196452. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikrobiológiai úton előállított alfa- és béta-interferonok, ezeket kódoló DNS-szekvenciák, genetikai információt tartalmazó mikroorganizmusok előállítására
20 196452 21 Primer: egy RNS molekula egy darabjával komplementer oligonukleotid, amelyből kiindulva a cDNS szintézise végbemegy Próba-anyag: lásd a hibridizációs próba-anyagnál Promoter: DNS szekvencia, amelyhez az RNS polimeráz kötődik RBS: lásd: riboszóma kötő szekvencia Rekombináns DNS: olyan DNS szekvencia, amely különböző eredetű in vitro egymáshoz kapcsolt DNS darabokból áll Replikáció (DNS-é): egy DNS molekula megkettőződése Restrikciós analízis: egy DNS molekula feltérképezése a restrikciós endonukleázok hasítási helyeinek figyelembevételével Restrikciós endonukleáz: enzim, amely a kétszálú DNS-t egy meghatározott DNS szekvenciánál hasítja. Restrikciós térképezés: lásd: restrikciós analízis Reverz transzkripció: RNS molekula cDNS másolatának előállítása templát és oligonukleotid segítségével Riboszóma kötő szekvencia: a mRNS azon része, amely a riboszómához tud kötődni RNS: ribonukleinsav . RNS-polimeráz: enzim, amely a DNS-el komplementer RNS láncot tud szintetizálni Szacharóz grádiens: (RNS-) molekulák keverékének felbontásához szolgáló eljárás a molekulák tömege alapján SDS: nátrium-dodecilszulfát Szűrővizsgálat (screening): egy bizonyos tulajdonság keresésére irányuló vizsgálat Szekvencia komplexitás: meghatározott mennyiségű DNS-ben a minőségileg különböző DNS szekvenciák száma Transzformált sejt: baktérium, amely transzformáció révén idegen DNS-t tartalmaz Transzformáció: idegen DNS beépítése baktriumokba Transzkripció: mRNS másolat készítése a vele komplementer DNS szekvenciáról Transzláció: a mRNS információjának átfordítása polipeptiddé (transzlációs termékké) Tridekanukleotid 13 nukleotid részből álló oligonukleotid Tridekanukleotid pozitív: tridekanukleotiddal hibridizáló Trisz: trisz-hidroximetil-aminometán U: uridin Vektor: idegen DNS baktériumokba történő beépítéséhez alkalmas hordozó, legtöbbször egy plazmid Vektor hibrid, azaz hibrid vektor: lásd: hibrid plazmid Az ábrák rövid ismertetése Az 1. ábra egy cDNS klónbank előállításának sematikus ábrázolása. A 2. ábra egy hibridizációs próba-anyagul szolgáló cDNS előállítását mutatja be, amelynek hatására egy specifikus tridekanukleotid primer alkalmazása következtében az IFN-cC- és IFN-/3-specifikus DNS szekvencia tartalom feldúsul. A 3. ábra egy klónbank telepeinek hibridizációjával kapott eredményt mutatja be. A hibridizáció Namalwa sejtekből származó, tridekanukleotiddal iniciált cDNS-el történt. Az ábra egy olyan nitrocellulóz membránszűró autoradiográfiás felvételét mutatja, amelyben 1536 különböző klón van. A nyíl egy tridekanukleotid kiónra mutat. A 4. ábra egy indukált és nem indukált Namalwa sejtekből származó poli(A)*RNS P1A6 plazmiddal végbement szürómembrán hibridizációjának autoradiográfiás képét ábrázolja. A vírussal indukált poli(A)*RNS-t (,i" a párok baloldali része) és a nem indukált Namalwa sejtekből származó poli(A)*RNS-t {.n' a párok jobboldali része) molekula tömegűk szerint elektroforézissel elválasztottuk, ezután a frakciókat nitrocellulóz szűrőre vittük át, majd a szűrőt radioaktív jelzéssel ellátott 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
