196180. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új alfa,alfa-difenil-4-aril-4-hidroxi-1-piperidin-butánamid-N-oxid származékok előállítására
9 196180 10 fa,alfa-difenil-l-piperidin—butánamid-N-oxidot (5. vegyület) kapjuk. B) Farmakológiai vizsgálatok 6. példa Patkányokon végzett ricinusolaj-teszt Wistar-törzsbeli nőstény patkányokon egy éjszakén át éheztetünk, majd mindegyik állatot intravénásán a vizsgálni kívánt vegyület vizsgálni kívánt dózisával kezelünk. 1 óra elteltével az állatoknak orálisan 1 ml ri- 15 cinusolajat adunk be. Mindegyik állatot külón-külön tartjuk ketrecben és a ricinusolajjal végzett kezelés után két órával megállapítjuk, hogy hasmenés fellépett-e. Az EDso érték az a mg/testsúlykilogramm egységben 20 kifejezett dózis, amelynél a kísérleti állatok 50%-ánál nem lépett fel hasmenés. Ezt az értéket megadjuk a találmány szerinti 1. vegyületre és a 3 714 159 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban is- 25 mertetett, Loperamide triviális név alatt ismert 4-(4-klór-fenil)-4-hidroxi-N,N-dimetil-alfa,alfa-difenil-l-piperidin-butánamidra az I. táblázatban. 7. példa Patkányokon végzett farokvisszahúzási teszt Wistar-törzsbeli nőstény patkányokat egy éjszakán át éheztetünk, majd mindegyik állatot intravénásán a vizsgálni kívánt vegyület vizsgálni kívánt dózisával kezelünk. Az így kezelt patkányokat külön-külön fogvatartásra alkalmas ketrecbe helyezzük. Ezután a farkuk végét 5 cm hosszúságban bemártjuk állandóan 55 °C-on tartott vizet tartalmazó csészébe. A bemerítés utáni 10 másodpercen belül értékeljük a jellegzetes farokvisszahúzási választ. A mg/testsúlykilogramm egységben kifejezett EDso érték az a f, dózis, amely képes az állatok 50%-ánál a jellegzetes farokvisszahúzási reflexet 10 másodpercnél hosszabb időn át elnyomni. Az 5. példa végén említett két vegyület EDso értékeit szintén az I. táblázatban adjuk meg. 10 Ezekből az EDso értékekből az a következtetés vonható le, hogy az ismert vegyület gátolja a jellegzetes farokvisszahúzási reflexet, míg az 1. vegyület nem mutat ilyen hatást. 8. példa Toxicitás meghatározása Wistar-törzsbeli nőstény patkányokat különböző mennyiségű vizsgálandó vegyülettel kezelünk. Az LDso az a mg/testsúlykilogramm egységben kifejezett dózis, amely a kísérleti állatok 50%-ának elpusztulását okozza. Ezeket az LDso értékeket az 5. példa végén említett két vegyületre szintén az I. táblázatban adjuk meg. 9. példa A biztonsági határ és a hasmenés elleni specifikusság meghatározása A hasmenés elleni hatás vonatkozásában a biztonsági határt mint a ricinusolaj-tesztben kapott EDso érték és az LDso érték arányát definiáljuk. A hasmenés elleni specifikusság a ricinusolaj-tesztben kapott EDso érték és a farokvisszahúzási tesztben kapott EDso érték aránya. Ezeket is megadjuk az I. táblázatban, amelyből látható, hogy mindkét féle érték kedvezőbb a találmány szerinti 1. vegyületnél, mint az ismert vegyületnél. I. Táblázat Kísérleti ricinusolajfarokvisszahúbiztonsági határ hasmenés elleni vegyület teszt EDso (mg/kg) zási teszt LDso (mg/kg) ED 50 specifikusság Loperamide 0.095 2.83 5.92 62.3 29.8 1. 0.21 >20.0 28.3 135 >95 6
