196625. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hepatitis-b vírus vakcina előállítására
196 625 HindlII-fragmentuinot egy élesztőgomba-vektorba inszertáljuk. 15. A 13. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a 7. igénypont szerinti fúzióba vitt 1480—5700 bp értékű fragmentumokat llindlll-va! g kezeljük, s az így kihasított, HBsAg-szekvenciát és a szabályzó regulátor szakaszt hordozó Hindlll-fragmentumot egy élesztőgomba-vektorba inszertáljuk. 16. A 13. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a HBsAg-szekvenciát és regulátor sza- 10 kaszt tartalmazó HindlII-fragmentumot HindlIT-val kezelve felszabadítjuk cs ezt a lliiullll-fragmcntumot egy élesztőgomba-vektorba inszertáljuk. 17. A 13. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy élesztőgomba-vektorként egy előzőleg 15 a HindlII-fragmentum kihasításával módosított YEpI 3-al alkalmazunk. 18. A 13. igénypont szerinti eljárás az éleszőgomba arg 3 regulátor szakaszát és egy ehhez közeli restrikciós helyet tartalmazó vektor előállítására, úgy, hogy ‘í0 a restrikciós helyre inszejrtált kódoló szekvencia érvényesülése útján szintetizált fehérjét idegen atninosavaktól mentessé tesszük, azzal jellemezve, hogy a regulátor szakaszt, amely pMC200-nak egy olyan, 1480 bp értékű fragmentuma, mely egyik végén 25 EcoRl bővítésű, és a másik, tompa végén egy 3'T-csoportban végződik, a pMC200-nak az 5700 bp értékű framgentum Xbal-helyének polimerázzal való helyreállítása után kapott, 5700 bp értékű Xbal-EcoRI- fragmentumával fúzióba visszük. 19. Eljárás HBsAg előállítására, azzal jellemezve, hogy egy HBsAg kódolására képes nukleotid-szekvenciát és egy élesztőgomba-<zr^3-génből származó, a HBsAg-szekvenciának élesztőgombában való transz- gg kripciójára képes regulátor szakaszt tartalmazó, 1—12. igénypont szerint előállított rekombináns DNS-molekulát élesztőgomba sejtekbe inszertáljuk, az élesztőgombát tenyésztjük, és a keletkezett HBsAg-t összegyűjtjük. 20. A 19. igénypont szerinti eljárás HBsAg előállítására, azzal jellemezve, hogy HBsAg-szekvenciaként adw szerotípusú Da ne-részecskékből kivont, és az élesztőgomba regulátor szakaszának Bglll-helyére inszertált BamHI-fragmentumot alkalmazunk. 21. A 19. igénypont szerinti eljárás HBsAg előállítására, azzal jellemezve, hogy a HBsAg egy olyan Hhal-fragmcntum, amely egy ayw szerotípusú, Danerészceskékhűl kivont tUiV DNS-ből kapott BamllI- fragmentumok fuzionált párjából származik, és egy olyan, az 1480 bp értékű fragmentumot tartalmazó, a pMC200 5700 bp értékű Xbal-helyének polimerázzal való helyreállítása után kapott, 5700 bp értékű Xbal -EcoRI-fragmcnlumáva! fuzionált molekula Xbal-helyére van inszcrtálva, amelynek a regulátor szakasza a pMC200-nak egy olyan, 1480 bp értékű fragmentuma, amelynek egyik végén EcoRl kibővítése van, a másik végén tompa végű 3' T-csoportban végződik. 22. A 19. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy élesztőgombaként S. cercvisiae DC5 vagy Icló97d törzset alkalmazunk. 23. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy élesztőgombaként S. cerevisiae DC5 vagy lcl697d törzset alkalmazunk. 24. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy élesztőgombaként S. cerevisiae 1 cl 697d törzset alkalmazunk. 25. Eljárás hepatitis B vírus vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy a 19—24. igénypontok bármelyike szerint előállított HBsAg-t a gyógyászatban szokásos segédsanyagokkal vakcinává alakítjuk. 7 db ábra 12
