196420. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforilezett N-glikozil-amid, karbamid- és karbamát- származékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
11 196420 12 Primer immorális immunitás növelése in vitro kísérletekben juh-eritrocitak iSEl alkalmazása esetében. In vitro szuszpenziótenyészetben egér-lép sejteken heterológ vörös vérsejtekkel végzett primer immunizálással immorális immunreakciót idézünk elő [Mishell R.J és Dutton R.W.: Exp.Med. 126 423 (1967)1. E művelet során egér-lép sejteket (Balb/c) 5 napig antigén (SE) és a vizsgálati anyag jelenlétében tenyésztünk. A képződött sejteket elkülönítjük, mossuk, majd az antigénnel együtt fél— -szilárd agar-lemezre visszük, ezután 2 óra hosszat 37 °C hőmérsékleten inkubáljuk [Jerne N.K., Nordín A.A. és Henryl C.: Cell bound antibodies' "Amos és Koprowsky szerkesztésében Winstar Inst. Press, Philadelphia, 109 oldaltól (1963)]. Az egér-limfociták szenzibilizálásával a primér tenyészetben antitestek (AK) képződnek. A specifikus antitestek az SE-antigénhez kötődnek és a komplement anyagok jelenlétében ezen sejteket feloldják. A találmány szerinti vegyületek a dózistól függően 1-100 ug/ml koncentráció tartományban képesek az antitest képzést fokozni. Primer humoralis immunitás növelésének vizsgálata in vivo körülmények között oldható antigén ovalbuminnal szemben NMRI-egereket suboptimális antigéndózissal (1 ug/állat a 0 napon) subkutan immunizálunk. A suboptimális antigén-stimulációval csak kisszámú limfociátét lehetett antitestképzésre serkenteni. Az állatokat a találmány szerinti vegyületekkel egy alkalommal 30 mg/kg mennyiségben subkután kezelve, az állatok szérumában jelentősen megnövekedett az antitestek mennyisége (ps.0,03). Az antitest-titer meghatározása indirekt hemagglutinációs módszerrel történt a 10. napon. A kezelés okozta hatást a 10g2-titer geometriai középértékével fejezzük ki. A találmány szerinti vegyületek immun-stimuláló hatása ellentétben egyéb, például bakteriális immunstimulációval igy például Gram-negatív baktériumokból származó LPS hatásával, antigén-függő. Ez azt jelenti, hogy a találmány szerinti vegyületek antitest termelést fokozó hatásukat csak egy antigén (itt SE vagy ovalbium) jelenlétében fejtik ki. Immunstimulánsok (pl.LPS) nem fejtenek ki mitogén hatást. Toxicitás vizsgálata Bár a találmány szerinti vegyületek teljesítményfokozó listásukat már lü mg/kg i.p. vagy perorális dózisban kifejtik a kísérleti egereken; toxikus hatás azonban (100 mg) kis dózis beadása után sem észlelhető. Ebből megállapítható, hogy a találmány szerinti vegyületeket a kísérleti állatok jól tolerálják. A találmány szerinti vegyületek kedvező hatást fejtenek ki, antigénnel együtt adva annak immunogén hatását növelik, ezen túlmenően szisztematikus alkalmazás esetében növelik a kezelt szervezet immunológiai aktivitását. A találmány szerinti vegyületek képesek a ümiooiták antitest képző képességét, fokozni. Ily módon a találmány szerinti vegyuietek alkalmasak arra, hogy oltóanyaggal együtt adva, adjuvánsként fokozzák az oltóanyag hatását, és igy a bakteriális, vagy vi- i usos fertőzés ellen, valamint paraziták ellen leadott védőanyag hatását növeljék. Ezen túlmenően a találmány' szerinti vegyületek adjuvánsként alkalmazhatók antigénnel elegyítve a terápiás és diagnosztikai célokat szolgáló kísérleti és ipari antiszérumok előállításánál. Emellett a találmány szerinti vegy'ületek alkalmasak arra is, hogy az emberi és állati szervezetben lejátszódó védekező reakciókat antigén egyidejű hozzáadása nélkül is serkentsék. A találmány szerinti vegyületek alkalmasak arra, hogy a szervezőt saját védelmét krónikus és akut fertőzések esetében, de akár szelektív (antigénspecifikus) immunológiai károsodások esetében fokozzák. Az immunológiai károsodások között említjük meg az idős korban, továbbá súlyos prímér megbetegedéseknél, valamint az ionizáló sugarakkal vagy immun-elnyomó anyagokkal végzett kezelés után fellépő károsodásokat. A találmány szerinti vegyületeket fertőzés ellen előirt, antibiotikumokkal, gyógyszerekkel és kemoterápiás anyagokkal egy7ütt adhatjuk az immunológiai károsodás leküzdésére. A találmány szerinti vegyületeket profilaktikus kezelésben is alkalmazhatjuk a humán és állatgyógyászatban egyaránt fertőző megbetegedések megelőzésére. A találmány szerinti vegyületeket alkalmazhatjuk a már fertőzött személyek és állatok kezelésére profilikus szerként önmagukban vagy antibiotikummal végzett kezeléssel egyidejűleg az antibiotikumok és a kemoterápiás szerek (így például penicillin, cefalosporir , aminoglükozidok) hatásának növelésére. Azt tapasztaltuk, hogy az egereket olyan patogén mikroorganizmusokkal kézéivé, ami egyébként az állatoknak 24-28 órán belül; pusztulásához vezetne, az állatok pusztulása elkerülhető, ha az állatokat előnyösen int.raperitoneálisan profilaktikus kezelésben részesítjük, és a profilaktikus kezeléshez a találmány szerinti vegyületeket alkalmazzuk. Szamos Gram-pozitív (igy például Staphylococousok) továbbá Gram-negatív (igy7 például E.coli, Klebsiella, Proteus, Pseudomoas) által okozott fertőzés esetében eredményesen használhatók profilaktikus kezelésnél a találmány szerinti vegyületek. így például a patogén Klebsiella 63- törzzse) fertőzött egerek 40-100%-a túlélte a fertőzést, ha az állatokat (például 18 órával a fertőzés előtt) 1-20 mg/kg dózisban a találmány7 szerinti vegyületekkel kezeltük. Ez5 10 15 20 25 30 35 40 45 5C 55 60 65 7
