196202. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-(4-[2,3-d]-pirimidin-6-il)-alkil-benzoil-L-glutaminsav származékok és e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

196 202

2

lyet könnyen kicsaphatunk a pH beállításával, például ccetsavval történő savanyítással. A keletkező termékek általában magas olvadásponté kristályos anyagok vagy mikrokristályos sziláid anyagok.

25. példa

1.0 g dietil-N-/4-[2-/2-acctamido-4-hidroxi-5, 6, 7, 8-tetrahidropirido [3,2-d] pirimidin-6-il/-eti!]benzoiI/-L-glutamát és 880 mg d/+/-10-kámforszulfonsav 50 mi vízmentes ctanollal készített ele* gyét visszafolyatás közben melegítjük 4 óra hoszszat. A reakcióclcgyct szobahőmérsékletre engedjük icbídni és éjszakán át állni hagyjuk. A képződött fehér színű szilárd anyagot szűréssel elkülönítjük és frakcionáltan kristályosítjuk hatszor etanolból. ily módon adietil-N-/4-[2-/2-acetamido-4-hidroxi-5, 6, 7, 8-tetrahidropirido [2,3-d] pirimidin-6- il/-ctil]-benzoil/—glutamát d0+/-10-kámforszulfonát „B” diasztereoizomerjét kapjuk 37 mg mennyiségben.

Op. 223-225 °C.

fajikTM =-20,02°.

Az oldószert eltávolítjuk az anyalúgbó! lepárlással és a keletkező szilárd anyagot kétszer ki kristályosítjuk cíanolból, így a dieti!-N-M-[2-/2-acetamido-4-hidroxi-5, 6, 7, 8-tetrahidropirido [2,3-d] pirímidin-6-il/-efil]-benzoil/-L-giuíamát d/+/-10- kámforszulfonát „A” diasztereoizomerjét kapjuk. Mik« =+29,35°.

A díetil-N-/4-[2-/2-acetamido-4-hidroxi-5, 6, 7, 8-tetrahiíTopirido [2,3-d] pirimidin-6-i!/-etil]-benzoil/-L-glutamát d/+/-10-kámforszu!fonát-diasztereoizomer „B” 3 ml 1 normál vizes nátrium-hidroxid-oldaíot tartalmazó 50 ml metanollal készített oldatát szobahőmérsékleten keverjük 72 órán át. Ezután 2 mi ccetsavat adunk az oldathoz és ezt követően centrifugálissal kinyerjük a keletkezett N-/4-[2-/2~amino-4~hidroxi-5,6,7,8-tctrahidropirido [2,3-d] pÍHmidin-6-i!/-eti!]-benzoi!/-L-g!utaminsav-diasztereoszomer „B”-í.

Op. 224-227°C(bomlik).

MikTM = 21,0581° (c = 0,636, 0,1 normál Na- OH): XmM278nm. 222nm;

NMR (CDCI3) delta 1,85 (m, 2H), 1,98 (m, ÏH), 2,25 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2,92 (m, 5H),

3,25 (î, J = 10 Hz, 1H), 3,82 (d, J = 10 Hz, 1H) 513 (m, 1H), 7,43 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,84 (d, J = 9 Hz, 2H). Az optikai tisztaság > 97%.

A fenti módon járunk cl azzal a különbséggel, hogy dieíil-N-/4-[2-/2-acetamido-4-hidroxi-5, 6, 7, 8-tetrahidropirido [2,3-d]-pirimidin-6-il/-ctil]-bcnzoil/-L-gluíamát d/+/-10-kámforszulfonát-diasztcrcoizomer „A”-í használunk diasztereoizomcr„B” helyett és így N-/4-[2-/2-amino-4-hidroxi-5, 6, 7, 8-tctrahidropirido [2.3-d] pirimidin-6-il/-ctil]-benzoil/L-glutaminsav-diasztcreoizomcr „A”-t kapunk.

Op. 253-255 °C (bomlik).

MikTM =+31,0915°(c = 3,605,0,1 normál Na- OH); XmiI 278 nm, 222nm;

NMR (CDCI3) delta 1,85 (m, 2H), 1,98 (m. 1H). 2.25 (m, 1H), 2.45 (m. 1H), 2.68 (m, 1H),

2.92 (ni, 5H), 2,25 (t, J = 10 Hz, 1H), 3.82 (d. .1 - 10 Hz 1H), 5.13 (m, 1H), 7.43 (d, .1 = 9 Hz). 2H), 7,84 (d, J = 9 Hz, 2H),

Az optikai tisztaság > 97%.

26. példa

Az 1CW értéket diasztereoizomerom „A”-ra cs diasztcrcoizomer „B”-re CCRF—CEM teljes Inimán leukémia sejtsoron határoztuk meg. A kísérletek eredményeit az alábbiakban adjuk meg.

Vcgyület íCsn(mcg/ml)

,»■ W- " -U' l»-l- '»-MS1" ..................... .......

Diasziftreoizomer^A" 2,6* IO-3

DiasztfrcoizomcrJB” 3,4xl0-3

27. példa

B— 16 melanoma tumorsejteket ültettünk be szubkután C57BUG egerek hónaljrc.szcbc. Minden »(taghoz 10 egérből álló csoportokat használtunk. Ezt követően naponta adtuk be az állatok N-/4-[2-/2-amino-4-hklroxi-5,6,7.8-tetrahidropirido [2,3-d] pirimidt«-ki!/-etil]-bcazoil/-L-glutaminsav-diasztercoizomer „A"-t és -íliasztcreoizomer „B”-t. Tíz nap múlva megmértük a kontrollfumor tömegét (csak hígítóanyagot kapott egerek) és ezt összehasonlítottuk olyan állatoknál kapott tömegekkel, amelyek a vizsgált vegyületet kapták, majd az eredményekből kiszámítottuk a százalékos gátlást. A kapott eredményeket az alábbiakban tudjuk meg.

Vegyük!

A-ítig

%-tíK gátlás

Túlélők

Ácsi)

izomer

elegye

1,60

5

9/9

3,12

12

9/9

6,25

13

9/9

12,58

50

9/9

A izomer

1,60

47

9/9

3,12

24

9/9

6,25

0

9/9

12,50

0

9/9

B izomer

1.«

n

10/10

3,12

m.

10/10

6,25

%

10/10

12,50

1®

10/10

25,00

m

10/10

50,00

m

9/10

Vcgyfilet

Adag

(mrAg)

%-OS gátlás

Túlélők

B izomer

100,00

M

8/10

2®,

00

100

6/10

13

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65