196421. lajstromszámú szabadalom • Eljárás amikacin szelektív szintézisére
10 196421 11 savoldattal megsavanyitva, szénnel és további metanollal kezelve fezér kristályos anyagként 2,6 g amikacin-szulfátot kapunk, melynek mikrobiológiai titere 680 ng/ml és amelynek fiz-kém. jellemzői a következők: BBK11, kanamicin < 0.5% H2O = 8.7% szulfát - 24.5% [oC]dk = 80» pH(c = 1, H2O) = 3.2 3. példa Ez az összehasonlító példa mutatja, hogy a komplexek szelektivitásét (és/vagy stabilitását) milyen alapvető mértékben befolyásolja a víz, amely - ellentétben a kanamicin A-val vízmentes körülmények között végrehajtott koraplexképzéssel - nemcsak nem káros, hanem kifejezetten szükséges a két komplexképzó hely közötti különbség létrehozása céljából. Valójában viz nélkül következik be a 3,6’-di-N-benzil-oxi-karbonil-kanamicin A (VI képlet) acilezése kétértékű kationok jelenlétében, valószínűleg azért, mert az N-3" helyzeten kivül az N-l helyzetben is stabil komplex jön létre. 5,1 g 85% titerü 3,6’-di-N-benzil-oxi-karbonil-kanamicin A-t (5,87 millimól) 50 ml dimetil-szulfoxidban oldunk és az oldathoz 3,9 g {21,9 millimól) vízmentes cink-acetátot adunk. Szobahőmérsékleten való 2 órás keverés után hozzáadjuk a 4-benzíl-oxi-karbonil-amino-2-hidroxi- vajsav N-hidroxi-szukcinimiddel képzett észterét metilén-kloridban oldva (3,28 g 140 ml-ben). 5 órai keverés után izolálás céljából a metilén-kloridot lepároljuk és a maradékot 20 °C-on víz (125 ml) és tömény ammóniaoldat (25 ml) elegyével perkoláljuk. A terméket leszűrjük, mossuk és 45 °C-on kályhában megszáritjuk. 5,7 g 80% titerü kiindulási terméket kapunk az N-l helyzetű acilezés nyoma nélkül. Ilyen körülmények között az N-l és N-3" pozíciók blokkolódnak az acilezést meggátló komplexek kialakulása következtében. Az alábbiakban összehasonlításképpen néhány ismert és alkalmazott amikacin-előállitási eljárásnál adunk meg. kapott kitermelési értéket Kanamiintermedier cin/amikacin 1. eljárás 9.9% IV képletü let vegyü-2. eljárás 10.6% IV képletű let vegyü-3. eljárás 50% szílilezett kanamicin 4. eljárás-60% képletü vegyület 1. élj.: H. Kawaguchi, USP No. 3,781 268 2. élj.: T. Naito et al. French Patent No. 2.272 009 3. élj.: Cron.-Chem. Comm. 266 (1979) 4. élj.: T. Tsuchiya Belgium Patent No. 879.925 A 3. eljárásnál az 50%-os kitermelés nyers termékre vonatkozik, az ezt követő kromatográfiás tisztítási eljárás során ez az érték ~40%-ra csökken. A 4. eljárásnál - melynél az amikacin kitermelése jó - a szükséges reagens és oldószerek költségesek és toxikusak. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás amikacin szelektív szintézisére 3- és 6’-helyzetben védett, célszerűen N-benziloxi-karbonil-csoporttal védett kanamicin A-nak egy L-(-)-4-amino-2-hidroxi-vajsav-származékkal történő acilezésével, azzal jellemezve, hogy a 3- és 6’-helyzetben védet:. kanamicin A-t kétértékű fém, így cink-, nikkel- vagy réz-sóval reagáltatjuk oldószerként vagy társoldószerként vizet használva, a képződött komplexet L-(-)-4-amino-2-hidroxi-vajsav olyan származékával melyben az aniinocsoport védett, célszerűen N-benzíloxi-karbonil-csoporttal védett, és a karboxilcsoportot célszerűen N-hidroxi-szukcinimid-észterré aktiváltuk - reagáltatjuk, vizes lűgoldatot adunk hozzá, majd az acilezett terméket ismert módon elkülönítjük és a védőcsoportokat lehasítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a közbenső komplexet nem izoláljuk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a komplexképzést vízben, vagy víz és szerves oldószer, mint dímetil-szulfoxid, dimelil-formamid, acetonitril, aceton, tetrahidrofurán vagy rövidszénláncú alifás alkohol keverékében hajtjuk végre. 4. A 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kétértékű fémkationként cink(II)iont használunk, 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a só anionjaként gyenge szerves savakból származó anionokat használunk. 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy anionként acetátot, propionátot vagy benzoátot használunk. 7. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kétértékű fórasóként cink-aceátot alkalmazunk. 8. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az amino-funkciók vódőcsoportjaiként adott esetben szunbsztituált benzil-oxi-karbonil-csoportokat alkalmazunk. 9. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kétértékű fémkation sóját a kiindulási kanamicin-szérmazékra vonatkoz-5 LU 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
