196123. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antitumor hatású antraciklin-glikozidot tartalmazó injektálhato oldat előállítására
1 2 21. táblázat Arrhenius megközelítés. Pszeudo-elsőrendű sebességi konstansok, Arrhenius egyenlet, számított tc>o% . Pszeudo-elsőrendű sebességi konstansok, észlelt értékek (K0jjS) Hőmérséklet Kobs-103 Cl/nap) Korrelációs koefficiens 27 °C 0,850 0,986 35 °C 3.506 0,983 45 °C 12.790 0,995 55 °C 49.340 0,995 , Arrhenius egyenlet a 27 °C-os, 35 °C-os, 45 °C-os és 55 °C-os sebességi konstansokból Korrelációs koefficiens = 0,9988 . Pszeudo-elsőrendű sebességi konstansok, számított értékek (K) Hőmérséklet K.103(l/nap) tpQ^(nap) 95%-os biztonsági határok 4°C 0,019 5,652 3,079-10,380 8°C 0,038 2,745 1,603-v 4,697 15°C 0,130 810 532-1,238 27°C 0,918 115 89-147 16. példa 2,5—3,5 pH-jú doxorubicin-készítmények hosszúlejáratú stabilitása Batch-eket vizsgáltunk, a használt kiszerelési formák és csomagolások a 22—24. és a 31—33. táblázatokban láthatók. A készítményeket az alábbiak szerint állítjuk elő: A doxorubicin.HCl-ot a szükséges vízmennyiség vagy fiziológiai sóoldat körülbelül 90 %-ában feloldjuk, majd nitrogéngáz átbuborékoltatásával légtelenítjük. Cseppenként annyi sósavat adunk hozzá, hogy a 23. táblázatban jelölt pH értékeket elérjük. Ezután injekciós készítményekhez használt légtelenített vizet adunk hozzá, a 2 mg/ml-es doxorubicin-HCl koncentráció eléréséig. Az oldatokat egy -0,22 pm-es mikropórusos membránon szűrjük át, ntirogén nyomás alatt. 5 ml-es, 10 ml-es és 25 ml-es oldattérfogatokat helyezünk el I típusú színtelen, 10 ml-es, 14 ml-es és 39 ml-es térfogatú fiolákban. A fiolákat ezután teflonbevonatú gumidugókkal bedugjuk és alumíniumsapkákkal lezáquk. Az így elkészített készítményeket az oldat megjelenése, tisztasága, pH-ja, sterilitása és doxorubicin-HCl tartalma szempontjából vizsgáltuk. Vizsgálati módszerek Megjelenés és átlátszóság: vizuálisan pH: USP XXI Sterilitás: USP XXI (membránszűrés) Doxorubicin-HCl tartalom: HPLC ionpáros módzer és HPLC módszer (USP XXI) A HPLC ionpáros módszer doxorubicin-sósav-tartalom vizsgálatára; Oszloptöltet: álló fázis, Zorbax TMS Mozgó fázis: víz/acetonitril/metanol (54:29:17 térfogatarány), amely 2 ml/1 85%-os foszforsavat és 1 mg/ml nátrium-lauril-szulfátot tartalmaz (párosító szer) pH-ja 3,5 értékre állítva 2 n nátrium-hidroxiddal Mozgó fázis áramlási sebessége:.1,5 ml/perc Oszlophőmérséklet: környezeti (22 °C ± 2 °c) Analitikai hullámhossz: 254 nm A rendszer alkalmassági paraméterei: szimmetria faktor 0,7 és 1,2 között, az elméleti tányérok száma > 2500, a mérés reprodukálhatósága: variációs koefficiens < 1, n=6, újraoldási faktor > 1,2. A doxorubicin-HCl tartalom meghatározása céljára végzett HPLC ionpáros módszert értékeltük pontosság, linearitási érzékenység, specifikusság és stabilitás-jelző képesség szempontjából. A kapott eredmények: . %-os doxorubicin-HCl stabilitás (ionpáros módszer) ..pH álló helyzetben tárolt fiolákra vonatkoznak és az alábbi táblázatokban adjuk meg őket: 25. táblázat — 20°C-on tárolva, 26. és 34. táblázatok + 4 °C-on tárolva, 27. és 35. táblázatok + 8 °C-on tárolva, 28. és 36. táblázatok + 15 °C-on tárolva, 29. és 37. táblázatok + 27 °C-on tárolva, 30. táblázat 1076 és 2690 lux 38. táblázat 2690 lux tárolva. A táblázatokban megadott doxorubicin-HCl hatóanyagtartalom értékek három különböző mérés átlagából származnak. Ami a stabilitási mérés alatt vizsgált egyéb paramétereket illeti: — az oldat átlátszósága minden alkalmazott tárolási körülmény esetében változatlan, — az oldat külső megjelenése: a) a 4 °C-on és 8 °C-on tárolt mintáknál változatlan, b) kicsit megsötétedik 9 hónapig 15 °C-on, 3'hónapig 27 °C-on, 3 hónapig 1076 és 2690 lux tárolás után, — a zárórendszer minden elvégzett vizsgálatnál, minden tárolási körülmény esetében változatlan, — a sterilitás 12 hónapig, 8 °C-on való tárolás után változatlan. A megfordított helyzetben tárolt kontrollfiolák esetében kapott eredmények nem térnek el szignifikánsan az álló helyzetben tárolt fiolák esetében kapott eredményektől. Az USP HPLC módszerrel kapott %-os doxorubicin.HC1 stabilitási értékek nem különböznek szignifikánsan a 26—31. táblázatban megadott, HPLC ionpáros módszerrel kapott értékektől. A kapott stabilitási adatok azt jezik, hogy a pH= = 2,5—3,5 tartományban lévő különböző pH értékű vizsgált doxotubicin-HCl oldatok elérik az alacsonyabb elfogadhatósági értéket (a névleges koncentráció 90%-a) 15 °C-on körülbelül 9, 27 °C-on pedig karülbelül 2—3 hónap alatt, de 4 °C-on és 8 °C-on, azaz olyan hőmérsékleteken, amelyek hűtőszekrényben való tároláskor általában előfordulnak, 12 hónapnál tovább. A kereskedelmi liofilizált készítményből készített oldatok — melyeknek pH értéke 4,5 és 6 között változik, stabilitása sokkal alacsonyabb. Éppen ezért ajánlatos az ilyen oldatokat már 48 órás jégszekrényben való tárolás után eldobni. A 39. táblázat különböző anyagoknak a stabilitásra gyakorolt hatását mutatja-. 196.123 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 22
