196429. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-béta-D-arabino-furanozil-citozin-5'-sztearil-foszfát mononátrium sójának és ezen só monohidrátjának előállítására
9 196-129 10 500 g Ara-C-5'-sztearil-foszfátot töltünk 1,5 1 vízhez, majd nátrium- hídroxid hozzáadásával az oldat pH-ját 10,8-ra állítjuk; ezután 6 liter etanolt adunk az elegyhez, amelyet lehűlés céljából tizenhat órán ét állni hagyjuk. Az így képződő csapadékot centrifugálással elkülönítjük, így nedves állapotban kapunk Ara-C-5’-sztearilfoszfát-mononátriumsót. Az így kapott nedves sót 30 °C hőmérsékleten, csökkentett nyomáson szárítva, 332 g amorf állapotú (aC-tipusú) Ara-C-5'-sztearil-foszfét-mononátriumsót kapunk, amelynek olvadáspontja 223 °C (bomlási hőfok). Folyadékkromatogréfiával igazoljuk, hogy az így kapott termék tisztasága 99,556- -os. Elxicm (273 nm, 0,1 n NaOH): 152,3. Egyező eredményt kapunk, ha etanol helyett acetont, metil-etil-ketont, THF-t vagy dioxánt hozzáadva csapatjuk ki a mononátriumsót. 1. példa 2. példa. 2.40 g vízmentes Ara-C-5’-sztearil-foszfáthoz adunk 6 ml vizet, majd 1 n nátrium-hidroxidos vizes oldat hozzáadáséval 12,0-ra állítjuk az elegy pH-ját; ezután 30 ml etanolt adunk az elegyhez, amelyet 55 °C hőmérsékleten három órán át keverünk. Ezután az elegyet lehűlés céljából tizenhat órán át állni hagyjuk, majd a csapadékot kiszűrjük és 30 °C hőmérsékleten, csökkentett nyomáson tíz órán át szárítjuk; így 1,83 g Ara-C-S’-sztearil-foszfát-mononátriumsót (oC-típus) kapunk, amelynek olvadáspontja 220 °C (bomlási hőfok). Folyadékkromatográfiásán igazoljuk, hogy az igy kapott termék tisztasága 99,556-os. El5,icm (273 nm, 0,1 n NaOH): 150,9. 3. példa 2.40 g Ara-C-5’-sztearil-foszfáthoz 10 ml vizet adunk, majd nátrium-hidroxid hozzáadásával az elegy pH-ját 10,0-re állítjuk, eközben keverve azt; az igy képződött oldatot csökkentett nyomáson szárazra pároljuk; így 2,30 g Ara-C-5’-sztearil-foszfát-mononátriumsót (oé-tipus) kapunk, amelynek olvadáspontja 219,8 °C (bomlási hőfok). Folyadékkromatogréfiával igazoljuk, hogy az így kapott termék tisztasága 99,156-os. E«lc» (273 nm, 0,1 n NaOH): 152,G. 4. példa. 6,4 g (10 mmól) N4,02’,03’-triacetil-\ra-C-S'-foszfát-tri-n-butil-ammóniu msóhoz adunk 5 g sztearil-alkoholt, 30 mi piridint és 8 g p-toluolszulfonil-kloridot és az elegyet 40 °C hőmérsékleten tartjuk három órán át. Ezután a reakcióelegvet 50 ml víz és 50 ml kloroform elegyével extraháljuk. A kloroformos oldatban lévő triacetil-szérmazékot deacetilezzük 20 ml vizes ammónia és etanol hozzáadásával, majd a deacetilátumot vízzel extraháljuk. A vizes fázis elkülönítése után annak pH-ját tömény hidrogén-klorid hozzáadásával, 2,5-re állítjuk, a kiváló Ara-C-5'-sztearil-foszfátot kiszűrjük. Az igy kapott csapadékhoz 20 ml vizet adunk és az oldat pH-ját 1 n nátrium-hidroxidos vizes oldat hozzáadásával 10,5-re állítjuk, majd hozzáadunk 80 ml etanolt. A keletkezett csapadékot kiszűrjük, igy nedves állapotú Ara-C-5’-sztearil-foszfát-mononátriumsót (eC-típus) kapunk; a nedves anyagot a 2. példában leírt módon szárítva, 4,20 g Ara-C-5’-sztearil-foszfát-mononátriumsót (oC-típus) kapunk, amelynek olvadáspontja 221 nC (bomlási hőfok). Folyadékkromatográfiásán igazoljuk, hogy az így kapott termék tisztasága 99,6256- -os. Enicq, (273 nm, 0,1 n NaOH): 151,4. 5. példa A 4. példában leírt módon kapott 10 g Ara-C-S'-sztearil-foszfiahoz 50 ml vizet adunk és nátrium-hidroxid hozzáadásával az elegy pH-ját 10,5-re állítjuk keverés közben. Az elegyet harminc percen át keverjük, majd 120 ml 9556-os etanololdatot adunk hozzá és az igy kicsapatott mononátriumsót kiszűrjük. Az így kapott nedves állapotú (mintegy 20 tömegszázalékos nedvességtartalom) 8,5 g mononátriumsót 30 ml etanolban szuszpendéliuk, a szuszpenziót kilencven percen ét keverjük, majd az igy kezelt szuszpenzióból kiszűrjük a kristályokat és azokat csökkentett nyomáson, 40 °C hőmérsékleten szárítjuk; igy kapunk Ara-C-5’-sztearilfoszfát-mononátriumsó-monohidrátot (/3-tipusú kristályok), amelynek olvadáspontja 221 °C (bomlási hőfok). Az igy kapott termék röntgensugaras elhajlási színképét az 1. ábrán, elemzési eredményét az 1, táblázatban adjuk, a termék DTA-jelleggörbéjét a 4. ábra mutatja. A fenti eljárást megismételjük olyan - önmagában ismert módon kapott - 10 g-nyi Ara-C-ö’-sztearil-foszfátos kiindulási anyaggal, amely tartalmaz Ara-C-5’-sztearil-foszfát nátriumsót is (a nátriumarány 0,75 mólnyi), igy is a-típusú kristályok alakjában kapunk Ara-C-ő’-sztearil-foszfát-mononátriumsó-monohidrát.ot.. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
