195855. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a tumorellenes hatású LL-E33288 jelű antibiotikum-komplex és komponensei előállítására
2 195855 3 Találmányunk az (LI.-E33288<ri-Br, LL-E33288oci-J, LL-E33288f«-Br, LL-E33288c<2-J, LL-E33288<í3-BrI LL-33288ccs-J, LL-E3328ft^--Br, LL-E332880 í-Br, EI.-E33288/J i-J, LI,-E33288ßj-Br, LL-E33288/52-J LL-E33288-jti-Br, LI,-E33288'ji-J, és LL-E33288Íí-J jelzésű új antibaklérium- és tumorellenes hatású szerek fermentációs úton történő előállítására, nyers oldatokból történő kinyerése és feldúsítására, valamint tisztítására vonatkozik. Találmányunk ezenkívül egy, több vagy az öszszes fenti komponenst tartalmazó baktériumén tumorellenes szerek, ezek hígított formáinak és nyers koncentrátumainak előállítására vonatkozik új Micromonospora törzseikkel. A találmányunk szerinti eljárással előállítható antibiotikumok az LL-E33288 komplexnek felelnek meg. Az LL-E33288 antibiotikumok kémiailag egymással szoros rokonságban álló vegyületek. A 14 antibiotikumot fermentációs úton állítjuk elő és közvetlenül keverék alakjában nyerjük; ez az LL-E33288 komplex, az LL-E33288 jód-komplex vagy LL-E33288 bróm-komplex. Az LL-E33288 antibiotikumok jódtaralmú komponensei (pl. tn-J, cC2—J, cca—J, ßi-J, á2-J, li-J és ái-J) csak szervetlen vagy szerves jodidot tartalmazó táptalajon végzett fermentációk esetében keletkeznek, míg a bórtarlalmú komponensek (pl. cn-Br, ocj-Br, «a-Br, a-4-Br, ßi-Br, ß2-Br, és •yi-Br,) hasonlóképpen csak szervetlen vagy szerves brómidomot tartalmazó táptalajon végrehajtott fermentációk esetében képződnek. Az LL-E33288 komplexben levő komponensek aránya a fermentációs körülményektől, s a bróm- és jódtartalomtól függ. A komplex fö-komponensei az LL-E33288 /ji és LL-E33288 vi aritibiotikumok, amelyek összesen. a komplex kb. 90 %-át alkotják. Mellck-komponens az LL.-E33288«:], I.L-E33288.«, LL-E33288cc3, LL-E33288«:4-Br, 1,1,-E33288^2 és LL-E33288Si-J. Ezek ÖBSztömege a komplex tömegének kb. 10 %-a. Az LL-E33288 antibiotikumok Gram-pozitiv és Gram-negativ baktériumok ellen hatékonyak. A .Biochemical Induktion Assay" (Elespuru R, és Yarmolinsky M.: Environmental Mutagenesis 1, 65-78 (1979/1 módosított tesztje szerint valmennyi komponens hatásosnak bizonyult, a teszt során specifikusan mérik a teszt-vegyület azon képességét, hogy közvetlenül vagy közvetett módon képes-e DMA károsodást megindítani. A fenti teszt során az LL-E33288öi-Br, és LL-E33288 yi-Br, már 1.10'6 mcg/ml konceril.rációnál _n" dózisban aktívnak bizonyult A rajzok rövid ismertetése Az 1. ábrán az LL-E33288/J3-llr UV abszorpciós spektrumát tüntetjük fel. A 2. ábrán az LL-E332880 i-Br IR abszorpciós spektrumát mutatjuk be. A 3. ábrán az LL-E332880 í-Br proton mágneses rezonancia (a továbbiakban PMR) spektrumát mutatjuk be. A 4. ábrán az LL-E33288ßi-Br ,3C mágneses rezonancia spektrumát (a továbbiakban ME) mutatjuk be. Az 5. ábrán az LL-E33288ii-Br UV abszorpciós spektrumát tüntetjük fel. A C. ábra az LL-E33288-} ,-Br ÍR abszorpciós spektrumát tartalmazza. A 7. ábrán az LL-E33288-ji~Br PMR spektrumét mutatjuk be. A 8. ábrán az LL-E33288-ji-Br I3C MR spektrumát tüntetjük fel. A 9. ábra az LL-E33288tC2-J PMR spektrumát tartalmazza. A 10 ábrán LU-E33288cc3-J PMR spektrumét mutatjuk be. A 11. ábrán az LL-E33288ßí-J UV abszorpciós spektrumát tüntetjük fel. A 12. ábrán az LL-E33288ßi-J ÍR abszorpciós spektrumát mutatjuk be. A ]3. ábra az LL-E33288ii-J PHR spektrumát tartalmazza. A 14. ábrán az LL-E33288/)i-J I3C MR spektrumát mutatjuk be. A_ 15. ábra az LL-E33288-ji-J UV abszorbeiós spektrumát tartalmazza. A 16. ábrán az LL-E33288tí i-J IR abszorbeiós spektrumát mutatjuk fce. A 17. ábrán az LL-E33288’ji-J PMR spektrumát tüntetjük fel. A 18. ábra az LL~E33288-jr-J ”0 MR spektrumát tartalmazza. Az 1X^33288,9!^ és LL-E33288-J i-J aritibiotikumok fizikai-kémiai jellemzőit az alábbiakban ismertetjük; LE-E.)3288ß\-Bv 1) Hozzávetőleges elem analízis: C%= 48,6; H°/.=5,6; N%=2,9; S%=9,1 és Br%=5,5. A kémiai analízis elektronspektroszkópiás meghatározása (ESCA) során azt találtuk, hogy csak az alábbi elemek vannak jelen: C, H, N, O, S és Br. 2) OP: 146-150 °C (bomlás). 3) Fajlagos forgatóképesség: [cc]26 » = --'19 1 10 0 (c=0,l%, etanol). 4) UV abszorbeiós spektrum: lásd 1. ábra (metanol; savas metanol; bázikus metanol). 5) IR abszorbeiós spektrum: lásd 2. ábra (KBr lemezek). 6) PMR spektrum: lásd 3. ábra (300 MHz, CDCh). 7) I3C MR spektrum: lásd 4. ábra (75,43 MHz, CDCh, ppm, TMS); A fontosabb csúcsok az alábbiakban: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
