196038. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5-izopropil-2'béta-dezoxi-urudint tartalmazó külső felhasználásra alkalmas, herpesz ellenes gyógyászati készítmény előállítására
1 2 196.038 Idő (óra) 3. táblázat D 1 -j -X, dpm/mg szerv Relatív rádiwdKiivitás dFpm/,*g bőr bőr agy vese máj lép tüdő 0,25 1,00 0,0006 0,01 0,008 0,005 0,008 0,50 1,00 0.0004 0,005 0,010 0,005 0,008 3.0 1,00 0,0001 0,003 0,002 0,002 0,002 6.0 1,00 0,0001 0,001 0,002 0,002 0,002 A 3, táblázat szemléletesen bizonyítja, hogy a rádióaktiv hatóanyag a táblázatban felsorolt szervek közül döntő mértékben a bőrben akkumulálódik, vagyis felszívódása a bőrszövetekben szelektív. A találmány további alapja az a felismerés, hogy az IPDU- ellentétben az egyéb említett gyógyászati célból alkalmazott pirimidin-nukleozidokkal — rendkívül ellenálló a nuklcázokkal szemben, melyek a nukleozidokat nukleo-bázisra és 2'-dezoxiribóz-l-foszfátra hasítják. Ez a tény mind enzimatikus in vitro eredményekkel (1. ábra), mint ,4C-vel jelzett IPDU in vivo mctabolizmus vizsgálatokkal bizonyítást nyert. A 2. ábrán látható, hogy az IPDU (I) 80—85 %-ban átalakulás nélkül, változatlan formában ürül ki a szervezetből. Vizsgálataink során azt is megállapítottuk, hogy az 5-izopropil-2’-0-dezoxi-uridin gyakorlatilag nem toxikus, nem mutagén, nem teratogén, a bőrre nem ártalmas, még a terápiás dózis többszöröse sem vált ki bőrirritációt, vagy allergiát. E kitűnő tulajdonságok következtében e vegyület kiválóan alkalmas antivirális, elsősorban herpesz ellenes bőrgyógyászati készítményekben való felhasználásra. Fentiekben leírt három, gyógyszertanilag váratlan felismerés alapján a találmány tárgya eljárás külső felhasználásra alkalmas, bőrben akkumulálódó antivitrális gyógyászati készítmény előállítására. E készítményt úgy állítjuk elő, hogy 0,02—5 tömeg% 5-izopropil-2’-/3-dezoxi-uridint a gyógyszerkészítésben szokásos hordozó, hígító és/vagy egyéb segédanyagokkal összekeverve külső felhasználásra alkalmas gyógyszerkészítménnyé alakítunk. A találmány szerinti eljárással szemgyógyászati készítményt is előállíthatunk olyan módon, hogy 0,1 — 1 tömeg% 5-izopropil-2'-/?-dezoxi-uridint elegyítünk a gyógyszerkészítésben szokásos hordozó, hígító és/vagy egyéb segédanyagokkal. A találmány szerinti eljárással előállított készítmények kiváló vírusellenes hatást mutatnak. Előállítható kenőcs, gél, emulzió, szuszpenzió, oldat, permet, tapasz, stb. alakjában. A készítmények hatóanyag-tartalma a felvitel módja és a kívánt kezelés szerint változik. Általában kielégítő eredményeket érhetünk el, ha a kezelendő bérfelületre 0,3—2,0 tömeg% 5-izopropiI-2’-/Tdezoxi-uridint viszünk fel. A találmány szerinti gyógyászati készítmények előállítása során hordozóanyagként elsősorban lanolint, vazelint, polietilén-glikolt, viaszt, valamint vizet és szerves oldószereket, pl. etanolt használhatunk. A készítmény típusától függően az előállítás során stabilizátort, emulgeátort, felületaktív anyagot, illatanyagot, színezéket és egyéb adalékanyagokat is alkalmazhatunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 A találmány szerinti gyógyászati kompozíciók az 5-izopropil-2’-0-dezoxi-uridin mellett tartalmazhatnak egyéb biológiailag aktív anyagokat is, így pl, gyulladáscsökkentő anyagokat, pl. prednizolont, fenilbutazont vagy hidrokortizont, bőrnyugtató anyagokat, pl. azulént, pörkszárításra alkalmas anyagokat, pl. cink-oxidot, stb. A találmány szerinti gyógyászati készítmények a gyógyszerkészítésben szokásos eljárásokkal állíthatók elő. Az 5-izopropil-2’-0-dezoxi-uridin ismert vegyület, előállítható az irodalomban leírt úton Szabolcs A., Sági J. és Ötvös L: Carbohydr. Nucleosides, Nucleotides 2, 197—211 /1975/, Nucleic Acid. Res. 1, 49-52 /1975/, Draminski M. és Zgit-Wroblewska A.: Pol. J. Chem. 54, 1085-1087 /1980/). Fehér, kristályos, szagtalan, enyhén kesernyés ízű anyag. Op.: 182—184 °C. Vízben 7,9 mg/cm3, metanolban 25,4 mg/cm3 és etanolban 11 mg/cm3 arányban oldódik szobahőmérsékleten. Gyakorlatilag oldhatatlan benzolban, kloroformban és éterben. Szobahőmérsékleten évekig eltartható. VRK (Kieselgel HF254 /Merck/ etil-acetátrmetanol 95:5) Rf= 0,43 UV abszorpció max. 267,4 ± 0,4 nm (moláris extinkciós koefficiens: 9500 ± 400, n= 50). Toxikológiai és bőrártalmatlansági vizsgálatok Akut toxicités Az anyagot intraperitoniálisan adagoltuk 14 napon át és az alábbi LD50 értékeket kaptuk: egér: 920 mg/kg patkány: 820 mg/kg nyúl: 2000 mg/kg 30 napos toxicitás patkányon Az állatok 30 napon át napi 5-50 mg/kg dózist kaptak i.p. adagolással. A megfigyelési időtartam alatt a kezeletlen kontroli-állatokhoz képest semmilyen elváltozás nem mutatkozott. Nem tapasztaltunk sem súlyváltozást, táplálkozási vagy idegrendszeri elváltozást, sem elhullást. A boncolási eredmények sem utaltak toxikus elváltozást előidéző hatásra. 6 hetes akut és szubakut toxikológiai vizsgálat nyúlon Az állatok napi 3—30 mg/kg hatóanyagot kaptak i.p. adagolással. Sem a kezelési idő, sem a 2 hetes utómegfigyelés alatt toxikus tüneteket, testsúlyváltozást, ül. elhullást nem figyeltünk meg. A boncolás során itt sem találtunk szövettani elváltozást. Mutagenitás és karcinogén hatás vizsgálata Ames teszt alapján A vizsgálatot Salmonella typhimurium baktérium-mutánsokkal végeztük. 0,125-8,0 tömeg% 5-izopropil-2’-dezoxi-uridint tartalmazó vizes szuszpenziót, ill. oldatát, továbbá szilárd, finoman elporított hatóanyagot alkalmaztunk. A vizsgálatokhoz diffúziós-reverziós tesztet és folyadék-reverziós tesztet (Ames B.N. et al. /1973/, Proc. Nat. Acad. Sei. U$A 3
