,20-dioxo-pregna-l,4-dién-21-aldehid-metil-hemiacetált. A szuszpenziót szobahőmérsékleten keverjük 1 órát, centrifugáljuk és a felülúszót 3 ml 0,01 M nátrium-hidroxidban szuszpendáljuk és háromszor centrifugáljuk. Az egyesített lúgos fázisokat metilén-kloriddal extraháljuk, 2 M sósavoldattal megsavanyítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. Az oldószert lepároljuk és a maradékot kromatográfiásan tisztítjuk Sepnadex LH-20 oszlopon (88 x 2,5 cm) mozgó fázisként kloroform : etanol : jégecet = 95 : 5 : 0,25 arányú elegyét alkalmazva. A 900-1010 ml közötti frakciót összegyűjtjük és bepároljuk, így 85 mg /22R/-16 <x , 17 a.(butilidén-dioxi)-6a , 9 a-difluor-11 P -hidroxi-3,20-dioxo-pregna-l,4-dién-21-savat kapunk. 9. példa 130 mg /22R/-16 a , 17 a -(butilidén-dioxi)-6a, -9 a -difluor-11 ß -hidroxi-3,20-dioxo-pregna-l,4- -dién-21-aldehid-metil-hemiacetált 1,5 ml acctonnal készített oldatához 3 ml 0,1 M vizes trinátrium-foszfátot és 1 mg kálium-cianidot adunk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten keverjük 30 percig. Metilkék 1%-os vizes oldatát csöpögtetjük hozzá, amíg a szín megmarad. A reakcióelegyet még 30 percig keverjük, körülbelül 2 ml térfogatra sűrítjük be és hozzáadunk 25 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot. Az elegyet metilén-kloriddal mossuk, 2 M sósavoldattal megsavanyítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot szárítjuk, bepároljuk és a maradékot kromatográfiásan tisztítjuk Sephadex LH-20 oszlopon (88 x 2,5 cm) mozgó fázisként kloroform : etanol : jégecet = 95 : 5 : 0,25 arányú elegyét alkalmazva. A 900-1005 ml közötti frakciót összegyűjtjük és bepároljuk, így 27 mg /22R/-16 a, 17 a-(butilidén-dioxi)-6a, 9a-difluor-1 Iß - -hidroxi-3,20-dioxo-pregna-l,4-dién-21-savat kapunk. 10. példa 100 mg /22R/-16a , 17a -(butilidén-dioxi)-6a , -9 a -difluor-11 fí -hidroxi-3,20-dioxo-pregna-l,4- -dién-21-sav és 35 mg kálium-hidrogén-karbonát 10 ml dimetil-formamiddal készített oldatához 285 mg metil-jodidot adunk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten keverjük egy éjszakán át, hozzáadunk 50 ml vizet és az elegyet metilén-kloriddal extraháljuk. A szerves fázist elválasztjuk, 10 ml telített vizes nátrium-tioszulfáttal, és kétszer 10 ml vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljuk. A maradékot kromatográfiásan tisztítjuk Sephadex LH-20 oszlopon (72 x 6,3 cm), mozgó fázisként kloroformot alkalmazva. A 2116-2550 ml közötti frakciót összegyűjtjük és bepároljuk. A maradékot feloldjuk metilén-kloridban és 40-60°C forráspontú petroléterrel kicsapjuk, így 88 mg/22R/-16a, 17a -(butilidén-dioxi)-6 a , 9 a-difluor-1 \ß -hidroxi-3,20- -dioxo-pregna-1,4-dién-21 -sav-metilésztert kapunk, amelynek HPLC-vel meghatározott tisztasága 96,2%, olvadáspontja 227-235°C molekulatömege 494. 11. példa 100 mg /22R/-16 á, 17a-(butilidén-dioxi)-6a, 9 a -difluor-11 ß -hidroxi-3,20-dioxo-pregna-l ,4-dién-196 831 6 10 15 20 25 30 35 40 ^5 50 55 60
